NY/T 2313-2013
基本信息
标准号:
NY/T 2313-2013
中文名称:甘蓝抗枯萎病鉴定技术规程
标准类别:农业行业标准(NY)
标准状态:现行
出版语种:简体中文
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相关标签:
甘蓝
枯萎病
鉴定
技术规程
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出版信息
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标准简介
NY/T 2313-2013 甘蓝抗枯萎病鉴定技术规程
NY/T2313-2013
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标准内容
ICS 65.020
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2313--2013
甘蓝抗枯萎病鉴定技术规程
Rule for evaluation of cabbage resistance to fusarium wilt2013-05-20发布
2013-08-01实施
中华人民共和国农业部
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准农业部种植业管理司提出。本标推全国蔬菜标准化技术委员会(SAC/TC467)归I1本标准起草单位:中国农业科学院蔬菜花卉研究所。NY/T2313—2013
本标准土要起草人:杨宁红、谢内炎、冯兰杏、杨翠荣、龚慧芝、苑振川、陈国华、凌键。I
1范围
甘蓝抗枯萎病鉴定技术规程
本标准规定甘蓝抗粘菱病鉴定方法和评价法。本标准适而于甘蓝(BrassicaoleraceaI.)抗枯萎病的室内鉴定及抗性评价2规范性引用文件
NY/T 2313--2013
下列文件对丁本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注且期的版本适用于本文件。凡是不注期的引用文件.其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。VY/T1857.3黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程3术语和定义
VY/T1857.3界定的以及下列术语和定义适用「本文件,3.1
甘蓝枯萎病cabhage lusarium wilt出尖孢镰刃菌黏团专化型「Fusarizn rox:yspurunSchl.f.sp.congtutinan(Wohenw.)Snyder&IIansrn所引起的植株一侧或整个下部片黄化,叶柄和茎部的维管组织变揭,植株小而萎蕉,病抹逐渐死亡等症状为主的甘监土传病害。4试剂与耗材
4.1PL培养液
马铃薯去皮切片,称取200g加1000ml.蒸馏水,煮沸10min~~20min,月纱布过滤,补加蒸馏水至1000mI,加乳糖20,溶化后于121℃高压灭菌30min.4.2PDA培养基
马铃薯去皮切片,称取200g-加1000ml.蒸馏水,煮沸10min-~20min,用纱布过滤,补加蒸馏水至1000mL,加20g琼脂粉、加热溶化后,再加人葡萄精20g,搅拌均勾并溶化后,于121℃高压灭菌30min
4.31%的次氯酸钠(NaCIO)溶液
取1nl.次氯酸钠于99mL灭菌水中,摇匀。4.4耗材
培养皿、锥形瓶,纱布、酒精灯,育苗钵、育苗盘等。5仪器设备
恒温摇床、恒温培养箱、冰箱、火菌锅、超净工作台、显微镜、移液器、血球计数板。6枯萎病菌接种体制备
6.1病原物分离
从甘蓝枯萎病发病植株叶柄、茎基部用常规组织分离法分离枯蒸病病原物。分离物鉴定参觅附录A。确认为尖孢镰力菌黏团专化型(Fusariunrarysporumf.sp.conglutinans)后,采用单孢分离法进行NY/T 2313--2013
分离物纯化,经科赫(koch)法则验证后,保存备用6.2生理小种鉴定
对用汀抗病性鉴定接种的病原分离物进行牛理小种的鉴定,鉴定方法参见26.3接种体繁殖和保存
6.3.1接种体的繁殖
使用国内优势小种小种1作为接种病原物。繁殖方法为:将保存的甘蓝枯萎病菌置于25℃TDA半板培养基七培养3d活化后,接种于盛有PL培养液的锥形瓶中,置于25℃~28℃摇床上,以120rpm振荡培养3d~~1d。增养液经两层医用纱布过滤即得以小型孢子为主的孢子悬浮液,然后用蒸馏水稀释滤液至所需接种浓度,
6.3.2病原物保存
常用保存方法为将甘蓝枯萎病菌接种于PT)A斜面培养基上,在25℃的恒温箱中培养7d,置1℃~8℃冰箱内保存;或在斜面十加-层灭菌矿物油(超过斜面顶部1cm)后置冰箱冷藏室或室温下保存。将书蓝帖萎病菌接种于含20%丙三醇的液体中,置80℃冰箱中冷冻保存。7室内抗性鉴定
7.1鉴定室
人工接种鉴定空应具备人工调节温度、湿度及光照的条件,使人工接种后具备良好的发病环境7.2鉴定设计
鉴定材料随机排列或顺序排列,每份鉴定材料重复3次,符·重复1C株苗。7.3鉴定对照材料
设甘蓝品种“诊奇”为抗病对照品种,“北农卓生”为感病对照品种。7.4鉴定材料育苗
鉴定种子在1%的次氯酸钠溶液中浸种5min~~lonlill.清水冲洗后置于25℃的恒温培养箱中催芽,种了萌发后播种千育苗盘内。育苗基质为炭、蛭石和菜田-(2:1:1)经高滥蒸汽灭菌(134,30min)。在日光温室毕育出,室内漏度自天为20℃-25℃,夜晚为18~20(,所有幼节应生长健壮、-致。
7.5接种
7.5.1接种时期
甘蓝生育期2期~3叶期。
7.5.2接种浓度
接种体悬浮液的浓度为1×105孢于/ml.。7.5.3接种方法
接种采用浸根接种法。将幼苗连根轻轻拔起后抖落下浮根部泥土,然后将根全部浸丁接种悬浮液内10min~15min,将接种后的监苗定植于装有育苗基质的育苗体中,每钵1株。7.6接种后管理
接种后将植株置于鉴定室内:每天光照14h,强为70uFm“s,保持植株正常生长的上壤混度接种期间鉴定空温度控制在26℃~29%范围内。8病情调查
8.1调查时间
接种后10d~13d调查病情,根据此期间感病的对照品种病级扩展到感病病级的时间作适当调整。2
8.2病情级别划分
幼苗病情级别及其相对应的症状描述见表1、图1。表1甘蓝抗枯萎病室内鉴定病情级别的划分病情级别
8.3调查方法
症状描述
无症状
1片叶叶脉轻微变黄
2片叶叶脉轻至中度变黄
NY/T2313—2013
除心叶外,其余叶中度变黄或萎全部叶片重度变黄或菱為
植株完全菱燕并死亡
图1甘蓝苗期枯萎病病情相应级别调查每份鉴定材料接种株发病情况,根据病害症状描述,逐份材料进行调查,记载单株病情级别,并计算每份鉴定材料的病情指数(DI)。病情指数(DI)按式(1)计算。
式中:
各病情级别的代表数值;
各病情级别的植株数;
调查总植株数:
最高病情级别的代表数值。
计算结果取3次重复平均值。
抗病性评价
9.1抗病性评价标准
NY/T2313—2013
依据鉴定材料的病情指数(DI)平均值确定其抗性水平.划分标准见表2。表2甘蓝对枯萎病抗性的评价标准摘情指数(DI)
50D270
9.2鉴定有效性判别
抗性评价
免(I)
高杭(HR)
抗病(R)此内容来自标准下载网
中批(MR)
感病(S)
高感(IIS)
当感病对照材料达倒其机应感病程度(D1→50),抗病对材料与实际抗性程度相符.该批次抗枯萎病鉴定视为有效。
鉴定材料处理
鉴定完毕后将甘蓝发病植株、残体集中焚烧或深翊处理,接种土壤高温灭菌,11
鉴定记载
甘抗枯萎病鉴定结果记载表格参儿附录C.A1学名
附录A
(资料性附录)
甘蓝枯萎病病原菌
NY/T2313—2013
尖孢镰刀菌黏团专化型[FusuriunorysporumSchl.f.sp.conglutinans(Wollenw.)Snyder&Hansen,属半知菌亚门瘤座菌目镰刀菌属真菌。A.2形态描述
病原菌在PDA培养基上,菌落正面呈白色,圆形,菌丝生长茂盛,较紧凌:菌落背面略呈浅黄色。菌丝丝状,无色,有隔。在人工培养基和自然条件下能产生小型分生孢子、大型分生孢子和厚垣孢子3种类型的孢子。小型分生孢子多数单胞,无色,个别具1隔膜,长椭圆至短杆状,直或略弯,大小为(6m18mm)×(2.8um~4.5m),多数为10um×3m:双胞的孢子长约18μm,下部的细胞较宽,顶端渐尖;大型分生孢子圆筒形至镰刀形,两端尖,基部具小突起,多具2个~3个隔膜,大小(25m~33m)×(3.5um~5.5m);厚垣孢子顶生或间生,表面不光滑,球状至长椭圆状,直径多数为15um,少数达18μm(图A.1、图A.2)。注:左为菌落正面、右为菌落背面图A.1甘蓝枯萎病菌培养性状
注:引自Annalsof theMissouri Botanical Garden,1990图A.2甘蓝枯菱病菌分生孢子(左)、厚垣孢子(右)NY/T2313—2013
B. 1采用的鉴别寄主
附录B
(规范性附录】
甘蓝枯菱病菌生理小种
鉴别寄主为3个甘蓝材料:GoldenAcrc(84)、WisconsinGoldenAere、BI-16。2生理小种鉴定
见表B.1.
表 B. 1 甘蓝枯萎病菌生理小种鉴定鉴别寄主
iokdeu Acrec84)
Wimonsiun CGolden Acre
生小种
注 1:S.感病型,R:抗病型。
注2:1理小种鉴定参考文献:BoslandlP.W.&P.H.William。1987.AnevalurationofFusnritm farysporunefTumcrucifers hased on pathogenicity. isozyme polymnorphisn, vegetative rormimlihility, and geugraphice origin. Cal.J. Potany 65: 2 067 - 2 073.鉴定结果记载见表(.1。
品种/种质
挪种口期
接钟:育期
生小种类型
附录C
(资料性附录)
鉴定结果原始记录表
甘蓝抗枯萎病鉴定结果记载表
复区号
接种片期
病情级别
接种病原菌分离物编号
一炭传日期
病情格数
NY/T 2313--2013
平均病指
鉴延技术负责人(签字):
抗性评价
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