NY/T 2310-2013
基本信息
标准号： NY/T 2310-2013
中文名称：花生黄曲霉侵染抗性鉴定方法
标准类别：农业行业标准(NY)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
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出版信息
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标准简介
NY/T 2310-2013 花生黄曲霉侵染抗性鉴定方法
NY/T2310-2013
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标准内容
1CS65.020
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2310—2013
花生黄曲霉侵染抗性鉴定方法
Evaluation method of peanut resistance toAspergilus flavus infection
2013-05-20发布
2013-08-01实施
中华人民共和国农业部发布
本标准按GB/T1.1一2009给出的规则起草。NY/T 2310-2013
本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院油料作物研究所，农业部油料及制品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人：张奇、李培武、张兆威、丁小霞、周海燕、李冉、雷永、下圣玉.1范围
花生黄曲霉侵染抗性鉴定方法
本标准规定了花生黄曲霉侵染抗性鉴定方法。本标准适用于花牛黄曲霉侵染抗性的鉴定。2规范性引用文件bzxZ.net
NY/T2310—2013
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件：仪注日期的版本适用于本文件。凡是不注口期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T19547感官分析方法学量值估计法3原理
用黄曲霉菌接利待测花牛样品·恒温恒湿培养，计算黄曲霉菌侵染接种花生样品的侵染指数，评价花生黄曲霉侵染抗性
4试剂与材料
除非另有说明，均使用分析纯试剂和3/T 6682规定的一级水。4.1氯化求（HgCl）：化学纯。
4.2硝酸钠（NaNO,）：化学纯。4.3磷酸氢_钾（K,IIPO),）:化学纯。4.4七水合硫酸镁(MgS0·7HO)：化学纯。4.5氯化钾（KCI)：化学纯
4.6硫酸亚铁（FeSO·7H,O)：化学纯4.7蔗糖：化学纯。
4.8琼脂：水分22%.灰分3%。
4.9察氏培养基：准确称取硝酸钠3.00g，磷酸氢二钾1.00g，七水合硫酸镁0.50g.氯化钾0.50g+七水合硫酸亚铁0.01g，煎糖30.00g，琼脂20.C0g加水定穿至100CmL。加热溶解、锥形瓶50nL分装后121℃火菌2Cmin
4.10HgCl2溶液：e（HgCl）-0.2%，准确称取0.2氯化求，加水定容至100mL。现配现用。4.11无菌水：121℃灭菌20min，冷却待用。4.12吐温水溶液：999ml.水中加人1ml.吐温 20,混句后121℃高压火菌20min，冷印待用，4.13黄曲霉菌株（菌株编号：AF2202）。5仪器设备
5.1血球计数板。
5.2高压灭菌锅。
5.3生物安全柜。
NY/T 2310—2013
5.4恒温恒湿培养箱。
5.5离心机。
5.6显微镜。
5.7旋漓混合器。
5.8培养阻：内径20cm
5.9烧杯：10%ml.
5.10锥形瓶：150rnl
6试样制备
取无损健康的花生炎果，于工小心刻取仁，挑选种皮完好、无病出斑的饱满籽粒50粒。7黄曲霉菌孢子悬浮液配制
生物安全柜中无菌取出黄曲霉菌株（4.13)，接种于察氏培养基（4.9).30℃培养8d-10l.用温水溶液（4.12）洗脱分生孢了，用血球计数板在显微镜下计算袍子浓度，调整孢子浓度到5×10§个/ml的孢子悬浮液，备用。
8接种与培养
8.1表面灭菌
将花牛籽粒置丁装有HgCs溶液（4.10)的烧杯巾授泡1Cmin，取出用光菌水漂洗两次，保持籽粒种皮完整。
8.2接种
将火菌后的花生籽粒移人干净烧杯中，加入5×10个/ml.的孢子悬浮液1mI,轻摇烧杯使菌液与籽粒充分均匀接触，然后用光菌镊了轻轻取山均勺地分散排列于3个带灭菌滤纸的培养（5.8)内。8.3培养
丁恒温但湿培养箱中30℃湿度90%培养6d。9空白对照
设置对照组，除不接种黄曲霉外，其他操作与接种操作相同。10侵染指数计算
10.1花生侵染分级
根据GB/T19517的要求分组采用肉限观察花生籽粒感染黄曲霉后爆菌覆盖料粒的面积自分比进行侵染分级：0级，花生籽粒无感染：1级，覆盖率占种子表面积1/3以下：2级.覆盖率占种了衣面积1/3--2/3:3级覆盖率占种子表询积2/3以上。警告：因黄曲霉毒素剧苛.操作中注意保护人身安企：10.2侵染指数计算
饺染指数以R比，按式(1)计算，Z( ×n.）
R侵染指数：
花生料粒感染黄曲霉后霉菌覆盖籽粒的面积百分比对应的仪染级数；批花生籽粒感染黄曲得后各级颗粒数；实验组花生总颗粒数。
测定结果取两次重复测定的算术平均值·保留小数点后一位。花生籽粒黄曲霉侵染抗性鉴定
侵染指数15以下为高抗，16-~30为中抗，31~-50为中感.51以上为高感，NY/T2310—2013
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中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2310—2013
花生黄曲霉侵染抗性鉴定方法
Evaluation method of peanut resistance toAspergilus flavus infection
2013-05-20发布
2013-08-01实施
中华人民共和国农业部发布
本标准按GB/T1.1一2009给出的规则起草。NY/T 2310-2013
本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院油料作物研究所，农业部油料及制品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人：张奇、李培武、张兆威、丁小霞、周海燕、李冉、雷永、下圣玉.1范围
花生黄曲霉侵染抗性鉴定方法
本标准规定了花生黄曲霉侵染抗性鉴定方法。本标准适用于花牛黄曲霉侵染抗性的鉴定。2规范性引用文件bzxZ.net
NY/T2310—2013
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件：仪注日期的版本适用于本文件。凡是不注口期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T19547感官分析方法学量值估计法3原理
用黄曲霉菌接利待测花牛样品·恒温恒湿培养，计算黄曲霉菌侵染接种花生样品的侵染指数，评价花生黄曲霉侵染抗性
4试剂与材料
除非另有说明，均使用分析纯试剂和3/T 6682规定的一级水。4.1氯化求（HgCl）：化学纯。
4.2硝酸钠（NaNO,）：化学纯。4.3磷酸氢_钾（K,IIPO),）:化学纯。4.4七水合硫酸镁(MgS0·7HO)：化学纯。4.5氯化钾（KCI)：化学纯
4.6硫酸亚铁（FeSO·7H,O)：化学纯4.7蔗糖：化学纯。
4.8琼脂：水分22%.灰分3%。
4.9察氏培养基：准确称取硝酸钠3.00g，磷酸氢二钾1.00g，七水合硫酸镁0.50g.氯化钾0.50g+七水合硫酸亚铁0.01g，煎糖30.00g，琼脂20.C0g加水定穿至100CmL。加热溶解、锥形瓶50nL分装后121℃火菌2Cmin
4.10HgCl2溶液：e（HgCl）-0.2%，准确称取0.2氯化求，加水定容至100mL。现配现用。4.11无菌水：121℃灭菌20min，冷却待用。4.12吐温水溶液：999ml.水中加人1ml.吐温 20,混句后121℃高压火菌20min，冷印待用，4.13黄曲霉菌株（菌株编号：AF2202）。5仪器设备
5.1血球计数板。
5.2高压灭菌锅。
5.3生物安全柜。
NY/T 2310—2013
5.4恒温恒湿培养箱。
5.5离心机。
5.6显微镜。
5.7旋漓混合器。
5.8培养阻：内径20cm
5.9烧杯：10%ml.
5.10锥形瓶：150rnl
6试样制备
取无损健康的花生炎果，于工小心刻取仁，挑选种皮完好、无病出斑的饱满籽粒50粒。7黄曲霉菌孢子悬浮液配制
生物安全柜中无菌取出黄曲霉菌株（4.13)，接种于察氏培养基（4.9).30℃培养8d-10l.用温水溶液（4.12）洗脱分生孢了，用血球计数板在显微镜下计算袍子浓度，调整孢子浓度到5×10§个/ml的孢子悬浮液，备用。
8接种与培养
8.1表面灭菌
将花牛籽粒置丁装有HgCs溶液（4.10)的烧杯巾授泡1Cmin，取出用光菌水漂洗两次，保持籽粒种皮完整。
8.2接种
将火菌后的花生籽粒移人干净烧杯中，加入5×10个/ml.的孢子悬浮液1mI,轻摇烧杯使菌液与籽粒充分均匀接触，然后用光菌镊了轻轻取山均勺地分散排列于3个带灭菌滤纸的培养（5.8)内。8.3培养
丁恒温但湿培养箱中30℃湿度90%培养6d。9空白对照
设置对照组，除不接种黄曲霉外，其他操作与接种操作相同。10侵染指数计算
10.1花生侵染分级
根据GB/T19517的要求分组采用肉限观察花生籽粒感染黄曲霉后爆菌覆盖料粒的面积自分比进行侵染分级：0级，花生籽粒无感染：1级，覆盖率占种子表面积1/3以下：2级.覆盖率占种了衣面积1/3--2/3:3级覆盖率占种子表询积2/3以上。警告：因黄曲霉毒素剧苛.操作中注意保护人身安企：10.2侵染指数计算
饺染指数以R比，按式(1)计算，Z( ×n.）
R侵染指数：
花生料粒感染黄曲霉后霉菌覆盖籽粒的面积百分比对应的仪染级数；批花生籽粒感染黄曲得后各级颗粒数；实验组花生总颗粒数。
测定结果取两次重复测定的算术平均值·保留小数点后一位。花生籽粒黄曲霉侵染抗性鉴定
侵染指数15以下为高抗，16-~30为中抗，31~-50为中感.51以上为高感，NY/T2310—2013
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