SN/T 2503-2010
基本信息
标准号： SN/T 2503-2010
中文名称：淡水鱼中寄生虫检疫技术规范
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
发布日期：2010-03-02
实施日期：2010-09-16
出版语种：简体中文
下载格式：.rar .pdf
下载大小：2624096
标准分类号
关联标准
出版信息
出版社：中国标准出版社
标准价格：0.0 元
出版日期：2010-09-16
相关单位信息
发布部门：国家质量监督检验检疫总局
标准简介
SN/T 2503-2010 淡水鱼中寄生虫检疫技术规范 SN/T2503-2010 标准下载解压密码：www.bzxz.net
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T2503-—2010
淡水鱼中寄生虫检疫技术规范
Protocol of quarantine technique for parasite in freshwater fishes2010-03-02发布
中华人民共和国
数码防伪
国家质量监督检验检疫总局
2010-09-16实施
本标准的附录A、附录B、附录C均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出境检验检疫局，大连民族学院。本标准主要起草人：李叶、吴斌、胡传伟、贾赞、李振荣、肇慧君、杜雄伟、本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。http：//foodmate.netSN/T2503-—2010
1范围
淡水鱼中寄生虫检疫技术规范
本标准规定了淡水鱼寄生虫的检验方法SN/T2503—2010
本标准适用于淡水鱼（如：青鱼、草鱼、鲢鱼、鱼、鲤鱼、鲫鱼等）中小瓜虫、粘孢子虫、三代虫、指环虫、有辣题口线虫包囊、广州管圆线虫感染期幼虫、阔节裂头缘虫裂头等寄生虫的监测与检测。海水鱼类同种寄生虫病的检测可以参照执行。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准·然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准GB/T18088出人境动物检疫采样
SN/T1748进出口食品中寄生虫的检验方法SN/T2124大西洋鲑鱼三代虫检疫技术规范水生动物疾病诊断手册（OIE)
3菜样
按OIE水生动物疾病诊断手册》和GB/T18088中鱼样品的采样规则进行：a）有临床症状的鱼：至少挑选10条濒死鱼或10条有某种疾病临床症状的鱼；外表健康，无临床症状的鱼：观赏鱼、鱼苗取150尾：食用鱼可根据总量采样23尾～30尾；b)
鱼类产品：按概率把关采样原则，每份样品采集100g500g4设备、耗材和试剂
仪器设备及耗材
体视显微镜。
30cm。
普通光学显微镜
透光台：有机玻璃板，长600mm×宽300mm，厚5mm~7mm。有机玻璃夹板：长305mm×宽305mm，用螺钉固定玻璃板边缘白光光源：20W日光灯作为光源，光照强度15001x18001x，光源距离上面的有机玻璃板紫外光源：波长大约365nm。
紫外线防护眼罩。
心机。
食品捣碎机。
解剖盘。
烧杯：1000ml
离心管：50ml
培养血。
载玻片和盖玻片。
h+
SN/T2503—2010
剪刀。
镊子。
4.1.17解镊。
4.1.18解剖针
4.1.19温度计：0℃~100℃。
4.1.20pH试纸：0~14
4.2试剂
本标准所使用的试剂均为分析纯，水为蒸馏水。4.2.10.85%氯化钠生理盐水。
4.2.24%、5%甲醛水溶液。
50%、70%、95%乙醇溶液。
B液。
何氏液：乙酸酮2.5g、苦味酸4.0g、福尔马林原液10mL、冰乙酸1.5ml、蒸馅水90ml。肖氏液：A液：升汞（饱和液）2份.95%乙醇1份。B液：冰乙酸，每100mlA液加人5ml鲍恩氏液：75mL苦味酸饱和水溶液中加人25mL甲醛，在临用时再加人5mL冰乙酸巴氏液：福尔马林3mL，生理盐水97mL。4.2.7
4.2.8甘油。
5检查步骤
现场观察
在条件许可的情况下应察看现场。测量池中的水温及p工值，察看水色、水源和水面及鱼群的活动与死鱼的情况，了解发病的经过及已采取的措施等。详细记录以备作为确诊时参考之用。5.2肉眼检查
5.2.1检查顺序
检查顺序山外到内，粘液、鳍、鼻腔、口腔、血液、鳃、体腔、脂肪组织、胃肠、肝、脾、胆囊、心脏、、肾、膀胱、性腺、眼、脑、脊髓、肌肉。5.2.2检查方法
5.2.2.1粘液：肉眼检查粘液。用小弯镊子或解剖刀刮取鱼体表粘液（附带检查一此鳞片）进行镜检。5.2.2.2鳍：在光亮的地方，把鳍拉开，观察有无异样，然后刮下粘液放在载玻片上镜检。5.2.2.3鼻腔：先用小弯镊子或细管从鼻孔里取少许内含物镜检，随后用吸管吸取少许清水注人鼻孔里，再将液体吸出（要多吸几次），放在培养血里镜检。5.2.2.4口腔：刮取上下聘一些粘液目检并镜检。5.2.2.5血液：从心脏直接取血，在鱼体腹面两鳃盖之间的最狭处，用医用注射器插入抽血亦可5.2.2.6鳃：用剪刀将左右两边的鳃完整地取出，放在培养血里，观察，并记录。日检完毕，用体视显微镜检查并刮取鳃粘液，进行显微镜检5.2.2.7体腔：腹腔液用吸管吸出，没有腹腔液的用生理盐水冲洗，液体置于培养血里进行检查。腹腔检查完毕，用剪刀小心地从肛门和咽喉两处，把整条肠的两端剪断，轻轻地把内脏取出来，放在解部盘上，逐个地把各器官分开，依次进行检查。5.2.2.8脂肪组织：先目检，后进行镜检。5.2.2.9
胃肠：分前、中、后三部分进行镜检，将整条肠剪开以后，先自检，后用压片法检查肝！先目检，后用镊子从肝上取少许组织，进行镜检。5.2.2.10
牌：同5.2.2.10。
胆囊：取出胆囊，放在培养Ⅲ里，然后剪开，放出胆汁，日检后取一部分胆囊壁镜检。胆汁另httr
行检查。
SN/T2503—2010
5.2.2.13心脏剪下心脏，放在盛有食盐水的培养血里，检查外表后，把心脏剪开，用小镊子取一滴内容物镜检。同时也用压片法进行检查。在水里的沉淀物也要检查。5.2.2.14：先观察外表，再把它剪开，用镊子剥取镖的内壁和外壁的薄膜，镜检，同时用压片法检查。
肾：前、中、后三部分检查
5.2.2.16膀胱：先目检，后镜检。5.2.2.17
性腺：先日检，后镜检。
眼：用弯头镊子或小剪刀从眼窝里挖出眼睛，放出品状体，进行镜检5.2.2.19脑：剪开头盖骨，即见充满着淡灰色泡沫状的油脂物质，用吸管把它吸出，放在平皿里以备检查。吸净油脂物质后，灰白色的脑即显露出来，用剪刀把它完整地取出来，按检查肝的顺序进行检查。5.2.2.20脊髓：从头部与驱干交按处把脊椎骨剪断，再把身体的尾部与驱干交接处的脊椎骨也剪断，用镊子从前端的断口插人脊髓腔，把脊髓夹住，慢慢地把脊髓整条拉出来；分前、中、后三部分检查。5.2.2.21肌肉：用解剖刀部开一部分皮肤，再用镀了把皮肤剥去，或用一根小棍棒（玻璃棒或竹棒），像卷纸筒样，慢慢地把皮肤卷剥，肌肉即露出来，经目检后，在前，中、后等部分取一小片肌肉，镜检，再用压片法检查
5.3烛光法（适用鱼肉样品）
按照SN/T1748方法进行。
5.4机械分离沉降法（适用鱼肉样品按照SN/T1748方法进行。
5.5显微镜检
5.5.1水浸片
取一点受检的组织（如：鳃丝、体表溃疡处、消化道的内含物、体表附着物或粘液等）于载玻片上，加上一滴清水，用镊子将组织分散，加上盖坡片，稍加压平，解镜下观察（参见附录A和附录B）。受检组织不能放置于玻片上太多、太厚和互相重叠。5.5.2压片法
取一小块组织于玻片上，轻轻盖上男载玻片，轻压令受检组织压成一透明薄片，即可显微镜观察，无需加水（参见附录A和附录B）亦可用盖玻片加压，做成血片检查（参见附录A和附录B)。5.5.3涂片法
用解剖镊刮取体表的粘液或直接取血液于载玻片上，加上盖玻片，进行显微镜检（参见附录A和附录B）。适用于粘液性样品的检查，如血液，粘液。5.5.4浓缩法
肠道内容物刮下来，放在培养血里，加入生理盐水冲洗搅匀，1000r/min~15001/min.离心10min~15min.反复加生理盐水离心3次，取沉淀物镜检。结果判断及描述
6.1烛光法和机械分离沉降法
按照SN/T1748方法进行：
6.2显微镜检
病原体的计数：“+”表示有：“+十”表示多；“+十十”表示很多。鞭毛虫、变形虫、球虫、粘孢子虫、微孢子虫、单孢子虫在高倍显微镜视野下，约有1个～20个以下的虫体或孢子时记“+”，21个50个时记“十十”，51个以上时记“十+十”。纤毛虫及毛管虫，在低倍显微镜视野下有1个～20个记\+”，21个～50个记“十十”，51个以上的3
http：
SN/T2503—2010
虫体记“十二十”
小瓜虫除按上面标准计算虫体外，如计算囊胞时，则用数字说明单殖吸虫，线虫、终虫、棘头虫、蛭类、甲壳动物、软体动物的幼虫，在50个以下以数字说明，50个以上者，则说明估计数字
注：按月镜为10%，虫体数为同一开中3个祝野的平均数，鱼类寄生虫的采集和保存
鱼类寄生虫的采集和保有参见附录C4
http：//foodmate.net寄生虫种类
鞭毛虫
肉足虫
球虫、
撒孢子
虫、单
孢子虫
粘抱子虫
主要奇
生部位
鳃、皮肤、
鼻腔、血液
肠、肾、
肝脏、
血液、
腺、脂
织纸、、
体表、鳃、
、朋囊
肾、膀胱、
尿管、
肠、肝脏
附录A
（资料性附录）
鱼类寄生虫病的特点
表A.1鱼类寄生虫病的特点
常见寄生虫病临床症状
隐靓虫病5月~10月流行，常为急性型，病鱼体色发黑消瘦螺瓣鲜红，粘液增多，掩盖鳃致呼吸困难死亡。内变形虫病：6月9月流行·常与细菌性粉炎一起暴发流行。病变始于肠粘膜表面，向周围发育形成脓肿。感染严重时，后肠溃疡充血，流出乳黄色粘液
艾美虫病：4月～7月流行，鳃瓣苍白，腹部膨大，肠道前段肠壁内有许多白色结节，肉眼可见病灶，肠管粗于正常2倍~3倍，严重时肠壁溃疡穿孔，外壁也可形成结节，病鱼体黑失去食欲。严重者致鱼死亡。
匹里虫病：生殖率降低或不育·发病初期卵巢不透明鞋摸有硬感·肝旺菱缩贫血体表无症状
联跑虫病：病鱼体表发黑，消瘦·其至死亡。寄生部位可见胞囊呈香肠状、带状、线状等，盘曲在体表破坏组织，充血，炎症，腐烂，严重时，皮肤、、尾鳍等处都充满胞囊
疯狂病：病鱼体色暗淡，极度消瘦，头大尾小，尾上：离群独游，急游打转，常跳出水面，复又钻人水中。的失去平衡和摄食能力而亡。
病鱼呈波浪形旗
乏，无力游泳
脾萎缩，有的膜
缩成颗粒状.
饼形碘泡虫器
动，形似极度疲
合室常菱
肉暗淡无光锋
，腹部膨大
不摄食，鱼体消
见前肠粗大
病快，死工
羊剃病鱼可
不可侵袭鲤鱼
肌肉、病鲤鱼体表高低不平，消瘦，严重时死亡
SN/T2503-—2010
虫体形态特征
（6.7um~8.7um）×47m.体小无色，圆形或伸长，呈叶状，具有2根擎毛，膜基部有折光小体，动核细长或稍为弯折
滋养体星灰色，有伪足和园形胞核，约11m×16m.跑囊期伪足消失·身体变回或辅园形，具拟染色体1条一6条，通常为短棒状，两端钝圆。胞囊一侧有动物淀粉泡，1个4个胞核胞囊直径8m~10m
虫体呈球形，直径12.3un13.9m，孢子为（7.5am×8μm）×（5.3um-6.3μm）.形.孢子体为香蕉状，一端宽面钝圆，另一端室而尖细。直径一般在0.5mm以下抱子卵圆形，单核，在泛孢子母细胞范围内产生数目不定的孢子孢子圆球形，直径4m~14m，外有-层透明膜，内有国形折光体，位于孢子内偏中心的位置孢质内散有大小不等的胞内含物。含有不同形状的孢囊。
粘孢子虫的每个孢子有1块～7块（多为2块）几工质壳片，两壳连接处叫缝线，缝线由于粗厚或突起脊状
缝脊的
少数弯曲屋
型种美发
嗜硬泡
见除录
http://foodmate.net有缝雀的
面称缝面·无
多数种类的缝脊是直的，
7个典
梨形或瓶形的极聚，通常
子两端。
极囊内
子内除极囊外
核.有的种类还有
B第B.4章
SN/T25032010
寄生虫种类
主要寄
生部位
体表、鳃，
鳍、胆囊、
肾、膀胱、
粘抱子虫
输尿管、
肠、肝脏
肤、鼻
纤毛虫
单殖吸虫
腔、膀
鳃、皮
肤、鳍
表A.1（续）
常见寄生虫病临床症状
野鲤碘泡虫病：奇生于鲮、鲤、鲫鱼的体表、鳍和鳃等。病鱼肯的体表和鳃避上有许多白色点状或块状的胞囊，鱼体消瘦发黑，游动无力，可引起鱼苗大批死亡。
鲢旋缝虫病：寄生于链、瓣鱼的肌肉、皮下等。主要危害龄疑及鱼，
病鱼瘦弱，眼球突出，体表两侧、头及鳍基部有块状或粒状案起，严重病鱼死亡。解剖病鱼，可在肌肉中见到车多淡黄色，大小不一的粒状结
单极虫病：侵袭鲤和鲫鱼的体表，在鳞片下形成痛状胞囊。病鱼消瘦，体色较黑，竖鳞
水膜病：由变异粘体虫寄生于白缝虫体侵袭各器育组织，形成白色胞囊，尤以腹胖的胸专最多病角
特，腹部膨大，游动缓慢，平衡能差。解剖病鱼可见体内各脏器间充塞有大量白色胞囊
退，鱼体消瘦，游泳
小瓜虫病食欲减进
退钝·浮于水面、
天量死
大量寄生时
、体表、、或布满白
小点·表面覆
处组织发炎坏
层白色粘液
即出血
色。也可引起眼发类变瞎
早暗红
指环虫病：流行于春末夏初，大量寄生时，鳃丝粘液增多，全部或部分呈苍白色，呼吸困难，鳃显著浮肿，鱼更为明显，鳃盖张开，游动缓慢，贫血，单核和多核白细胞增多。
虫体形态持征
为乳自色星卵圆形或球形，大小为成电
(03mm~0.8
mm）×（0.35.mm~0.5mm).体
表分存均匀的纤毛。前端腹面有一胞口，体内有和
小核，小核呈球状，紧贴于人核上面。随质内有大层
食物粒和许多小的伸缩泡：幼虫为楠圆形，前
尖，后端圆钝，全身批有等长纤毛大核椭圆形或卵形，体前端有（33m54m）X×(197m-32m）的伸缩泡：胞囊为圆形或痛园形，白色透明，（0.329mm--0.98mm）×（0.276num~0722mm）（参见录B第B1京）页形指环虫虫体左右对称扁半.（0.129mm~0.529mm）×(0.072mm~0.136mm）。眼及头器各2对。指环虫边缘小钩7对，中央大钩基部较宽，分叶明显，联结片呈倒“山”字形。小鞘指环虫(0.98mm~1.4mm）×(0.283mm~0.344mm)，联结片矩形，宽壮，中部及西瑞略有扩伸。坏指环虫联结片单一，呈””字形。鳃指环虫参见附录B第B.2章
http://foodmate.net寄生虫种类
单殖吸虫
复殖吸虫
桡足类、
懿尾类
及等足类
主要寄
生部位
鳃、皮
肤、鳍
鳃、肌肉、
口腔、肾、
肝、脾、胆
囊、心脏、
生殖腺、
脑、脊髓等
结缔组
织、肌
肉、性
腺、卵
巢、肝
体表、鳍、
鳃、鼻孔、
口腔、眼
雕等处
表A.1（续）
常见寄生虫病临床症状
三代虫病：三代虫主要危害鱼苗、鱼种。以铺钩和边缘小钩钩任鱼体，利用头器的粘着作用在鱼体表或鳃上作尺嫂虫式运动，从而操作鱼体，刺激分泌大量的精液。大量奇生时，病鱼皮肤工有一层灰白色粘液，鱼体瘦弱失去光泽，游动不正常，食欲减退，呼吸困难。整至苑
血居吸虫病：鱼苗跳跃，挣扎急游等，病鱼肛门出现水泡全身红肿，眼突出。鲤号血管有大量尾蝴侵袭导致妨碍面液循环、呼吸·造成死慢性型病鱼腹水较多，肛门肿大外突，竖鳞、突眼，终至衰竭而死九江头槽缘虫病，消瘦发黑，离群独SN/T2503—2010
出体形态特征
三代虫的形态、大小与指环虫相似，主要区别在于头器为一对，无眼点，后吸器的边缘小钩为8对，咽由8个肌肉细胞分两部组成，两根肠管以盲端结束，身体中部有一椭圆形的胎儿，胎儿体内又孕育着下一代的胎儿：我国纪录的大致40种饲养鱼类常见的有：鲢三代虫（hy-popthabmiehthysi)，皖三代虫（G.ctenopharyngodontrs）和秀丽三代虫（G.eleganse）等（参更附录B第B3章
其他鉴定方法见SN/T2124。
成虫扁平梭形，前端尖细，（0.268mm~0.844mm）×（0.142mm~0.244mm）.披有很粗的体棘，新向体后排列。口孔在吻突前端，不具下接食
分为四叶盲费
下行至体三分之一处突然膨大并攀丸位于卵巢前方，对称排列，游，恶性贫血。严重感染时，前肠第虫体带状，20mm~230nm，头节有朗显顶盘和盘曲胀大成胃囊状，直径增加三两个较深的吸沟。睾丸分布于节片的两侧。卵倍。肠壁皱霜萎鞘，表现出便性炎箱圆形，淡褐色，壳厚盖小。症，肠道被虫体堵塞
草鱼似头哟中
病：鱼体消博发黑
大呈球状，肠道轻
离群。前履部膨
充血，呈慢性炎症
，拒食腹鳍基部
充血，鳃丝肿胀，肝脏变色，胆囊水肿。
大中华蚤病：鳃丝边缘有自色“姐样”虫体，鳃丝末端肿大发白.粘液增多，鱼焦躁不安。如大量寄生，可导致病鱼室息死亡，
病：鱼体消瘦.极度不安，狂游，跳跃。刺伤鱼体皮肤形成的伤口易导致微生物人侵，易引起继发感染雄虫短小呈香焦形.0.7mm~1.27mm.体表披吻短小，吻鞘单层，吻钩18个，排有横行小辣，
成4圈。雕点（0.9mm~2.3mm）×0.12mm~.32mm），休细长黄瓜形，生殖孔在末端腹部。虫体细长头部半卵形，头、胸间假节共长，向两侧英出，比头部宽大。第一至四胸节宽度相等。第四胸节特别长大。第五胸节仅为前一节宽度的三分之二，生殖节特小，腹部3节，细长，有2假节。雌虫2.2mm-3mm。
虫体大而扇平，背甲呈圆形或椭圆形.腹部后方有二叶，一对尾叉。两对触角及口前刺。第二小题变为吸盘。显足的基板具齿。http·
//www
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A）幼虫
脆口：
大核：
食物粒：
伸缩泡：
小孩；
B）成虫
图B.1小瓜虫
附录B
（资料性附录）
主要寄生虫形态学图片
头腺：
交配器：
前列腺：
广精囊：
子宫：
阴道：
卵菜：
睾丸：
眼点：
雌性生殖孔：
受精囊：
边缘小钩：
锚钩。
鳃片指环虫
httn：
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头器：
交配囊；
忙精囊：
输精管：
第三代胎儿：
第二代胎儿：
成熟的虫郎：
卵巢：
墨丸：
进缘小钩：
锚钩。
图B.3秀丽三代虫
httr
极囊核
跑子的正面观：
孢子的缝面观。
嗜碘泡
SN/T2503-—2010
粘孢子虫的孢子构造
odmatenet
SN/T2503—2010
C.1原生动物病原
C.1.1血液中的原生动物
附录C
（资料性附录）
鱼类寄生虫的采集和保存
血液中的原生动物应采用涂片的方法采集，从鲤动脉或心脏取得血液滴于载玻片右端，涂片，将血片倾斜放置于空气中晾干，用甲醇固定3min一5min，用姬姆萨法染色。如不能马上染色，搁置时间不能超过2个月，否则会影响染色效果。C.1.2孢子虫的采集
孢子虫可用4%的甲醛水溶液固定保存。观察嗜碘泡，可用刘高氏染色；观察极丝放出的情况，可将“内含物”与聚乙烯醇相混。C.1.3皮肤、鳃、肠道中的原生动物鞭毛虫、变形虫、纤毛虫、孢子虫、球虫用下述方法处理：用弯头镊子夹取一小块带有寄生虫的鳃组织或肠道粘液等，均匀地涂在洁净的盖玻片上。将涂片涂面朝下浮放于事先选定的固定液1min。然后翻转，将涂面朝上，再固定15min~20min。将涂片从固定液中取出，放人50%乙醇洗去多余的固定液，再放人装有70%乙醇的指形管中保存备用。肖氏液适用于固定纤毛虫、变形虫、粘孢子虫，载氏液用于固定纤毛虫，特别是车轮虫；何氏液用于固定鞭毛虫类，如无上述三种固定液时，均可用翁氏液代替C.1.4干片的制备
用于观察虫体的某一部分结构（如斜管虫腹部的纤毛线、小瓜虫，肠袋虫的纤毛线，车轮虫的齿环、旧齿体及颗粒结构等）用硝酸银染色观察。C.2蠕虫类
C.2.1单殖类的处理
单殖类个体较小，将带有虫体的组织置于解剂镜下，用小针将虫体剥下，放人有清水的培养中，然后用吸管吸出，用适当的固定剂固定，如遇虫体较多，虫体较大，可放人带有清水的培养血中，用弯头钳子将粘液及部分组织、虫体刮人水中，然后用清水洗涤数次，可用肉眼见到虫体沉于Ⅲ底，逐个用小钩针挑出进行处理。但用此法，肉眼难于见到幼虫，要挑出幼出及小虫体，仍应在解镜下进行。另一种办法，是将带有虫体的组织剪下，放人装有清水的培养Ⅲ中，滴人数滴薄荷乙醇，静置1h2h，单殖吸虫即脱落水中。挑出虫体进行活体观察或进一步固定。一般用4%-5%甲醛水溶液或肖氏液固定而封固于油胶中或连同组织同定，切片可用鲍恩氏（Bouins）液或仁克氏（Zenkers）液固定。C.2.2复殖类的处理
小型复殖吸虫当寄生数量多时，一般采用摇动法固定，以青鱼肠中的侧殖吸虫为例。将虫体连同肠中粘液一道刮下，放入培养血中，用生理盐水洗涤数次，使虫体与粘液分开。然后，将吸虫移入指形管中，并装入三分之一的蒸馏水，用拇指压紧瓶口，摇动3min～5min，令虫体麻醇后再加满95%的乙醇，再摇动1min，最后换70%乙醇保存。中大型吸虫，可用两片玻璃片将虫体压平，从一端加入固定液，另一端用吸水纸将水分吸去，使固定10
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淡水鱼中寄生虫检疫技术规范
Protocol of quarantine technique for parasite in freshwater fishes2010-03-02发布
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本标准的附录A、附录B、附录C均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出境检验检疫局，大连民族学院。本标准主要起草人：李叶、吴斌、胡传伟、贾赞、李振荣、肇慧君、杜雄伟、本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。http：//foodmate.netSN/T2503-—2010
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淡水鱼中寄生虫检疫技术规范
本标准规定了淡水鱼寄生虫的检验方法SN/T2503—2010
本标准适用于淡水鱼（如：青鱼、草鱼、鲢鱼、鱼、鲤鱼、鲫鱼等）中小瓜虫、粘孢子虫、三代虫、指环虫、有辣题口线虫包囊、广州管圆线虫感染期幼虫、阔节裂头缘虫裂头等寄生虫的监测与检测。海水鱼类同种寄生虫病的检测可以参照执行。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准·然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准GB/T18088出人境动物检疫采样
SN/T1748进出口食品中寄生虫的检验方法SN/T2124大西洋鲑鱼三代虫检疫技术规范水生动物疾病诊断手册（OIE)
3菜样
按OIE水生动物疾病诊断手册》和GB/T18088中鱼样品的采样规则进行：a）有临床症状的鱼：至少挑选10条濒死鱼或10条有某种疾病临床症状的鱼；外表健康，无临床症状的鱼：观赏鱼、鱼苗取150尾：食用鱼可根据总量采样23尾～30尾；b)
鱼类产品：按概率把关采样原则，每份样品采集100g500g4设备、耗材和试剂
仪器设备及耗材
体视显微镜。
30cm。
普通光学显微镜
透光台：有机玻璃板，长600mm×宽300mm，厚5mm~7mm。有机玻璃夹板：长305mm×宽305mm，用螺钉固定玻璃板边缘白光光源：20W日光灯作为光源，光照强度15001x18001x，光源距离上面的有机玻璃板紫外光源：波长大约365nm。
紫外线防护眼罩。
心机。
食品捣碎机。
解剖盘。
烧杯：1000ml
离心管：50ml
培养血。
载玻片和盖玻片。
h+
SN/T2503—2010
剪刀。
镊子。
4.1.17解镊。
4.1.18解剖针
4.1.19温度计：0℃~100℃。
4.1.20pH试纸：0~14
4.2试剂
本标准所使用的试剂均为分析纯，水为蒸馏水。4.2.10.85%氯化钠生理盐水。
4.2.24%、5%甲醛水溶液。
50%、70%、95%乙醇溶液。
B液。
何氏液：乙酸酮2.5g、苦味酸4.0g、福尔马林原液10mL、冰乙酸1.5ml、蒸馅水90ml。肖氏液：A液：升汞（饱和液）2份.95%乙醇1份。B液：冰乙酸，每100mlA液加人5ml鲍恩氏液：75mL苦味酸饱和水溶液中加人25mL甲醛，在临用时再加人5mL冰乙酸巴氏液：福尔马林3mL，生理盐水97mL。4.2.7
4.2.8甘油。
5检查步骤
现场观察
在条件许可的情况下应察看现场。测量池中的水温及p工值，察看水色、水源和水面及鱼群的活动与死鱼的情况，了解发病的经过及已采取的措施等。详细记录以备作为确诊时参考之用。5.2肉眼检查
5.2.1检查顺序
检查顺序山外到内，粘液、鳍、鼻腔、口腔、血液、鳃、体腔、脂肪组织、胃肠、肝、脾、胆囊、心脏、、肾、膀胱、性腺、眼、脑、脊髓、肌肉。5.2.2检查方法
5.2.2.1粘液：肉眼检查粘液。用小弯镊子或解剖刀刮取鱼体表粘液（附带检查一此鳞片）进行镜检。5.2.2.2鳍：在光亮的地方，把鳍拉开，观察有无异样，然后刮下粘液放在载玻片上镜检。5.2.2.3鼻腔：先用小弯镊子或细管从鼻孔里取少许内含物镜检，随后用吸管吸取少许清水注人鼻孔里，再将液体吸出（要多吸几次），放在培养血里镜检。5.2.2.4口腔：刮取上下聘一些粘液目检并镜检。5.2.2.5血液：从心脏直接取血，在鱼体腹面两鳃盖之间的最狭处，用医用注射器插入抽血亦可5.2.2.6鳃：用剪刀将左右两边的鳃完整地取出，放在培养血里，观察，并记录。日检完毕，用体视显微镜检查并刮取鳃粘液，进行显微镜检5.2.2.7体腔：腹腔液用吸管吸出，没有腹腔液的用生理盐水冲洗，液体置于培养血里进行检查。腹腔检查完毕，用剪刀小心地从肛门和咽喉两处，把整条肠的两端剪断，轻轻地把内脏取出来，放在解部盘上，逐个地把各器官分开，依次进行检查。5.2.2.8脂肪组织：先目检，后进行镜检。5.2.2.9
胃肠：分前、中、后三部分进行镜检，将整条肠剪开以后，先自检，后用压片法检查肝！先目检，后用镊子从肝上取少许组织，进行镜检。5.2.2.10
牌：同5.2.2.10。
胆囊：取出胆囊，放在培养Ⅲ里，然后剪开，放出胆汁，日检后取一部分胆囊壁镜检。胆汁另httr
行检查。
SN/T2503—2010
5.2.2.13心脏剪下心脏，放在盛有食盐水的培养血里，检查外表后，把心脏剪开，用小镊子取一滴内容物镜检。同时也用压片法进行检查。在水里的沉淀物也要检查。5.2.2.14：先观察外表，再把它剪开，用镊子剥取镖的内壁和外壁的薄膜，镜检，同时用压片法检查。
肾：前、中、后三部分检查
5.2.2.16膀胱：先目检，后镜检。5.2.2.17
性腺：先日检，后镜检。
眼：用弯头镊子或小剪刀从眼窝里挖出眼睛，放出品状体，进行镜检5.2.2.19脑：剪开头盖骨，即见充满着淡灰色泡沫状的油脂物质，用吸管把它吸出，放在平皿里以备检查。吸净油脂物质后，灰白色的脑即显露出来，用剪刀把它完整地取出来，按检查肝的顺序进行检查。5.2.2.20脊髓：从头部与驱干交按处把脊椎骨剪断，再把身体的尾部与驱干交接处的脊椎骨也剪断，用镊子从前端的断口插人脊髓腔，把脊髓夹住，慢慢地把脊髓整条拉出来；分前、中、后三部分检查。5.2.2.21肌肉：用解剖刀部开一部分皮肤，再用镀了把皮肤剥去，或用一根小棍棒（玻璃棒或竹棒），像卷纸筒样，慢慢地把皮肤卷剥，肌肉即露出来，经目检后，在前，中、后等部分取一小片肌肉，镜检，再用压片法检查
5.3烛光法（适用鱼肉样品）
按照SN/T1748方法进行。
5.4机械分离沉降法（适用鱼肉样品按照SN/T1748方法进行。
5.5显微镜检
5.5.1水浸片
取一点受检的组织（如：鳃丝、体表溃疡处、消化道的内含物、体表附着物或粘液等）于载玻片上，加上一滴清水，用镊子将组织分散，加上盖坡片，稍加压平，解镜下观察（参见附录A和附录B）。受检组织不能放置于玻片上太多、太厚和互相重叠。5.5.2压片法
取一小块组织于玻片上，轻轻盖上男载玻片，轻压令受检组织压成一透明薄片，即可显微镜观察，无需加水（参见附录A和附录B）亦可用盖玻片加压，做成血片检查（参见附录A和附录B)。5.5.3涂片法
用解剖镊刮取体表的粘液或直接取血液于载玻片上，加上盖玻片，进行显微镜检（参见附录A和附录B）。适用于粘液性样品的检查，如血液，粘液。5.5.4浓缩法
肠道内容物刮下来，放在培养血里，加入生理盐水冲洗搅匀，1000r/min~15001/min.离心10min~15min.反复加生理盐水离心3次，取沉淀物镜检。结果判断及描述
6.1烛光法和机械分离沉降法
按照SN/T1748方法进行：
6.2显微镜检
病原体的计数：“+”表示有：“+十”表示多；“+十十”表示很多。鞭毛虫、变形虫、球虫、粘孢子虫、微孢子虫、单孢子虫在高倍显微镜视野下，约有1个～20个以下的虫体或孢子时记“+”，21个50个时记“十十”，51个以上时记“十+十”。纤毛虫及毛管虫，在低倍显微镜视野下有1个～20个记\+”，21个～50个记“十十”，51个以上的3
http：
SN/T2503—2010
虫体记“十二十”
小瓜虫除按上面标准计算虫体外，如计算囊胞时，则用数字说明单殖吸虫，线虫、终虫、棘头虫、蛭类、甲壳动物、软体动物的幼虫，在50个以下以数字说明，50个以上者，则说明估计数字
注：按月镜为10%，虫体数为同一开中3个祝野的平均数，鱼类寄生虫的采集和保存
鱼类寄生虫的采集和保有参见附录C4
http：//foodmate.net寄生虫种类
鞭毛虫
肉足虫
球虫、
撒孢子
虫、单
孢子虫
粘抱子虫
主要奇
生部位
鳃、皮肤、
鼻腔、血液
肠、肾、
肝脏、
血液、
腺、脂
织纸、、
体表、鳃、
、朋囊
肾、膀胱、
尿管、
肠、肝脏
附录A
（资料性附录）
鱼类寄生虫病的特点
表A.1鱼类寄生虫病的特点
常见寄生虫病临床症状
隐靓虫病5月~10月流行，常为急性型，病鱼体色发黑消瘦螺瓣鲜红，粘液增多，掩盖鳃致呼吸困难死亡。内变形虫病：6月9月流行·常与细菌性粉炎一起暴发流行。病变始于肠粘膜表面，向周围发育形成脓肿。感染严重时，后肠溃疡充血，流出乳黄色粘液
艾美虫病：4月～7月流行，鳃瓣苍白，腹部膨大，肠道前段肠壁内有许多白色结节，肉眼可见病灶，肠管粗于正常2倍~3倍，严重时肠壁溃疡穿孔，外壁也可形成结节，病鱼体黑失去食欲。严重者致鱼死亡。
匹里虫病：生殖率降低或不育·发病初期卵巢不透明鞋摸有硬感·肝旺菱缩贫血体表无症状
联跑虫病：病鱼体表发黑，消瘦·其至死亡。寄生部位可见胞囊呈香肠状、带状、线状等，盘曲在体表破坏组织，充血，炎症，腐烂，严重时，皮肤、、尾鳍等处都充满胞囊
疯狂病：病鱼体色暗淡，极度消瘦，头大尾小，尾上：离群独游，急游打转，常跳出水面，复又钻人水中。的失去平衡和摄食能力而亡。
病鱼呈波浪形旗
乏，无力游泳
脾萎缩，有的膜
缩成颗粒状.
饼形碘泡虫器
动，形似极度疲
合室常菱
肉暗淡无光锋
，腹部膨大
不摄食，鱼体消
见前肠粗大
病快，死工
羊剃病鱼可
不可侵袭鲤鱼
肌肉、病鲤鱼体表高低不平，消瘦，严重时死亡
SN/T2503-—2010
虫体形态特征
（6.7um~8.7um）×47m.体小无色，圆形或伸长，呈叶状，具有2根擎毛，膜基部有折光小体，动核细长或稍为弯折
滋养体星灰色，有伪足和园形胞核，约11m×16m.跑囊期伪足消失·身体变回或辅园形，具拟染色体1条一6条，通常为短棒状，两端钝圆。胞囊一侧有动物淀粉泡，1个4个胞核胞囊直径8m~10m
虫体呈球形，直径12.3un13.9m，孢子为（7.5am×8μm）×（5.3um-6.3μm）.形.孢子体为香蕉状，一端宽面钝圆，另一端室而尖细。直径一般在0.5mm以下抱子卵圆形，单核，在泛孢子母细胞范围内产生数目不定的孢子孢子圆球形，直径4m~14m，外有-层透明膜，内有国形折光体，位于孢子内偏中心的位置孢质内散有大小不等的胞内含物。含有不同形状的孢囊。
粘孢子虫的每个孢子有1块～7块（多为2块）几工质壳片，两壳连接处叫缝线，缝线由于粗厚或突起脊状
缝脊的
少数弯曲屋
型种美发
嗜硬泡
见除录
http://foodmate.net有缝雀的
面称缝面·无
多数种类的缝脊是直的，
7个典
梨形或瓶形的极聚，通常
子两端。
极囊内
子内除极囊外
核.有的种类还有
B第B.4章
SN/T25032010
寄生虫种类
主要寄
生部位
体表、鳃，
鳍、胆囊、
肾、膀胱、
粘抱子虫
输尿管、
肠、肝脏
肤、鼻
纤毛虫
单殖吸虫
腔、膀
鳃、皮
肤、鳍
表A.1（续）
常见寄生虫病临床症状
野鲤碘泡虫病：奇生于鲮、鲤、鲫鱼的体表、鳍和鳃等。病鱼肯的体表和鳃避上有许多白色点状或块状的胞囊，鱼体消瘦发黑，游动无力，可引起鱼苗大批死亡。
鲢旋缝虫病：寄生于链、瓣鱼的肌肉、皮下等。主要危害龄疑及鱼，
病鱼瘦弱，眼球突出，体表两侧、头及鳍基部有块状或粒状案起，严重病鱼死亡。解剖病鱼，可在肌肉中见到车多淡黄色，大小不一的粒状结
单极虫病：侵袭鲤和鲫鱼的体表，在鳞片下形成痛状胞囊。病鱼消瘦，体色较黑，竖鳞
水膜病：由变异粘体虫寄生于白缝虫体侵袭各器育组织，形成白色胞囊，尤以腹胖的胸专最多病角
特，腹部膨大，游动缓慢，平衡能差。解剖病鱼可见体内各脏器间充塞有大量白色胞囊
退，鱼体消瘦，游泳
小瓜虫病食欲减进
退钝·浮于水面、
天量死
大量寄生时
、体表、、或布满白
小点·表面覆
处组织发炎坏
层白色粘液
即出血
色。也可引起眼发类变瞎
早暗红
指环虫病：流行于春末夏初，大量寄生时，鳃丝粘液增多，全部或部分呈苍白色，呼吸困难，鳃显著浮肿，鱼更为明显，鳃盖张开，游动缓慢，贫血，单核和多核白细胞增多。
虫体形态持征
为乳自色星卵圆形或球形，大小为成电
(03mm~0.8
mm）×（0.35.mm~0.5mm).体
表分存均匀的纤毛。前端腹面有一胞口，体内有和
小核，小核呈球状，紧贴于人核上面。随质内有大层
食物粒和许多小的伸缩泡：幼虫为楠圆形，前
尖，后端圆钝，全身批有等长纤毛大核椭圆形或卵形，体前端有（33m54m）X×(197m-32m）的伸缩泡：胞囊为圆形或痛园形，白色透明，（0.329mm--0.98mm）×（0.276num~0722mm）（参见录B第B1京）页形指环虫虫体左右对称扁半.（0.129mm~0.529mm）×(0.072mm~0.136mm）。眼及头器各2对。指环虫边缘小钩7对，中央大钩基部较宽，分叶明显，联结片呈倒“山”字形。小鞘指环虫(0.98mm~1.4mm）×(0.283mm~0.344mm)，联结片矩形，宽壮，中部及西瑞略有扩伸。坏指环虫联结片单一，呈””字形。鳃指环虫参见附录B第B.2章
http://foodmate.net寄生虫种类
单殖吸虫
复殖吸虫
桡足类、
懿尾类
及等足类
主要寄
生部位
鳃、皮
肤、鳍
鳃、肌肉、
口腔、肾、
肝、脾、胆
囊、心脏、
生殖腺、
脑、脊髓等
结缔组
织、肌
肉、性
腺、卵
巢、肝
体表、鳍、
鳃、鼻孔、
口腔、眼
雕等处
表A.1（续）
常见寄生虫病临床症状
三代虫病：三代虫主要危害鱼苗、鱼种。以铺钩和边缘小钩钩任鱼体，利用头器的粘着作用在鱼体表或鳃上作尺嫂虫式运动，从而操作鱼体，刺激分泌大量的精液。大量奇生时，病鱼皮肤工有一层灰白色粘液，鱼体瘦弱失去光泽，游动不正常，食欲减退，呼吸困难。整至苑
血居吸虫病：鱼苗跳跃，挣扎急游等，病鱼肛门出现水泡全身红肿，眼突出。鲤号血管有大量尾蝴侵袭导致妨碍面液循环、呼吸·造成死慢性型病鱼腹水较多，肛门肿大外突，竖鳞、突眼，终至衰竭而死九江头槽缘虫病，消瘦发黑，离群独SN/T2503—2010
出体形态特征
三代虫的形态、大小与指环虫相似，主要区别在于头器为一对，无眼点，后吸器的边缘小钩为8对，咽由8个肌肉细胞分两部组成，两根肠管以盲端结束，身体中部有一椭圆形的胎儿，胎儿体内又孕育着下一代的胎儿：我国纪录的大致40种饲养鱼类常见的有：鲢三代虫（hy-popthabmiehthysi)，皖三代虫（G.ctenopharyngodontrs）和秀丽三代虫（G.eleganse）等（参更附录B第B3章
其他鉴定方法见SN/T2124。
成虫扁平梭形，前端尖细，（0.268mm~0.844mm）×（0.142mm~0.244mm）.披有很粗的体棘，新向体后排列。口孔在吻突前端，不具下接食
分为四叶盲费
下行至体三分之一处突然膨大并攀丸位于卵巢前方，对称排列，游，恶性贫血。严重感染时，前肠第虫体带状，20mm~230nm，头节有朗显顶盘和盘曲胀大成胃囊状，直径增加三两个较深的吸沟。睾丸分布于节片的两侧。卵倍。肠壁皱霜萎鞘，表现出便性炎箱圆形，淡褐色，壳厚盖小。症，肠道被虫体堵塞
草鱼似头哟中
病：鱼体消博发黑
大呈球状，肠道轻
离群。前履部膨
充血，呈慢性炎症
，拒食腹鳍基部
充血，鳃丝肿胀，肝脏变色，胆囊水肿。
大中华蚤病：鳃丝边缘有自色“姐样”虫体，鳃丝末端肿大发白.粘液增多，鱼焦躁不安。如大量寄生，可导致病鱼室息死亡，
病：鱼体消瘦.极度不安，狂游，跳跃。刺伤鱼体皮肤形成的伤口易导致微生物人侵，易引起继发感染雄虫短小呈香焦形.0.7mm~1.27mm.体表披吻短小，吻鞘单层，吻钩18个，排有横行小辣，
成4圈。雕点（0.9mm~2.3mm）×0.12mm~.32mm），休细长黄瓜形，生殖孔在末端腹部。虫体细长头部半卵形，头、胸间假节共长，向两侧英出，比头部宽大。第一至四胸节宽度相等。第四胸节特别长大。第五胸节仅为前一节宽度的三分之二，生殖节特小，腹部3节，细长，有2假节。雌虫2.2mm-3mm。
虫体大而扇平，背甲呈圆形或椭圆形.腹部后方有二叶，一对尾叉。两对触角及口前刺。第二小题变为吸盘。显足的基板具齿。http·
//www
SN/T2503—2010wwW.bzxz.Net
A）幼虫
脆口：
大核：
食物粒：
伸缩泡：
小孩；
B）成虫
图B.1小瓜虫
附录B
（资料性附录）
主要寄生虫形态学图片
头腺：
交配器：
前列腺：
广精囊：
子宫：
阴道：
卵菜：
睾丸：
眼点：
雌性生殖孔：
受精囊：
边缘小钩：
锚钩。
鳃片指环虫
httn：
.//wwwfoodmate.net
头器：
交配囊；
忙精囊：
输精管：
第三代胎儿：
第二代胎儿：
成熟的虫郎：
卵巢：
墨丸：
进缘小钩：
锚钩。
图B.3秀丽三代虫
httr
极囊核
跑子的正面观：
孢子的缝面观。
嗜碘泡
SN/T2503-—2010
粘孢子虫的孢子构造
odmatenet
SN/T2503—2010
C.1原生动物病原
C.1.1血液中的原生动物
附录C
（资料性附录）
鱼类寄生虫的采集和保存
血液中的原生动物应采用涂片的方法采集，从鲤动脉或心脏取得血液滴于载玻片右端，涂片，将血片倾斜放置于空气中晾干，用甲醇固定3min一5min，用姬姆萨法染色。如不能马上染色，搁置时间不能超过2个月，否则会影响染色效果。C.1.2孢子虫的采集
孢子虫可用4%的甲醛水溶液固定保存。观察嗜碘泡，可用刘高氏染色；观察极丝放出的情况，可将“内含物”与聚乙烯醇相混。C.1.3皮肤、鳃、肠道中的原生动物鞭毛虫、变形虫、纤毛虫、孢子虫、球虫用下述方法处理：用弯头镊子夹取一小块带有寄生虫的鳃组织或肠道粘液等，均匀地涂在洁净的盖玻片上。将涂片涂面朝下浮放于事先选定的固定液1min。然后翻转，将涂面朝上，再固定15min~20min。将涂片从固定液中取出，放人50%乙醇洗去多余的固定液，再放人装有70%乙醇的指形管中保存备用。肖氏液适用于固定纤毛虫、变形虫、粘孢子虫，载氏液用于固定纤毛虫，特别是车轮虫；何氏液用于固定鞭毛虫类，如无上述三种固定液时，均可用翁氏液代替C.1.4干片的制备
用于观察虫体的某一部分结构（如斜管虫腹部的纤毛线、小瓜虫，肠袋虫的纤毛线，车轮虫的齿环、旧齿体及颗粒结构等）用硝酸银染色观察。C.2蠕虫类
C.2.1单殖类的处理
单殖类个体较小，将带有虫体的组织置于解剂镜下，用小针将虫体剥下，放人有清水的培养中，然后用吸管吸出，用适当的固定剂固定，如遇虫体较多，虫体较大，可放人带有清水的培养血中，用弯头钳子将粘液及部分组织、虫体刮人水中，然后用清水洗涤数次，可用肉眼见到虫体沉于Ⅲ底，逐个用小钩针挑出进行处理。但用此法，肉眼难于见到幼虫，要挑出幼出及小虫体，仍应在解镜下进行。另一种办法，是将带有虫体的组织剪下，放人装有清水的培养Ⅲ中，滴人数滴薄荷乙醇，静置1h2h，单殖吸虫即脱落水中。挑出虫体进行活体观察或进一步固定。一般用4%-5%甲醛水溶液或肖氏液固定而封固于油胶中或连同组织同定，切片可用鲍恩氏（Bouins）液或仁克氏（Zenkers）液固定。C.2.2复殖类的处理
小型复殖吸虫当寄生数量多时，一般采用摇动法固定，以青鱼肠中的侧殖吸虫为例。将虫体连同肠中粘液一道刮下，放入培养血中，用生理盐水洗涤数次，使虫体与粘液分开。然后，将吸虫移入指形管中，并装入三分之一的蒸馏水，用拇指压紧瓶口，摇动3min～5min，令虫体麻醇后再加满95%的乙醇，再摇动1min，最后换70%乙醇保存。中大型吸虫，可用两片玻璃片将虫体压平，从一端加入固定液，另一端用吸水纸将水分吸去，使固定10
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