本标准规定了烟草中水溶性糖的测定方法。本标准适用于烟草的烟草制品。 YC/T 159-2002 烟草及烟草制品 水溶性糖的测定 连续流动法 YC/T159-2002 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 65. 160
备率号：10589—2002
中华人民共和国烟草行业标准
YC/T159-2002
烟草及烟草制品
水溶性糖的测定
连续流动法
Tobacco and tobacco products-Determination of watersoluble sugars -Continuous flow method2002~0912发布
国家烟草专卖局发布
2002-12-01实施
YC/T159—2002
本标准等效采用国际烟草科学研究合作中心（CORESTA)第38号推荐方法。本标准与CORESTA第38号推荐方法主要有以下技术差异：增加了水溶性总糖的测定，使本方法可以测定水溶性的还原糖和总糖。研究表明，采用本标准的测定结果可能高于YC/T32的测定结果，这是由于测定原理不同所造成的。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会归口。本标准起草单位：国家烟草质量监督检验中心。本标准主要起草人：刘惠民、李萍、李荣、王芳。398
1范围
烟草及烟草制品水溶性糖的测定连续流动法
本标准规定了烟草中水溶性糖的测定方法。本标准适用于烟草和烟草制品。2规范性引用文件
YC/T159—2002
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T5606.1卷烟抽样
YC/T5烟叶成批取样的一般原则
YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法3原理
用5%乙酸水溶液萃取烟草样品，萃取液中的糖(水溶性总糖测定时应水解)与对羟基苯甲酸酰肼反应，在85C的碱性介质中产生一黄色的偶氮化合物，其最大吸收波长为410nm，用比色计测定。注：如用水萃取，某些样品中的蔗糖会水解。4试剂免费标准bzxz.net
使用分析纯级试剂，水应为蒸馏水或同等纯度的水。4.1Brij35溶液(聚乙氧基月桂醚）将250gBrij35加人到1L水中，加热搅拌直至溶解。4. 20. 5 mol /L氢氧化钠溶液
将20g片状氢氧化钠加人到800mL水中，搅拌，放置冷却。溶解后加人0.5mLBrij35（4.1),用水稀释至 1L。
4.30.008mol/L氯化钙溶液
将1.75g氯化钙(CaCl2·6H,O)溶于水中，加人0.5mLBrij35溶液（4.1),用水稀释至1L。注：若溶液中有沉淀，应用定性滤纸过滤。4.45%乙酸溶液
用冰乙酸制备5%乙酸溶液（此溶液用于制备标准溶液、萃取溶液）。4.5活化5%乙酸溶液
取1L5%乙酸溶液（4.4）,加人0.5mLBrij35溶液（4.1)(此溶液用于冲洗系统）。4.60.5mol/L盐酸溶液
在通风橱中，将42mL发烟盐酸（质量分数为37%）缓慢加人到500mL水中，用水稀释至1L。4. 7 1. 0 mol/L 盐酸溶液
YC/T 1592002
在通风橱中，将84mL发烟盐酸（质量分数为37%）缓慢加人到500ml.水中，加人0.5mLBrii35溶液(4.1),用水稀释至1 L。
4. 81. 0 mol/L 氢氧化钠溶液
用500mL水溶解40g片状氢氧化钠，用水稀释至1L。4.95%对羟基苯甲酸酰肼溶液（HOCgH.CONHNH2）将250mL0.5mol/L盐酸溶液（4.6)加人到500mL容量瓶中，如人25g对羟基苯甲酸酰肼，使其溶解。加人10.5g柠檬酸[HOC(CH,COOH),COOH·H,O],溶解后用0.5mol/L盐酸溶液稀释至刻度。于5C贮存，使用时只取需要量。注：对羟基苯甲酸酰肼(质量分数大于97%)的纯度非常重要。如果有杂质，将会在管路中形成沉淀。可以用水重结晶进行纯化。如有下列情形则表明对羟基苯甲酸酰肼不纯：白色的对羟基苯甲酸酰肼结晶中有黑色颗粒；—5%对羟基苯甲酸酰肼溶液呈黄色；对羟基苯甲酸酰肼在0.5moi/L氢氧化钠溶液中溶解困难；溶液中有悬浮颗粒；
——基线呈波浪形。
5%对羟基苯甲酸酰耕溶液也可用下述方法进行制备：向烧杯中加入250ml:0.5mol/L盐酸溶液，加热至45C，持续搅拌下加人对羟基苯甲酸酰麟和柠樣酸，冷却后转人容量瓶中，用盐酸溶液稀释至刻度。用这种方法制备的对羟基苯甲酸酰肼溶液可避免在管路中形成沉淀。4. 10 D-葡萄糖
4.11标准溶液
4.11.1储备液：称取10.0gD-葡萄糖（4.10)于烧杯中，精确至0.0001g，用5%乙酸溶液（4.4)溶解后转人1L容量瓶中，用5%乙酸溶液定容至刻度。贮存于冰箱中。此溶液应每月制备一次。4.11.2：工作标准液：由储备液用5%乙酸溶液制备至少5个工作标准液，其浓度范围应覆盖预计检测到的样品含量。工作标准液应贮存于冰箱中，每两周配制一次。5仪器设备
常用实验仪器及
5.1连续流动分析仪（见图1），由下述各部分组成：一取样器；
一比例泵；
渗析器；
—加热槽：
螺旋管；
一比色计，配410nm滤光片；
记录仪。
5.2天平，感量0.0001g。
5.3振荡器。
6分析步骤
6.1抽样
按GB/T5606.1或YC/T5抽取样品。6.2按YC/T31制备试样，测定水分含量。6.3称取0.25g试料于50ml磨口三角瓶中，精确至0.0001g，加人25mL5%乙酸溶液，盖上塞子，400
在振荡器上振荡萃取30min。
6.4用定性滤纸过滤，弃去前几毫升滤液，收集后续滤液作分析之用。YC/T 159--2002
6.5上机运行工作标准液和样品液。如样品液浓度超出工作标准液的浓度范围，则应稀释。7.79 mL加热糖
7. 79 mL加热糖度液
152mm（6英寸）
410mm建光片
12.0mm×15mm流动池
熙/黑(0. 32 mL/min），空气
红/红(0. 80 mL/min ), 1. 0 mol/L盐酸(或水)白/白(0.60 mL/min），祥品
红/红2(0.80 mL/min）,1.0 mol/L氢氧化钠（戒水)程/白(0. 23 mL/min ), PAHBAH/接(0. 42 mL/min ). 空气
绿/绿(2. 0 mL/min),0. 5 mol/L 氢氧化钠楼/黄(0. 16 mL/min ), 0. 008 mol/L 氢化钙红/红(0.80mL/min）)，5%乙酸
图 1 水溶性糖测定管路图
注：测定总糖时，红/红为1.0mol/L盐酸，95C加热槽打开，测定还原糖时，红/红管为活化水，红/红2管为水，95℃加热槽关闭。
结果的计算与表述
7. 1水溶性糖的计算
以干基计的水溶性糖的含量，以葡萄糖计，由式(1)得出：cxv
m×(i-w)× 100
总（还原）糖（%）=
式中：
样品液总（还原）糖的仪器观测值，单位为毫克每寒升（mg/ml.）；V——萃取液的体积,单位为毫升(mL)；m—-试料的质量，单位为毫克(mg）；W—试样的水分含量。
7.2结果的表述
以两次测定的苹均值作为测定结果。（1)
若测得的水溶性糖含量大于或等于10.0%,结果精确至0.1%；若小于10.0%，结果精确至0.01%。8精密度
两次平行测定结果绝对值之差不应大于0.50%。401
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