NY/T 1156.3-2006 农药室内生物测定试验准则 杀菌剂 第3部分：抑制黄瓜霜霉菌病菌试验 平皿叶片法 NY/T1156.3-2006 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS65.100
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1156.3—2006
农药室内生物测定试验准则
杀菌剂
第3部分：抑制黄瓜霜霉病菌试验平血叶片法
Pesticides guidelines for laboratory bioactivity testsPart 3:Petri plate test for determining fungicide inhibition ofPseudoperonospora cubensis growth on detached leaves2006-07-10发布
2006-10-01实施
中华人民共和国农业部发布
《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》为系列标准。本部分是《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》的第3部分。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部农药检定所。本标准主要起草人：徐文平、朱春雨、张弘、吴新平、邱涧平、张薇。本标准由农业部农药检定所负责解释。NY/T1156.3—2006
1范围
农药室内生物测定试验准则杀菌剂NY/T 1156.3—2006
第3部分：抑制黄瓜霜霉病菌试验平血叶片法
本部分规定了平皿叶片法测定杀菌剂对黄瓜霜霉病菌生物活性的基本要求和方法。本部分适用于杀菌剂对黄瓜霜霉病菌生物活性测定的农药登记室内试验，其他试验参照本部分执行。
2试验条件
2.1试验靶标
黄瓜霜霉病菌（Pseudoberonosbora cubensis)。记录菌种来源。2.2仪器设备
2.2.1电子天平（感量0.1mg）；2.2.2喷雾器械；
2.2.3人工气候箱或光照保湿箱；2.2.4生物培养箱；
2.2.5培养Ⅲ；
2.2.6移液管或移液器等。
3试验设计
3.1试材准备
选用黄瓜感病品种盆栽，自上向下4叶位~6叶位，剪取相同部位、长势一致带有1cm～2cm叶柄的叶片，用湿棉球包裹叶柄放置在培养血中，保湿备用。3.2药剂
3.2.1试验药剂
试验药剂采用原药（母药），并注明通用名、商品名或代号、含量和生产厂家。3.2.2对照药剂
对照药剂采用已登记注册且生产上常用的原药。对照药剂的化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。
3.3试验步骤
3.3.1孢子囊悬浮液配制
选择发病叶片，用4七蒸馏水洗下叶片背面霜霉病菌孢子囊，配成悬浮液（浓度控制在每毫升1×105个～1×107个抱子囊），4℃下存放备用。3.3.2药剂配制
水溶性药剂直接用水溶解稀释。其他药剂选用合适的溶剂（如甲醇、内酮、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜等）溶解，用0.05%的吐温80水溶液稀释。根据药剂活性，设置5个~7个系列质量浓度，有机溶剂最终含量不超过1%。
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3.3.3药剂处理
将药液均匀喷施于叶片背面，待药液自然风于后，将各处理叶片叶背向上，按处理标记后排放在保湿盒中。试验设不含药剂的处理作空白对照。3.3.4接种与培养
用准备好的新鲜孢子囊悬浮液点滴10L接种于叶片背面。每叶片接种4滴，每处理不少于5片叶。保护性试验在药剂处理后24h接种，治疗性试验在药剂处理前24h接种。接种后盖上皿盖，置于人工气候箱或有光照的保湿箱，在每天连续光照/黑暗12h交替，温度为17℃～22℃，相对湿度90%以上的条件下培养。
4调查
视空白对照发病情况测量记录病斑直径，单位为米（mm），5数据统计及分析
5.1计算方法bzxZ.net
根据调查数据，按公式（1）计算防治效果，以百分数（%）表示，计算结果保留小数点后两位。P=DoDx100
式中：
P—防治效果：
Do空白对照病斑直径；
D药剂处理病斑直径。
5.2统计分析
根据各药剂浓度对数值及对应的防效几率值作回归分析计算各药剂的ECsD、EC0等值及其95%置信限。
进行药剂联合毒力测定时，根据Wadley法或孙云沛法计算混剂的增效系数（SR）或共毒系数（CTC），评价混剂的联合作用类型。Wadley法：根据增效系数（SR）来评价药剂混用的增效作用，即SR<0.5为拮抗作用0.5≤SR≤1,5为相加作用,SR>1.5为增效作用。增效系数（SR)按公式(2),(3)计算：PA+PB
XI=PA/A+Pa/B
式中：
X一混剂的ECso理论值，单位为毫克每升（mg/L）：P混剂中A的百分含量，单位为百分率（%）：PB
混剂中B的百分含量，单位为百分率（%）：混剂中A的ECso值，单位为毫克每升（mg/L）B—混剂中B的ECso值，单位为毫克每升（mg/L）。SR
式中：
混剂的增效系数；
混剂ECso理论值，单位为毫克每升（mg/L）：混剂ECso实测值，单位为毫克每升（mg/L）。(2)
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孙云沛法：根据共毒系数（CTC）来评价药剂混用的增效作用，即CTC≤80为拮抗作用，80式中：
一混剂实测的毒力指数：
标准药剂的ECso，单位为毫克每升(mg/L)：S
M—混剂的ECso，单位为毫克每升(mg/L）。I...
TTI=TIAXPA+TIBXPB
式中：
式中：
6结果
一混剂理论毒力指数
-A药剂毒力指数；
一A药剂在混剂中的百分含量，单位为百分率（%）：-B药剂毒力指数；
B药剂在混剂中的百分含量，单位为百分率（%）。CTC-
共毒系数；
混剂实测毒力指数；
混剂理论毒力指数。
根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告，并列出原始数据。(4)
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