NY/T 2060.2-2011 辣椒抗病性鉴定技术规程 第2部分:辣椒抗青枯病鉴定技术规程 NY/T2060.2-2011 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

ICS 65.020
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2060.2-2011
辣椒抗病性鉴定技术规程
第2部分：辣椒抗青枯病鉴定技术规程Rules for evaluation of pepper for resistance to discases-Part 2 :Rule for evaluation of pepper for resistance to hacterial wilt2011-09-01发布
2011-12-01实施
中华人民共和国农业部发布
NY/T2060辣椒抗病性鉴定投术规程》分为5个部分：第1部分：辣搬抗疫病整定技术规程；第2部分：辣傲抗青帖病鉴定技术规程；……第3部分辣椒抗焖草花叶病毒病鉴定技术规程第4部分：辣鞭抗黄瓜花川病病鉴定技术规程；第5部分：辣椒抗南方根结线虫病鉴定技术规程。本部分为 NY/T2060的第2部分，水部分被照GB/T 1.1—2009给山的规则起草,本部分出中华人民共和国农业部种植业管理司提出，本部分由全国蔬菜标准化技术委员会（SAC/TC467）归口本部分起草单位：中国农业科学院蔬莱化卉研究所。NY/T2060.2—2011
本部分主要起草人：杨宇红、谢内炎.冯兰香、粉翠荣、龚慧芝、菲振川、陈国华。I
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辣搬抗病性鉴定技术规程
第2部分·辣椒抗青枯病鉴定技术规程NY/T 2060.2—2011
本部分规定了辣椒抗青枯病鉴定的术语和定义、接种休制备、室内抗性鉴定、病情调否，抗病性评价以及鉴定记裁表格。
本部分适用于各种辣椒CaasicumannuumL.)资源对疫病抗性的案内鉴定及评价。2本语和定义
NY/T 1858.4-—2010界定的以及下列本语和定义适用于本文件。2.1
辣椒青枯病，pepperbacterialwilt由青粘雷尔民菌[Ralstomnia solanarearun（Sryith）Yabuuchietai引起的发病初期顶端叶片中乍焉，早晚恢复，随后下、中部叶片渊，数天后整株急刷萎薄，但叶片仍为绿色，是现青枯症状：病株的整H部及根部维管束变竭等症状的辣毅土传病害。3青枯病菌接种体制备
3.1病原物分离
从发病植株病部的褐色维管束组织中，用常规稀释分离法或平板划线分离法分离青枯病病原物。分离物经寄主范围、培养性状、牛理生化反应和形态学鉴定硫认为青枯雷尔菌后，再逊行分离物纯化和敛病性测定,并保存备用。
3.2生理小种鉴定
对用于抗病性鉴定接种的病原分离物进行牛理小种的鉴定,鉴定方法参见附录 A中 A. 2。3.3接种体繁殖和保存
3.3.1接种体的繁殖
将保存在灭菌蒸留水中的古枯菌落摇匀，挑取一接和环菌液在TTC培养基平板上划线.30℃培养36h48h后，选取较大、H边较宽、中实粉红色、似有流动感的菌落（毒性菌落）转移到葡菊耕蛋白陈液休踏养基巾，在同样温度下振荡培育16H，加适量北菌水成接种悬浮液。葡萄糖蛋白陈液休培养基的制备：葡萄糖6g·蛋白陈0&,水解酪强凹」g·蒸馏水 1000 mL,酸碱度调到 I7.2,商压火菌(121.20 tmin)。TTC固体培养基的制备：在葡翁糖蛋白陈液体培养基配制中增加琼脂18宫,并在培养基灭菌后冷部至55%时，加过滤火菌的1%的2.3，5三米贴氯化四氮哗水溶液，使终浓度为0.005%，端勾，3.3.2病原物保存
将TTC荷体培养基斜面上的新鲜古枯病菌用灭菌蒸馏水洗下，戒者挑取菌落放人灭菌馏水中，在室温下保存，
4室内抗性鉴定
4. 1 鉴定室　
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人工接种整定室应具备人工调节温度混度及光照的条竹，使人工接种后具备良的发病环境。4.2鉴定设计
鉴定材料随机排列或顺序排列，每份鉴定材料重复3次，每一重复10株苗。4.3鉴定对照材料
设arval棘椒或博辣6号为抗病对照品种，茄门甜椒为感病对照品利：4.4鉴定材料育苗
鉴定种子在10%的次氯酸钠溶液中漫种5minJ0mir.清水孙洗后置1c温培养箱4?28C稀学播种」育苗钵内。育苗基质为草炭、蛭名和菜m土（2：1：1），经高温蒸汽灭菌（134%.30min）。在口光温室里育苗，室内温度为20%-25%，幼苗应生长非、致。4.5接种
4.5.1接种时期
接种时期为5片~6片真叶期。
4.5.2接种浓度
约10A个efu/mL(ODo2=0,2)：
4.5.3接种方法
接种采旧伤根灌注接种法。接利前在幼苗一侧距根1m处用乃片斜插人土壤造成伤根，在伤根处株滋注10mL接种悬浮液：
4.5.4接种后管理
接种后将植株置于白天28℃~-32℃夜凹22℃~24%，上瘫湿度85%-91%的骤定室内，每天兆照12h~14h,光照融度20klx.保持土窥湿度近饱和状态。5病情调查
5.1调查时间
接种后8d~10d调查病情.
5.2病情级别划分
幼苗病情缀别放其相对应的痴状描述见表1：表1
然情缀别
5.3调查方法
辣椒抗青枯病苗期室内鉴定病情级别的划分症状
无症状
「片婆篇
2片~3片叶袋需
除顶部2片~3片叶外，H他叶片邯邀蕊整株叶片全部蒸篇
调查号份鉴定材料接种株发病情况，根据病害症状描述.逐份材料进行调查，记载病情缴别，算出病指数(DD)。病情措数按式(1)计算：DI :
武中：
病情指数；
各病情级别的代表数值：
各病情级别的植株数；
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-调查总植株数;
最商病情级别的代表数值。
6抗病性评价
6.1抗病性评价标准
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依据鉴定材料3次重复的病情指（DI>平均值确定其抗性水平，划分标推见表2.表2辣椒苗期对声枯病抗性的评价标准病情指数()
不侵染，DI=0
C-DI12. 5
50-p73
6.2鉴定有效性判别
抗性评价
免疫()
高抗(HR)
抗病(R)
中抗(MR)
感病(S)
高感(HS)
当感病对照材料达到其相应感病程度（DI50).该批次抗背枯病鉴定视为有效鉴定记载表格
辣椒抗青枯病鉴定结果记裁表格现表3。辣椒抗青枯病鉴定结果记载表
播种H期
接种生育期
生理小种类型
品种/种压
重复区号
病肾级别
接种日期
接种疝原幽分离翻编号
调查川期
鉴定技负责人(签字)：
HYTKAONT KAca
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A.1学名和形态描述
A.1.1学名
附录A
（资料性附录）
辣椒青枯病病原菌和生理小种
青粘笛尔岗LRaistonin sotanucerum(Smith)Yabuuchi et al.-。A.1.2形态描述
菌体短杆状，大小0.5m-(0.7um×1.5um-2μm,具极坐瓣毛1根-根：在葡葡糖蛋白陈培养其上菌落较小、近圆形，稍有突起、光滑、乳白色，6-~7后渐变褐色后失去致病力。在TTC增养基上，毒性型菌株的菌辫较人、黏度较小，并易在平板上扩展成不规则形、边较宽、中央粉红色、似有流动感的单菌落
A.2生理小种
4. 2. 1采用的鉴别寄主
鉴别寄主谱有烟草、酱茄、乌伶薯、茄子、花年和香蕉。A.2.2生理小种鉴定
根据病原菌分离物对鉴别谢主的侵染性，以特定的侵染反应组合划分生理小种(表A.1)。表A.1辣椒青枯病病原菌生理小种的鉴定牛理小种
马铃器
藩根接种能否侵染
注1：“：接染；一：不慢染
注2:理小神分类法划分文赋：Finddenhagen,L.WL.Soucir and AKelina.Tesigoation ntes in Pseurdomonasotayaceurn,Phytoarh.i1062,52:72h此外，还根批病原菌分离物对一糖（弱糖、麦芽糖和纤维一糖)和二醇（露醇甜醇和山梨醇)的氧化能力.确定其生化型（表A.2)。表A.2辣椒青枯病病原菌生化型的鉴定生化型
维二精
廿麟醇
山樂醇
控：二，利用该物质，产酸；一，不能利儿该物质，不产酸。注2：生化型分奖然划分参考文就：Iayward,ACCharectrrislLics ofPseudomonassoicanaceuarmaJ.Appl.Bact.196427.266 - 277
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