SN/T 0212.2-1993出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验方法 甲基化-气相色谱法

中华人民共和国进出口商品检验行业标准

SN/T 0212.2—93

出口禽肉中二氯二甲吡啶酚
残留量检验方法
甲基化-气相色谱法

Method for determination of clopidol residues in poultry meat for export
—Methylation-gas chromatography

中华人民共和国进出口商品检验行业标准

1 主题内容与适用范围

本标准规定了出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验的抽样、制样和气相色谱测定方法。

本标准适用于出口鸡肉中二氯二甲吡啶酚残留量的检验。

2 抽样和制样

2.1 检验批

以不超过 2500 箱为一个检验批。

同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

2.2 抽样数量

2.3 抽样方法

按 2.2 规定的抽样箱数随机抽取，逐箱开启。每箱至少取一袋作为原始样品，原始样品总量不少于 2 kg，加封后，标明标记，及时送实验室。

2.4 试样制备

从每袋原始样品中取部分有代表性鸡肉样，用绞肉机绞碎，将全部绞碎的样品混匀；用四分法缩分出试样量不少于 500 g，分装入清洁容器内，加封后，标明标记。

2.5 试样保存

试样于 -18℃下冷冻保存。

注：在抽样和制样过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

3 测定方法

3.1

用甲醇提取鸡肉组织内的二氯二甲吡啶酚，离心后的上清液经中性氧化铝和阴离子交换柱净化。洗脱液经重氮甲烷试剂甲基化，生成的二氯二甲吡啶甲醚（3,5-二氯-4-甲氧基-2,6-二甲基吡啶）用配有电子俘获检测器的气相色谱仪测定，以 2,4-二硝基氯苯为内标进行定量。

3.2 试剂和材料

除特殊规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相应的去离子水。

3.2.1 甲醇。

3.2.2 中性氧化铝：层析用，100～200目；300℃灼烧 4 h，置于干燥器备用。

3.2.3 阴离子交换树脂：Dowex 1-X8, 100～200目，氯型。或等效品。

3.2.4 乙酸甲醇溶液：0.6% (V/V)。3 mL 冰乙酸溶于 497 mL 甲醇中。

3.2.5 正己烷：加碱重蒸馏。

3.2.6 内标：2,4-二硝基氯苯，纯度＞99%。

3.2.7 提取用的硝基氯苯正己烷溶液：0.1 μg 2,4-二硝基氯苯/mL 正己烷溶液。

3.2.8 重氮甲烷试剂：在 125 mL 的蒸馏瓶中加入 35 mL 乙醇、10 mL 乙醚和 10 mL 氢氧化钾水溶液（6 g/10 mL），放入磁棒，并固定在磁力搅拌器加热板上的水浴中。连接漏斗和冷凝器并串联两个 125 mL 锥形瓶，锥形瓶中各置有 10 mL 乙醚。冷凝收集管插入乙醚液面。锥形接收瓶置于冰浴中。滴液漏斗内盛有 21.5 g 的 N-甲基-N-亚硝基-p-甲苯磺酰胺溶于 140 mL 乙醚的溶液（重氮试剂）。加热水浴至 70℃，进行蒸馏，蒸馏瓶内溶液边用磁力搅拌，边滴加重氮试剂，滴完全部溶液的时间控制在 20 min 以上。当馏出液近于无色时，停止蒸馏。将两个锥形接收瓶中的溶液合并，并在 70℃水浴上重蒸馏。将馏出液（重氮甲烷试剂）密封，并于 -18℃保存。保存期一个月。

3.2.9 二氯二甲吡啶酚标准品：纯度＞99%。

3.2.9.1 二氯二甲吡啶酚标准贮备液：100 μg/mL。准确称取 100.0 mg 二氯二甲吡啶酚标准品，用甲醇移入 1 000 mL 容量瓶至总体积约 600 mL，振荡溶解（约需 2～3 h）。用甲醇定容到刻度，混匀。

3.2.9.2 中间标准溶液（I）：10 μg/mL。用移液管移取上述标准贮备液 10 mL 于 100 mL 容量瓶内，用甲醇稀释至刻度。

3.2.9.3 中间标准溶液（II）：1 μg/mL。用移液管移取中间标准溶液（I）10 mL 于 100 mL 容量瓶内，用甲醇稀释至刻度。

3.2.9.4 标准工作溶液：0.1 μg/mL。用移液管移取中间标准溶液（I）10 mL 于 100 mL 容量瓶内，用甲醇稀释至刻度。

3.3 仪器和设备

3.3.1 搅肉机：电动。

3.3.2 均质机：3 000 r/min。

3.3.3 离心机：日立 20 PR-S20 4 000 r/min 或相当的设备。

3.3.4 中性氧化铝柱：称取 2 g 中性氧化铝（3.2.2），填入 100 mm×10 mm（内径）玻璃层析柱内。

3.3.5 阴离子交换层析柱：将 Dowex 1-X8 阴离子交换树脂以去离子水移入 250 mm×10 mm（内径）层析柱内，沉淀后柱床高度为 1.5 cm。以 100 mL 1 mol/L 的 NaOH 水溶液淋洗树脂，继以去离子水洗至中性；再以 100 mL 0.5 mol/L 乙酸钠水溶液淋洗，继以去离子水淋洗至中性。流速均为 2 mL/min。注入甲醇水溶液（8+2）50 mL 备用。使用前放出甲醇水溶液，使液面略高于树脂层。

3.3.6 试管：带旋盖（耐压并气密性的），100 mm×13 mm（内径）。

3.3.7 气相色谱仪并配有电子俘获检测器。

3.3.8 微量注射器：10 μL。

3.4 测定步骤

3.4.1 提取

称取约 20 g 试样（精确至 0.1 g）于均质瓶内，加入 100 mL 甲醇，3 000 r/min 均质 4 min 后，将均