NY/T 1156.18-2013 农药室内生物测定试验准则 杀菌剂 第18部分井冈霉素抑制水稻纹枯病菌试验 E培养基法 NY/T1156.18-2013 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

ICS 65.100
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1156.18-2013
农药室内生物测定试验准则
杀菌剂
第18部分：井冈霉素抑制水稻
纹枯病菌试验
E培养基法
Pesticides guidelines for laboratory bioactivity testsPart 18 : E-medium test for determining jinggangmycin inhibition ofRhizoctonia solani Kihn growth on rice2013-05-20发布
2013-08-01实施
中华人民共和国农业部发布
NY/T 1156《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》为系列标滩：
第1部分：抑制病原点菌孢子萌发试验凹坡片法；
第2部分：抑制病原黑菌菌丝生长试验平法：第3部分：抑制黄瓜和霉菌病菌试验“平血片法；第1部分：防治小麦白粉病试验：盆裁法蚕豆叶片法：
第5部分：抑制水稻纹枯病菌试验第6部分：混配的懿食作用测定：-第7部分：防治黄胍箱密病试验盆製祛；
第8部分：嫩冷水稍稻症病试验盆栽法；第9部分排制灰霉病菌试验叶片法第10部分：防治灰睾病试验盆裁法；第11部分：防治瓜类白粉病试验·盆裁法：第12部分：防治晚疫病试验：盆栽法！一第13部分：抑制晚疫病菌试验：叶片法，第14部分：防治瓜类炭癌病试验：盆裁法；：第15部分：防治麦类叶锈病试验盆栽法；“-第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法；一第久部分：抑制玉米丝熙穗病菌试验，萍度-嗨联板法+第i8郁分：冈霉素抑制水稻纹枯病菌试验”E培养基法；本部分足农药室内生物测定试验准则杀菌剂》的第18部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，本部分出农业部种植业理可提出并归口。本部分起草单位农业部农药检定所。本部分主要起草大朱春雨、刘西莉吴新平.张文君、张楠、黄中乔、聂东兴。NY/T 1156.18--2013
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第18部分：井冈霉素抑制水稻纹枯病菌试验E培养基法1范围
本部分规定广E培养基法测定川风毒对冰猎统病毒生物活性的基本要求和方法。本部分适丁井冈霉索对水程蚊枯病菌生物活性测庭的农药登记试验。2仪器设备
2. 1电子天平(感量 0.1 img：
2.2生物培养箱：
2.3压力蒸汽火蘭器
2. 4移液管或移液器
2.5培养血(90mm)；
2.6接种器打孔器。
3试剂与材料
3.1试剂
方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分析纯，水为蒸馅水。3.2生物试谢
供试靶标为水稻纹枯病菌（Rhixortomia solaniKhn)），选开生敏感型藍株，记录谢种来源。根据试验目的和要求把菌种预先接种在 PDA 培养基上培养至适用期。3.3培养基及基他试材准癌
3. 3. 1 E培养基K,HP0.2 g,KH,PO,2 &、葡萄糖 10 g、琼脂粉(凝胶强度 1 300 g/ cm2)12 g,蒸馏水定容举 1 000 rnil..15亡高压混热灭菌 15 min 备用3. 3.2 PDA 培养基:马龄薯 200 g、葡萄糖 18 ,琼脂粉(凝胶强度 1 300 g/cri)12 g.蒸馏水定容至1000 ml,121℃高压湿热灭菌20 min备用。锥形瓶、玻璃棒、移液管、培养血、打孔器，接种器等灭菌后备用。3.4药剂
3. 4. 1 试验药剂
并冈霉素A含量不低于60%的原药.并注明生:产厂家。3.4.2对照药剂
对照药剂采用己登记注册且生产上常用药剂的原药。对照药剂的化学结构类型或作用方式应与试验约剂相同或相近。
4试验步骤
4.1药剂配制
并冈毒素直接用无菌水溶解，其他对照药剂选用经预备试验对菌丝生长无影响的适合溶剂（如甲1
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醇、丙酮、二甲基甲酰胺或二基亚砜等)溶解、用0.1%的吐温80或其他适合的表面活性剂水溶液稀释，根据药剂活性，设置5个一·7个系列质量浓度，有机溶剂般终浓度不超过0.5沟。4.2药剂处理及含药平板制备
在无菌操作条件下，根据试验处理将预先融化的火菌E培养基定量加人光菌锥形瓶中，从低浓度到高浓度依次定量吸取药液，分别加人上述锥形瓶中，充分操。然后分别倒人1个培养血中，每血15mL，制成相应浓度的含药平板，试验设不含药剂的处理作空户对照每处理不少于4个重复。4.3接种菌饼准备
将水稻纹粘病菌预先接种于PDA平板中央，于25℃:培养48h，得创以接种中心为阅心的菌落、在菌落牛长边缘进行划界，以位于菌落长边缘的划界处为最佳待测力区域。继续培养18h后，在待测毒力区域打取菌饼以保证菌饼的菌龄适宜（图1)。坐长达界
培养Ⅲ
接种中心
打取的菌饼
图1接种菌饼准备示意图
4.4接种
将制备好的菌饼,在儿菌条件下分别接种丁含有不同浓度并冈霉素的E培养其平板中央，菌丝面朝下，盖上I盖，置于25℃培养箱，黑暗条件下培养，5调查
待空门对照菌落占径生长至75Imrn~80mm时调查试验结果，用1字交义法测量各处理菌落的直径,取其平均值。
6数据统计及分析
6.1计算方法
根据调查数据按式（1)和式（2)计算各处理浓度对供试靶标菌的菌丝准长抑制率，单位为百分率（%），订算结保留小数点后两位，D -- D. - D.
式中·
D菌落增长直径，单位为毫米(mm）：D-菌落卢径，单位为毫米式中：
1菌丝生长抑制率，单位为白分率（%);D。密白对照菌落增长直径，单位为毫米（mm)；D
-药剂处理菌落增长直径，单位为毫米(n)。NY/T1156.18—2013
6.2统计分析
数据处理系统(DPS)或统计分析系统(SAS)等标准统计软件对药剂浓度对数值与抑制几率值进行回归分析，计算药剂的EC值及其95%置信限，并进行差异显者性分析。结果
根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告，并列出原始数据，附相应试验图片，3
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