NY/T 2306-2013
基本信息
标准号:
NY/T 2306-2013
中文名称:花卉种苗组培快繁技术规程
标准类别:农业行业标准(NY)
标准状态:现行
出版语种:简体中文
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花卉
种苗
技术规程
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出版信息
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标准简介
NY/T 2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程
NY/T2306-2013
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标准内容
1CS 65.020.20
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2306-2013
花卉种苗组培快繁技术规程
Technical regulation for ornamental plants mass-propagation2013-05-20发布
2013-08-01实施
中华人民共和国农业部发布
2规范性引用文件
术语和定义
花卉种苗组培工」的设计要求、所需的设各.器材及战剂5
花升种苗组培快繁规模化生产流程.培养容器和接种器械的清洗
培养基的配制
消毒灭菌
外植体采集、消毒及接种·
接种操作
培养牵操作:
组培苗移裁和组培穴盘苗生产
质量标准
包装、标签和运输
附录A(资料性附录)
附录B(资料性附录)
附录C(资料性附录)
附录D(资料性附录)下载标准就来标准下载网
附录 F(资料性附录)
附录F(资料性附录)
附录G(资料性附录)
附录H(资料性附录)
组培L厂设计、所需而积及设计要求组培工厂所需上要设备及说明
组培工厂所需玻璃器耻、器材及说明植物纠培常用化学试剂、药品
花卉种苗组培快繁规模化生产流程常用基本培养基战分
MS基本培养基母液配制
常用植物生长调节剂的母液配制XY/T 2306—2013
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本标准按照GB/T1.1-2005给出的规则起草请注意本文件的某些内容能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由中华人民共和国农业部提出。本标推出表业部种植业标准化技术委员会归二本标准起草单位:湖江省农业科学院。本标准主要起草人:陈剑平徐刚,、汪一·婷、K.B.Kutiar、陈志、率豪杰、口永平1范围
花卉种苗组培快繁技术规程
NY/T2306—2013
本标准规定了花卉种苗培快繁的术语和定义,组培厂的选止和设计要求,培养采用容器、主要器材和设备的技术参数.培养基主要成分和化学试剂的质量控制.花卉纽培苗生产工艺流程.纠培苗炼苗、移裁和质量标准,以及包装,标签、运输等要求。本标准适用于花冲种苗组培产业化快繁生产、管理的全过程,2规范性引用文件
下列文件对十本文件的应用是必不可少的。凡是法日期的引用文件,仅注日期的版本适用丁本文件。几是不注口期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。CB/T18247.5主要花卉产品等级化件种苗GB50009建筑结构荷载规范
中华人民共和国国务院令第591号危险化学品安全管理条例3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3. 1
花卉ornamentalplant
切具有观赏价值的植物,包括观花、观叶、观果及整株植物造型等的植物类型,3.2
继代 subculture
将培养材料从老培养基中转接人新鲜培养基中继续培养的过程。3.3
接种inocnlation
将消毒后的外植体或干净培养材料在无菌条件下接入培养容器内培养基中的过程,3.4
茎尖培养meristem euture
以植物萃尖为外植,通过组织培养方式获完整植物的种生物技术,般用来进行脱毒种菌的生产,以获得不含检疫及影响植物正常生长的病每的植株3. 5
灭茵sterilizalion
通过物理、化学及一些理化方法杀火一切微生物(包括孢子等)的过程,3.6
琼脂苗in-agar plantlet
生长在固体培养基(凝固剂般为琼脂)中的组培生根苗。3.7
试管苗invitroplantlet
在培养容器中生长H己达移裁标准的根,茎,叶俱全的完整植株,NY/T2306—2013
外植体explant
从然生长的活体植物[获取的用下建立植物纠培快繁体系的起始材料。3.9
无琼脂苗ex-agar plantlet
从培养容器中取出并洗去表的培养基的纽培生根:3.10
消毒disinfection
通过物理.化学方法去除物体衣面大部分有害病原微生物(孢子除外)的过程。3. 11
组培工厂planf tissue culture production lahoratory利用植物组织培养技术大规模生产植物组培苗的工厂。3. 12
组培苗plantlet
利用植物组织!、器官或细胞等作为起始材料,通过植物组织培养方式生产获得的植株。3.13
组培穴盘苗plug plant
移裁倒穴盘中培育的组培苗,
4花卉种苗组培工厂的设计要求、所需的设备、器材及试剂4.1设计要求
4.1.1选址:厂址应选择在各种潜在污染源(如产生人量粉尘的工厂、采用生物工程技术生产产品、制剂的二11,繁忙交通干道和职工生活区等场所)常年主风向的上风问,且与污染源距离不小丁500m;!址边环境通风透光、空气清新、地势平整,排水良好4.1.2厂房:可采用10cm规格的双面彩钢(彩钢板1mm厚)发泡塑料夹心板构筑的轻型材料的平房或砖混多层结构:地基成高出地面30Cm1以上,!房底层地商、外部墙体和顶层须作防潮、防水,防渗,保温和隔热处理:内部须配置消毒灭菌设备.空气净化和洁净新风补偿系统,地面和多层结构的楼面均布活荷载、雪乐,风压荷裁系数馨照(B50CO9中书库建设指标,4.1.3均能区规划:组培工厂包括组培车间、行政管理区及温室三大功能区,4.1.3.1组培车间包括:洗涤牢、培养瓶晾1室、试剂室(称量宰)、培养基配制室、商压灭菌室、培养基储存室、更衣室,接种空、培养室、山苗室和贮物室等。接种操作区按100级净化标准设计;培养基储存室、接种室、培养室按10万级净化标准设计;试剂室(称量室)、培养基配制室、高压火菌室、更衣室和明苗室等按30万级净化标准设计;储物室、洗涤室、培养瓶晾于室防尘、防潮,通风良好:4.1.3.2行政管理区为组培车间管理和主要技术人员的办公场所.设办公室、小会议率和其他必要T作空间等。
4.1.3.3温家包括母本保存困、纠培前疆化区、组培苗移裁和其他铺助用房等。4.1.4布局:各功能区域应根据生产工艺流程改序,设计为连续、有序、迪畅和合理的流水线,为多层建筑时-洗涤室、培养搬晾干牵、培养基配制室、火菌室和接种室等设在一楼;培养室设在二楼及以1楼层。组培L厂为层以上的建筑时,应安装物流电梯。组培牢净道、污道分离,人,物流分开。4.1.5规模:不同生产规模组培工厂的设计控制面积参见附录^,4.2设备、器材及试剂
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4.2.1设备:包括灭菌设备、培养设备、实验设备、办公设备和消防设施等。不同规模组培T.厂所需设备及参数参见附录B。
4.2.2器材:包括盛装器血、计量器血以及其他常用消耗品等:不同规模组培工厂所需器材及规格参见附录C。
4.2.3试剂:花卉种苗组培牛产所需的无机盐类、有机物类、植物生长调节剂、消毒剂等化学品和试剂的品名和纯度等级参见附录D.
5花卉种苗组培快规模化生产流程5.1花卉种苗组培快繁规模化生产流程图花卉种苗组培快繁规模化生产流程图参见附录E。5.2母本材料保存
5.2.1从境外或国内有潜在检疫对象地区引进植物材料(无性系外植体、瓶苗等),须持有原产地有效检疫证明,并按植物检疫隔离观察要求种植在专属隔离区内观察一段时间.证明无检疫对象的引进植物可投入组培生产。
5.2.2符合5.2.1条件的活体植株.可在温室内培养或露地裁培保存.按品种特性进行肥、水.病虫害防治等管埋确保植株成活并生长健非。5.2.3以种子、球根等形式引进的新品种:按照所附的品种保藏和播种育苗技术说明处理,若无说明可低温下燥保存,待气候条件适宜邸可进行播种。珍稀植物种子或种子数掌较少时可将种子直接通过组织培养方式进行快繁,保存:
5.3外植体选择
从具有典型性状的植物品种健康植株上选择芽、茎、叶等器宫作为建立组培快繁体系的外植体。5.4外植体表面消毒
外植体表面消毒方法见9.2.
5.5初代培养
无菌条件下将经表面消毒的外植体切成适合大小(若用茎尖进行脱毒培养长度要小片0.5mm)接入经火菌处理的培养基中进行初代诱导培养。初代培养时间:般为3周~~5周。为最大限度保持母本特性·宜以直接诱导不定芽为上。5.6增殖培养
经诱导形成的不定不断转接到增殖培养基中进行培养。增殖周期根据培养植物材料生长情况而定,一般为3问~~6周。初代培养以后培养代数宜控制在12代~30代,增殖系数宜控制在2.5~-4.0。5.7壮苗培养
若在增殖培养阶段形成的不定芽个体较小,可将不定芽接种到壮苗培养基中进行培养,促进不定劳长高、长粗,培养周期·般为3周~.4周:不定芽高达 3cm~5ctm后可迹行生培养,5.8生根培养
从增殖培养或壮苗培养的不定芽中划敢生长健壮、叶色正常,叶片舒展的不定芽.接种在生根培养基中诱导生根,培养周期一般为3周-~4周。幼苗基部长出3条5条1cm~2cm长的不定根即可边行移裁。
5.9组培苗炼苗、移栽
组培苗按12.1.12.2的炼苗和移栈方法种植于温究中配有专用基质的穴盘苗床15.10穴盘苗生产管理
温室大棚中的穴盘苗的光、温、水、肥等的管理按品种要求管理。穴盘节培育名周~12周,确定成3
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活后即可分等级销售。
5.11出苗、包装、运输
符介H苗标推的琼脂凿、无琼脂苗和纽培穴盘苗按14的方法经包装后出售6培养容器和接种器械的清洗
6.1培养容器的清洗
6.1.1疫泡:新的培养容器(培养瓶、培养和试管等)百接放人洗洁精或洗衣粉溶液中浸泡,浸泡时问不应少于6h,用过将培养穿器须光清除掉瓶中的废弃物后,随没泡随洗;污染的培养容器应先按8.1.2进行灭菌,然后滑除掉瓶内污染物,随浸泡随洗。6.1.2洗涤:清洗掉经过漫泡的培养容器内外壁附着物后,再用自来水冲洗3追5遍6.1.3晾下:洗涤后的培养容器倒置于组培用托盘中沥水、晾干备用。6.1.4清洁标准:经清洗的培养容器壁不挂水珠,晾下的培养容器内外壁无明显的斑点、污迹,6.2接种器械的清洁和灭菌
6.2.1清理:清除接种器械(镊子、解剂刀柄、接种盘等)上残留的培养基和培养材料。6.2.2清洗:接种盘在洗消精溶液中浸泡数分钟,用试管刷洗刷十净后,再用清水冲洗3遍5遍;子、解剖刀柄表面用75%酒精棉(或纱布)擦拭于净。6.2.3火菌:川棉布、报纸或其他纸张包好接种器械,按8.1.2进行灭菌。7培养基的配制
7.1培养基选择
根据培养材料及培养的选择合适的基本培养基和植物生长调节剂种类及浓度配比.常见基本培养基成分参见附录F,
7.2化学试剂的选择和保存
7.2.1试剂级别可参照附录[要求,7.2.2诚剂标签完整,并在有效期内7.2.3试剂存放应按试剂说明要求,若无明确要求可参照附录D。7.2.4试剂在使前目测应无异物、异色或者吸湿结块,7.3母液的配制和保存
7.3.1为方便使,可将不同种类试剂配置成母液,7.3.2母液配制和保存应由专人负责:7.3.3呼液配制川燕馏水或去离子水。7.3.4MS基术培养基母液配制及保存方法参见附录G,其他基本培养基母液配制可参考该方法。7.3.5植物生长调节剂的母液配制及保存方法参见附录H.7.3.6母液配好后穿器上应贴好标签,注明名称,浓度、配制日期。7.3.7发现标笠不明,有沉淀、浑浊或变色现象的母液应停止使用。7.4培养基配制
7.4.1准备:根据培养基成分准备好各类容器、蒸馏水,琼脂、蔗糖(或白砂糖)和各种母液等。7.4.2加母液:按比例加人各种母液并充分搅拌均勾。母液加人顾序为大量元素、微量元素、有机成分、铁盐、植物生长调节剂及其他成分。7.4.3糖溶解:在配制溶液中(7.1.2)加入蔗糖或白砂糖(一般为30起/L.具体用量根据培养的尺标而+
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定,如生根培养和健壮培养时,糖的量可适当减少).加蒸馏水至溶液体积约为400ml(所需配制培养基体积的40%左右),搅拌,使糖充溶解。7.4.4琼脂溶化:另取容器,加人蒸馏水约500ml.(所需配制培养基体积的50%左布).再加人琼胎6g一9%·加热搅拌使琼脂溶化(如更换琼脂生产公司及批次.在培养基配制前须取少量琼脂测试合适川量)。
7.4.5定容:将7.4.3和7.4.1配制济液混合.搅拌均勾,加蒸馏水定穿至1L.7.4.6PII测定:培养基定容、充分搅拌后,用μH计或pII试纸测培养基pH,用1mo1/L的HCl或1mo1/I的Na()H调节培养基pH至要求值.一般为5.3~5.8(根据植物品种而定),7.4.7分装:根据不同需要定量分装,如250mL的培养瓶、每升分装25瓶-~30瓶。分装时培养基不得沾在培养瓶口周围。
7.4.8封!1:分装好后即盖上瓶盖,瓶盖旋紧后稍微回旋扩松瓶盖;也可用组培专用封1「膜封口,用棉线或橡皮筋扎紧瓶口,
7.4.9灭菌:培养基封口后应按照8.1.2的要求,配制当天进行灭菌。7.4.10冷却:灭菌后的培养基成应及时从火菌锅中取出.拧紧瓶盖,置F培养基储存室中白然冷却凝固。7.4.11贮行:火菌后的培养基应注明编号及配制日期,储存于培养基储藏室内。为检验灭菌效果,宜将配制好的培养基放置5d左右再用,但存储时间不应超过10d,7.4.12需添加不耐高温植物生长调节剂的培养基配制:将植物生长调节剂配制成溶液过滤灭菌.然后在超净工作台上加到经高温灭菌后温度降至55℃左右的培养基中,充分混匀、分装,封口,冷却并存储。8消毒灭菌
8.1湿热灭菌
8.1.1适合对象:培养基(不耐高温的成分除外)、蒸馏水,玻璃器血、金属器械及污染瓶的灭菌处理等,8.1.2灭菌要求:一般1.1kg-cm-2~1.2kgcm-121℃下,培养基灭菌时间为18min~20min,其余物品为30tmin,
8.1.3已火菌物品应注明灭菌日期存放丁固定位置、不得与未火菌物品混放。8.2干热灭菌
8.2.1适合对象:玻璃器血、耐热器械及金属器械8.2.2灭菌要求:将需要火菌器材在180℃烘箱中保持211。8.2.3灭菌物品存放方法同8.1.3。8.3过滤灭菌
8.3.1适合对象:一些不适合高溢灭菌植物激素(如亦霉素、卡米素、脱落酸等)和抗生素类等试剂。8.3.2过滤器及微孔滤膜(孔径为0.22μm)需完整,无菌:8.3.3将需要过滤灭菌的物质按照一定浓度配制成济液.配制方法参见附录H。8.3.4需要灭菌溶液在超净工作台上进行过滤,8.3.5盛装过滤灭菌试剂的容器需儿菌,8.3.6灭菌试剂现配现而。
8.4灼烧灭菌
8.4.1适合对象:金属接种群械。8.4.2超净工作台上酒精灯或酒精喷灯外焰灼烧器械3s~50%。8.4.3荠使用电热灭菌器代替酒精灯或酒精喷灯,则将器械插人电热灭菌器中,230℃~250%灭菌5
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I min~-l. 5 min.
8.4.4灼烧火菌店的金属接种器械冷都至室溢.待历,8.5擦拭、喷雾消毒
8.5.1适合对象:桌面、墙面、双下、植物材料表两等。8.5.2用75%酒精或0.1%新洁尔灭溶液(主要成分为茉扎溴铵)喷露或擦拭。8.6紫外线消毒
8.6.1适合对象:培养基存放室、接种室、培养室、更衣率和走道等空问消毒。8.6.2消寿时间一般为30rni,
8.6.3负责紫外消每值班人员应提前50min上班.进行10.1.1~10.1.4操作。紫外灯管理人员应戴紫外线辐射防护镜、于套和穿长袖衣;紫外灯开启后,操作人员不得长时间停留在紫外灯灭菌场所,以免过度接触紫外线伤害皮肤和眼情。8.6.4每15m配置-根30w紫外灯告。8.7熏蒸消毒
8.7.1适台对象:接种室,培养室8.7.2熏蒸时,房间门密闭,用中醛(HC)H,10ml,m-\)和高锰酸钾(KMnO.,5g·m-\)熏蒸2 rl---3 d..
8.7.3适风无味后股需4d-~5d)人员方可进人8.7.4熙蒸消每一般1次/年~2次/年。9外植体采集、消毒及接种
9.1外植体的采集时间
以活体物地上部分(茎、叫、评等)为外植体时宜在晴天个后或植物表面露水干后采集;以种了及地下部分材料为外植体时,采集时间则可不受此限制。9.2外植体消毒
9.2.1预处理:种子预先用白米水浸泡0.5h~10h,枝条除去老叶,剪取所需材料.一般带芽鉴段(cm--3cm长)叶片(适半大小)、花荟(2cm~-3cmK)球根(适当人小).根(2m~3cm长)等9.2.2清洗:预处理好的外植体,中性洗衣粉加少许吐温溶液浸泡并振荡10min~20min,然后在白来水下流水冲洗30min~~60tnin。9.2.3酒精处理:在超净台工将消洗后的外植体转移到光菌锥形瓶中倒人75%酒精使之没过外植体表面1cm左右,轻摇锥形瓶以除去植物材料表面气泡,30s-~60后将酒精倒去,用无菌水冲洗外植体3遍。
9.2.4次氯酸钠处理:用5%~10%的次氯酸钠溶液(有效氯浓度0.25%~2.0%)浸泡经酒精处理的植物材料(次氯酸钠浓度及没泡时问根据材料类型而异,浸泡时间-般为10min~30min),浸泡过程巾不断轻摇锥形瓶以除去外植体表面气泡,消寿结束后,倒附次氮酸钢济液,植物材料历无菌水清洗3逾~5遍质备用
9.2.5升求处理:经9.2.3处理的物材料可用0.1%升汞溶液代替次氯酸钠溶进行表面消毒,时间一般为5min~15min,没泡过程中不断轻梧错形瓶以除去外植体表而气泡,消毒结束后.倒山升求济液植物材料用无菌水冲洗3遍~5遍后备用。升求安全管理力法按照《危险化学品安全管理条例》,
9.3外植体接种
9.3.1在超净工作台上按10.3取出接种盘备用。9.3.2按10.4对接种器械进行火菌冷却备用.NY/T 2306—2013
9.3.3在接种盘内放置1张2张无菌滤纸。9.3.4将经过表面消毒的植物材料放在无菌滤纸L吸干表面水分。每次放置3个~-5个外植体.接种完毕后更换接种工具、接种盘及无菌滤纸。9.3.5将表面水分吸十的外植体接人培养基,1瓶接种1个外植体,9.3.6封,接种完成历统:贴上标签,注明植物品种、接种日期接种培养基等信息·放在纠培用托盘内,送人培养室进行培养。
10接种操作
10.1接种前准备
10.1.1材料和器械准备:准备75%酒精或0.1%新洁尔灭浴溶液、无菌脱脂棉或纱布、接种器械、培养基及接种用凿等。
10.1.2开机:打开超净工作台(或洁净无菌接种室)电源,开启超净工作台的风机.若使用电热灭菌器同时打开电热灭菌器电源。
10.1.3超净工作台消毒:用75%酒精或0.1%新活尔灭仔细擦超净工作台内壁一遍。10.1.4紫外消毒:打开超净工作台、接种室、更衣室及缓冲室的紫外灯30min;紫外灯关闭2Cmin后方可进入室内。
10.1.5接种人员:接种人员洗净双手,在更衣室更换接种服,戴上帽和口罩,并换穿拖鞋等,经风淋除尘后方可进人接种室。上超净工台后用75%的酒精擦拭超净工作台台面,手部(包括手腕)用75%的酒精存细擦拭一遍、然后在超净工作台内吹干双于。10.2母瓶的提取和处理
10.2.1检查:提取母施时要行细检查.若发现污染母瓶应立即割除。10.2.2预处理:用75%酒精棉球(或纱布)擦母瓶表面.放于超净工作台旁备用。接种过程中光发现母瓶污染则文即封口。
10.2.3污染母瓶处理:污染母瓶放统-地点-按6.1集中处理,10.3接种盘的取放
从棉布包里取出接种盘,盘口朝下放在超净工作台_F注意手不能接触接种盘的边缘。盘口与超净工作台桌面接触的接种盘不能用,10.4接种器械灭菌
10.4.1当班接种操作工下班前,将接种器械洗净后用棉布、旧报纸或其他纸张包好,交给灭菌操作员按8.1.2逆行灭菌处理,或在超净上作台上,先用75%酒精擦,用按照8.4.2或8.4.3方法处理。10.4.2为充分利用冷却等待的时间,·个超净台一般同时配备3套接种器械-交替灼烧灭菌.冷却和接种。
10.5接种
10.5.1取苗:打开母瓶瓶盖,瓶口斜向超净工作台内壁,取出的苗放于无菌接种盘内;-次取苗不宜太多,以免风干。
10.5.2切苗:无菌接种盘放置在超净T作台内离台面边缘10cm-~20cm;操作过程中,手术刀和锻子应在接种盘后斜上方操作:切苗过程中产生的废弃物可放置在接种盘内的一侧.不能散落盘外,10.5.3接苗:打开培养瓶盖,瓶盖或封口膜潮下放置在无菌接种盘内,放置瓶盖或封口膜的接种盘一般接种3瓶~5瓶后需要更换接苗时设子不能碰到培养瓶瓶口或外壁。10.5.4一瓶内接种数量因培养容器和材料而异。一般250mL培养瓶增殖培养接种5株/瓶或5团/NY/T 2306—2013
瓶,作根培养一般接种10株/瓶左右。10.5.5组培苗在瓶内要排放均匀、整齐;接种深度以组培苗不倒为宜;组培苗基部不得与瓶底接触。10.6封口
一瓶接种完战后及时盖紧瓶盖或用组培用封膜封口并扎紧。10.7记录
接种人员将植物品种代号、培养基代号、个人工号及接种日期等信息标示到培养瓶七;逐口记录本人的接种数量,包括母瓶数和接种瓶数。10.8新接种苗返回培养间
接种完、把当天新接种瓶出放在组培专用托盘内,送回培养室培养.整齐摆放在指定的组培架上。10.9关机
每下1.时,光熄火酒精灯或关闭电热火菌器电源;收拾于净超净上作台面,并用75%酒精擦拭台面·台面上物品摆放整齐;最后关闭超净工作台电源,10.10接种人员的注意事项
10.10.1接种人员应注意个人1生,勤剪指甲。10.10.2接种时.接种人员的头、路膊时以上肢体.不得探人超净工作台内:带好罩,不允诈攀谈与工作无关话语。
10.10.3人员出入接神牢应随于关门,10.10.4接种过程中所生的废弃物按接种台为单元,下班前各白负责清理,送出接种问.交用专人统一处理。
10.11接种操作的安全管理
10.11.1接种器械茫采用酒精灯灼烧的方法进行炎菌,在购烧时应远离盛酒精的容器.严禁器械灼烧后之邸插人盛酒精的容器中,还应避免碰倒盛有酒精的容器或酒精灯引起失火。10.11.2接种人员于上酒精木干不得点燃酒精灯或靠近点燃的酒精灯。10.11.3在酒精灯点燃后,不可用润精辫液喷酒超净T作台。10.11.4一且发生火警.应立刻关闭电源,用湿布扑火,若火势较人,用灭火器扑灭。11培养室操作
11.1培养室环境控制
培养室的温度般控制在(25二5),同,培养层内底部光照强度2Ctmul·m-\,s=~100umal·m-\-\,光照时问每天10h-~16h具体因品种利培养阶段不同异),符人早!中个、下午各检售一次培养室照明、温度情况并做好记录。11.2瓶苗摆放
瓶苗应摆放整齐.品种应分明,
11.3污染检查
11.3.1培养材料污染由专人检查.并做好记录。11.3.2污染材料瓶不得在培养间及走道内开启污染瓶盖。清理出培养间后即送到洗涤问,按6.1处理,并对处理情况价记录。
11.3.3各段工序的污染率不得超过5%;若超过3%,应及时分析原因,及时反馈给操作人员及管理人员,采取相应的污染率控制措施。11.4培养室工作人员注意事项
11.4.1进人培养室应换鞋、穿工作服。8
11.4.2保持安静、整活。
11.4.3逊出培养室应及时关门。11.4.4各种用品按固定的位置摆放整齐。11.4.5及时消理工作过程中产生的垃圾。NY/T2306—2013
11.4.6培养室内出苗、进苗后应及时整理.保持空内清洁,每天川净水清洁地面1次~2次。11.4.7壁挂式空调、立式空调和中央空调的出风每年至少要进行次消毒和灭菌处理;整体净化组培案每半年更换高效过滤装置,清洁通风管道。11.4.8定期检查各种生产设备使用状况.发现异常应及时告知设备保障部门进行处理。11.5培养室消毒
11.5.1摆放材料时用75%酒精或0.1%新洁尔火溶液擦拭放置的培养架。11.5.2每周爪75%酒精作喷雾降尘处理。11.5.3每周用消毒液(0.1%新洁尔灭溶液)抹地面、门衡等。11.5.4每两固用紫外灯或臭氧发生器消毒30min。11.5.5配备有过滤装置送排风系统的培养室川用甲醛一高锰酸钾每年熏蒸1次~2次。11.5.6定期检查培养室内漏雨及墙壁长霉情况,发现有霉菌时应及时去除,并历防菌涂料粉刷墙壁。11.5.7按11.5.1、11.5.2、11.5.3、11.5.4方法处理时培养室内可以保留培养材料:按11.5.5、11.5.6方法处理附培养室内应光清空培养材料,然后处理。12组培苗移栽和组培穴盘黄生产12.1炼苗
12.1.1移裁标准:在培养容器中生长的根,茎、叶俱全的完整植株,基部长出3条~5条1cm~2cm长的不定根时,即可进行炼苗。
12.1.2将培养瓶放置在有散射光(60μlnalm2·1~100μmol·m-,s-1)的温室中.湿度控制在(25+5)℃,封几培养 3 d-~7 d。12.2移栽
12.2.1基质选择:在保证组培穴盘苗正常生长的前提下,可因地制宜选择基质种类及配比:-般以泥碳土、珍珠岩,蛭石混合物作为基质较常用。12.2.2基质准备:将泥碳土、珍珠岩、蛭按一定比例混配女好(般比例为3:1:1),装入穴盘中并稍压紧,用0.5%/1.的多菌灵(80%可湿性粉剂)溶液浸透后捞出或喷透备用。12.2.3洗苗:轻轻取出组培苗,放入清水中(水温谢整为18℃-~20℃),轻轻漂洗1净组培苗表面培养基后分级。
12.2.4移裁:将洗净的组培苗裁十先装好基质的穴盘中,覆盖物或基质以刚盖过组培苗基部为立,稍压,以幼苗不倒即可。
12.2.5摆放:穴盘苗分品种、移裁日期:在苗床上齐摆放,12.3管理
12.3.1温度:苗期温室温度般控制在15℃-~30℃,其体根据植物生长习性而定,热带植物苗期需要温度较高;温,寒带植物芯期需要温度较低,12.3.2相对湿度:移我2周~-4周内用薄膜小拱棚喷雾保湿.机对湿度控制在75%~-90%,大棚机对湿度高十80%时,薄膜小拱榭可适时通风:当第-片新叶完全张开后、逐打开薄膜小拱棚以降低湿度,1周~-6周后完个打开薄膜小拱柳,人栅机对湿度保持在60%~85%。9
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