NY/T 1156.19-2013
基本信息
标准号： NY/T 1156.19-2013
中文名称：农药室内生物测定试验准则 杀菌剂 第19部分抑制水稻稻曲病菌试验 菌丝干重法
标准类别：农业行业标准(NY)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 农药 室内 生物测定 试验 准则 杀菌剂 抑制 水稻 病菌
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标准简介
NY/T 1156.19-2013 农药室内生物测定试验准则 杀菌剂 第19部分抑制水稻稻曲病菌试验 菌丝干重法
NY/T1156.19-2013
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标准内容
ICS 65.100
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1156.19—2013
农药室内生物测定试验准则
杀菌剂
第19部分：抑制水稻稻曲病菌试验菌丝干重法
Pesticides guidelines for laboratory bioactivity testsPart19 : Mycelium dry weight test for determining fungicideinhibition of Ustilaginoidea virens on rice2013-05-20发布
2013-08-01实施
中华人民共和国农业部发布
VY/T1156《药室内生物测定试验准则杀菌剂》为系列标准；第1部分：抑制病原真菌孢子萌发试验凹玻片法；第2部分：抑制病原点菌菌丝生长试验平亚法；第3部分：抑制黄瓜霜霉菌病菌试验乎耻叶片法；第1部分：防治小麦白粉病试验盆栽法；第5部分：抑制水稻纹粘病菌试验蚕豆叶片法；第6部分：混配的联合作用测定；第7部分:防治黄瓜霜霉病试验
盆裁然：
第8部分;防治水稍稻痘病试验盆栽法；第9部分：抑制灰霉病菌试验叶片汰：-一第10部分：防治灰霉病试验盆裁法；第11部分：防治瓜类白粉病试验盆裁法；第12部分：防治晚疫病试验盆裁法；第13部分：抑制晚疫病菌试验叶片法！第14部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法；盆栽法；
第15部分：防治麦类叶锈病试验一第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法；第17部分：抑制玉米丝黑穗病菌试验浑浊度一酶联极法；一第18部分：冈霉素抑制水稻纹枯病菌试验E培养基法；-第19部分：抑制水稽稍曲病菌试验菌丝干重法；本部分是农药空内牛物测定试验准则杀菌剂》的第19部分，本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由农业部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位农业部农药检定所。本部分主要起草人朱春雨、刘西树、是新平，张文君张楠、聂东兴、中乔。NY/T 1156. 19—2013
1范围
杀菌剂
农药室内生物测定试验准则
NY/T 1156.19—2013
第19部分：抑制水稻稻曲病菌试验菌丝于重法本部分规定了菌丝十重法测定杀菌剂对水稍稻曲病菌生物活性的基本要求和方法。本部分适用丁抑制菌体牛长的杀菌剂对水稍稍病菌生物活性测定的农药登记试验，2仪器设备
2. 1电子天平(感量 0.1 tmg);
2.2生物培养箱：
2.3压力蒸汽灭菌器；
2.4恒温摇床；
2.5热力烘下箱：
2.6移液管或移液器；
2.7 培养血(90 mm);
2.8锥形瓶（300mL）；
接种器、打孔器。
3试剂与材料
3.1试剂
方法所用试剂,凡未指明规格者,均为分析纯,水为蒸馏水。3.2生物试材
供试靶标为水稻稻曲病菌「Ustiuginideuwirens（coake)Fakahashi，选用野生敏感型菌株，记录菌种米源。根据试验目的和求把菌种地先接种在ISA培养基！培养备川3.3培养基及其他试材准备
3.3.1PSA培养基：马铃薯200g、蔗糖18g、琼脂粉（凝胶强度1300g/cm2)12g，蒸馏水定容至1000ml..121℃灭菌20min备用：
3.3.2PS液体培养其：马铃薯200g蔗糖18g·蒸馏水定容至1(000ml.,121℃火菌20min备用：3.3.3改定YYPS体培养基：铃薯150g、蛋白陈0.1g.酵母粉0.1g、点糖10gKHzPO.1.0gCa（N0)）2?4Hz0)0.5g,蒸馏水定容至1000mL.121℃湿热火菌20min备用催形瓶、玻璃棒、移液管、培养Ⅲ.打孔器、接种环,纱布等灭菌后备用。3.4药剂
3.4.1试验药剂
试验药剂采用原药(母药）),并注明通用名、含量和生产）家。3.4.2对照药剂
对照药剂采用已登记注册且生产上常用药剂的原药。对照药剂的化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近，
NY/T1156.192013
4试验步骤wwW.bzxz.Net
4.1药剂配制
水溶性药剂直接用水溶解稀释：其他药剂选爪经预备试验对菌丝生长无影响的适合溶剂（如甲醇，内制、一川其甲酰胺或二旧基亚砜等）溶解.用0.1%的吐温80或其他适合的表而活性剂水溶液稀释。根据药剂活性，设置5个～7个系列质量浓度，有机溶剂般终浓度不超过0.5%，4.2药剂处理与含药培养液制备
在无菌操作条件下，梭据试验处理将预先制备、灭菌的改定YYPS液体培养基150mL加入300mL无菌锥形瓶中，从低浓度到高浓度顺序定量吸取药剂，分别加入工述锥形瓶中，充分摇勺，制成相应液度的含药培养液，
试验设不含药剂的处理作为窄户对照，每处理不少于4个重复。4.3孢子悬浮液准备
在无菌条件下.用直径5111的灭菌打孔器在预先PSA培养基上培养的稻曲病菌菌落边缘切取菌饼5块-~7块，接人装有1j0ml.PS培养液的300ml铺形瓶中，置于28℃恒温摇床上，150rpm条件下振荡摇培5d~7d。在无菌条件下经4层纱布过滤，用无菌水稀释制成浓度为1×10°个/ml.的孢子悬浮液。
4.4接种
分别在4.2制备的各处理含药培养液和空对照中接入500I的上述孢门感浮液，置于28℃恒温摇床上，150rpm条件下振荡培养。5调查
培养液振荡培养7d后经4层纱布过滤，留下的菌丝体在80℃-~10C℃的热力烘十箱中烘十至恒重，用分析天平测定其下物质质量，记录各处理菌丝体物质的质量。6数据统计及分析
6.1计算方法
根据调查数据，按式（1）计算菌丝生长的抑制率，单位为而分数（%），计算结果保留小数点后两位P-M=M×10C
武中：
P—菌丝生长抑制率.单位为百分率（为)：M。—空白对照处理菌丝体干物质质量.单位为毫克（mg)；M,—药剂处埋菌丝体干物质质量：单位为毫克（mg）。6.2统计分析
用数据处理系统(DPS)或统计分析系统(SAS)等标准统计软件对药剂浓度对数值与菌丝生长抑制几率值进行回归分析，计算药剂的FC、EC等值及其95%置信限，并进行差异显著性分析。7结果与报告编写
根据统计结果进行分析评价.写出正式试骑报告，并列出原始数据和应的试验图片。2
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中华人民共和国农业行业标准
NY/T1156.19—2013
农药室内生物测定试验准则
杀菌剂
第19部分：抑制水稻稻曲病菌试验菌丝干重法
Pesticides guidelines for laboratory bioactivity testsPart19 : Mycelium dry weight test for determining fungicideinhibition of Ustilaginoidea virens on rice2013-05-20发布
2013-08-01实施
中华人民共和国农业部发布
VY/T1156《药室内生物测定试验准则杀菌剂》为系列标准；第1部分：抑制病原真菌孢子萌发试验凹玻片法；第2部分：抑制病原点菌菌丝生长试验平亚法；第3部分：抑制黄瓜霜霉菌病菌试验乎耻叶片法；第1部分：防治小麦白粉病试验盆栽法；第5部分：抑制水稻纹粘病菌试验蚕豆叶片法；第6部分：混配的联合作用测定；第7部分:防治黄瓜霜霉病试验
盆裁然：
第8部分;防治水稍稻痘病试验盆栽法；第9部分：抑制灰霉病菌试验叶片汰：-一第10部分：防治灰霉病试验盆裁法；第11部分：防治瓜类白粉病试验盆裁法；第12部分：防治晚疫病试验盆裁法；第13部分：抑制晚疫病菌试验叶片法！第14部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法；盆栽法；
第15部分：防治麦类叶锈病试验一第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法；第17部分：抑制玉米丝黑穗病菌试验浑浊度一酶联极法；一第18部分：冈霉素抑制水稻纹枯病菌试验E培养基法；-第19部分：抑制水稽稍曲病菌试验菌丝干重法；本部分是农药空内牛物测定试验准则杀菌剂》的第19部分，本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由农业部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位农业部农药检定所。本部分主要起草人朱春雨、刘西树、是新平，张文君张楠、聂东兴、中乔。NY/T 1156. 19—2013
1范围
杀菌剂
农药室内生物测定试验准则
NY/T 1156.19—2013
第19部分：抑制水稻稻曲病菌试验菌丝于重法本部分规定了菌丝十重法测定杀菌剂对水稍稻曲病菌生物活性的基本要求和方法。本部分适用丁抑制菌体牛长的杀菌剂对水稍稍病菌生物活性测定的农药登记试验，2仪器设备
2. 1电子天平(感量 0.1 tmg);
2.2生物培养箱：
2.3压力蒸汽灭菌器；
2.4恒温摇床；
2.5热力烘下箱：
2.6移液管或移液器；
2.7 培养血(90 mm);
2.8锥形瓶（300mL）；
接种器、打孔器。
3试剂与材料
3.1试剂
方法所用试剂,凡未指明规格者,均为分析纯,水为蒸馏水。3.2生物试材
供试靶标为水稻稻曲病菌「Ustiuginideuwirens（coake)Fakahashi，选用野生敏感型菌株，记录菌种米源。根据试验目的和求把菌种地先接种在ISA培养基！培养备川3.3培养基及其他试材准备
3.3.1PSA培养基：马铃薯200g、蔗糖18g、琼脂粉（凝胶强度1300g/cm2)12g，蒸馏水定容至1000ml..121℃灭菌20min备用：
3.3.2PS液体培养其：马铃薯200g蔗糖18g·蒸馏水定容至1(000ml.,121℃火菌20min备用：3.3.3改定YYPS体培养基：铃薯150g、蛋白陈0.1g.酵母粉0.1g、点糖10gKHzPO.1.0gCa（N0)）2?4Hz0)0.5g,蒸馏水定容至1000mL.121℃湿热火菌20min备用催形瓶、玻璃棒、移液管、培养Ⅲ.打孔器、接种环,纱布等灭菌后备用。3.4药剂
3.4.1试验药剂
试验药剂采用原药(母药）),并注明通用名、含量和生产）家。3.4.2对照药剂
对照药剂采用已登记注册且生产上常用药剂的原药。对照药剂的化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近，
NY/T1156.192013
4试验步骤wwW.bzxz.Net
4.1药剂配制
水溶性药剂直接用水溶解稀释：其他药剂选爪经预备试验对菌丝生长无影响的适合溶剂（如甲醇，内制、一川其甲酰胺或二旧基亚砜等）溶解.用0.1%的吐温80或其他适合的表而活性剂水溶液稀释。根据药剂活性，设置5个～7个系列质量浓度，有机溶剂般终浓度不超过0.5%，4.2药剂处理与含药培养液制备
在无菌操作条件下，梭据试验处理将预先制备、灭菌的改定YYPS液体培养基150mL加入300mL无菌锥形瓶中，从低浓度到高浓度顺序定量吸取药剂，分别加入工述锥形瓶中，充分摇勺，制成相应液度的含药培养液，
试验设不含药剂的处理作为窄户对照，每处理不少于4个重复。4.3孢子悬浮液准备
在无菌条件下.用直径5111的灭菌打孔器在预先PSA培养基上培养的稻曲病菌菌落边缘切取菌饼5块-~7块，接人装有1j0ml.PS培养液的300ml铺形瓶中，置于28℃恒温摇床上，150rpm条件下振荡摇培5d~7d。在无菌条件下经4层纱布过滤，用无菌水稀释制成浓度为1×10°个/ml.的孢子悬浮液。
4.4接种
分别在4.2制备的各处理含药培养液和空对照中接入500I的上述孢门感浮液，置于28℃恒温摇床上，150rpm条件下振荡培养。5调查
培养液振荡培养7d后经4层纱布过滤，留下的菌丝体在80℃-~10C℃的热力烘十箱中烘十至恒重，用分析天平测定其下物质质量，记录各处理菌丝体物质的质量。6数据统计及分析
6.1计算方法
根据调查数据，按式（1）计算菌丝生长的抑制率，单位为而分数（%），计算结果保留小数点后两位P-M=M×10C
武中：
P—菌丝生长抑制率.单位为百分率（为)：M。—空白对照处理菌丝体干物质质量.单位为毫克（mg)；M,—药剂处埋菌丝体干物质质量：单位为毫克（mg）。6.2统计分析
用数据处理系统(DPS)或统计分析系统(SAS)等标准统计软件对药剂浓度对数值与菌丝生长抑制几率值进行回归分析，计算药剂的FC、EC等值及其95%置信限，并进行差异显著性分析。7结果与报告编写
根据统计结果进行分析评价.写出正式试骑报告，并列出原始数据和应的试验图片。2
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