NY/T 2387-2013
基本信息
标准号： NY/T 2387-2013
中文名称：农作物优异种质资源评价规范 西瓜
标准类别：农业行业标准(NY)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准简介
NY/T 2387-2013 农作物优异种质资源评价规范 西瓜
NY/T2387-2013
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标准内容
ICS65.0201.20
中华人民共和国农业行业标准
NY/T2387—2013
农作物优异种质资源评价规范
Evaluating standards for elite aud rare germplasm resources--Watermelon
[Citrullus lanatus (Thunb.) Matsun & Nakai]2013-09--10发布
2014-01-01实施
中华人民共和国农业部
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准出农业部种植业管理司提出。本标难出全国蔬菜标准化技术委员会（SAC/TC467)归口。NY/T2387-2013
本标准起草单位：中国农业科学院郑州果树研究所、农业部果品及苗木质量监督检验测试中心（郑州)、新疆维吾尔白治区葡萄瓜果开发研究中心。本标准主要起草人：徐永阳、马双武、徐志红、土吉明、谢汉忠、廖新福、赵光伟、邢兼、尚建立.。1范围
农作物优异种质资源评价规范
NY/T2387—2013
本标:准规定了西瓜属西瓜种[Cirullus laruius（Thunb.）Malsum&Nakail优异种质资源评价的术语定义技术要求、鉴定方法和判定。本标准适用于西瓜优异种质资源评价。2术语和定义
下列术语和定义适用丁本文件。2.1
优良肿质资源clite germplasm resources主要农艺性状泰现好且具有重要价值的种质资源，2.2
特异冲质资源 rare germplasm resources性状：表现特殊，稀有的种质资源。2.3
优异种质资源eliteand raregermplasm resources优良冲质资源和特异种质资源的总称。3技术要：求
3.1样本：采集
应选：泽30株正常生长的植株进行采样(特别说明的除外)。3.2监定数据
每个性状至少应在同-~生态区域进行3年的重复鉴定。性状观测值取其3年平均值进行判定3.3指标：
3.3.1优良种质资源指标
优良种质资源指标见表1。
表1优良种质资源指标
雕花问隔节位
坐果指数
裂果率
单瓜质量
果实大小整齐度
果实成熟一致性
果皮厚度
朵实中心可溶性固形物含品
少(G6.0)（蜜宝）
高（G1.0)（蜜气）
低（G5.0%）（蜜宝）
小果型四瓜1.6kg(金兰选）
般西瓜≥8.0kg（西农八号）
赣齐(蜜宝)
一致(蜜宝）
小果型两瓜≤0.5m(金兰选）
-般西瓶≤0.8cm(京欣一号)
小果型西瓜≥11.5%(金兰选）
般西底210.5%（京欣一号）
NY/T2387—2013
果肉劑面
果岗纤维
枯萎病抗性
病毒病抗性
细菌性,果斑病抗性
南方根结线虫抗性
表1（续）
色均句（京欣一）
少(都-·)
中抗及以上(R50%)
中抗及以上(RI≤2.0)
中抗及以上(R12.0)
小抗及以上（R12.0）
注：指标中提供的参照种质是为了方便标准使用，不代表对该种质的认可和推荐，任何可以得到与参照种质相同结果的种质均可作为参照样品
3.3.2特异种质资源指标
特异种质资源指标见表2
表2特异种质资源指标
了叶颜色稳定性
莞上些毛
叶片颜色
叶片斑点
叶片缺刻类型
蔓自封项
無花育性
果皮底色
果皮凝纹形状
果肉颜色
果闵质地
种子干粒重
粘萎病抗性
蜗毒蜗抗性
红菌性果斑病抗性
南方根结线虫抗件
种质染色体倍性
后绿（96B9h)
无（欧根选）
黄(黄苗西瓜)
黄绿（克伦生）
有(Moon st.ar）
无（板叶号）
有(无权早)
丛生（本知革）
雄性不育(AB不育系)
靡花两性花同株（苏联一号)
全雌株（姜向游伞系）
羲黄(黄皮小西斑）
深黄（金瓜）
绿白白)
放射条（印尼西）
斑点(Moan star)
白(三凹)
浅黄（黄旭都）
黄(黄小玉)
橘黄(金兰选)
软（早花）
硬（然美人）
小（oao sed)
大（泉兰籽瓜）
高抗及以上（R20%）
执及以上(RI1.0)
抗及以上(R≤1.0)
抗及以上(R1.0)
四倍体(蜜枚)
注：指标中提供的参照种质是为了方便标准使用，不代表对该种质的认可和推样，在何可以得到与参照种质相同结果的种质均可筛为参照样品。
4鉴定方法
4.1子叶额色稳定性
子叶期观察幼凿子叶颜色变化，分为稳定、后缘、老黄。4.2蔓上茸毛
NY/T 2387--2013
仲签明调查植株蔓上有无岸毛分布或其毛质地的差异情况，分为无，软、硬3种情况，4.3叶片颜色
仲蔓期随机调查成熟叶片颜色，根据叶片不同类型颜色分为黄、黄绿、浅绿、绿、深绿。4.4叶片斑点
植株我熟叶片上的斑点，分为有和无。4.5叶片-缺刻类型
植株生长期调查成熟叶片土脉两侧对称羽状缺刻发生状况，分为无、1对、2对3对、4对。无
4.6蔓自封顶
图1叶片缺刻类型
植株生长期调查瓜蔓端白封顶，分为有和无。4.7株型
坐果期调查，根据瓜蔓长短及节间密度，可分为从生、紧漆、蔬散3种株型。4.8雄花育性
雄花开放期调查雄花发育状况·根括雄花育性分为正常、雄性不育。4.9性型
雌花开放期调查花内雄蕊发状况，分为雌雄异花同株，雄花两性花同株、全雌株，4.10雕花间隔节位(G,）
开花垒果期统计第1.第2、第3雌花之间机距的节数，计算平均数即为雌花间隔节位，精确到0.1。4.11坐果指数(Gs)
坐果期调查坐果数，计算单株平均数即为坐果指数，精确到0.1，4.12裂果率(Gc）
果实成熟采摘前，单位面积内发生出间裂果的数最与总果数的比率，以百分数表示。4.13单质量
果实成熟期称取果实质量数，单位为千克(kg),精确到0.01kg，计算果实平均质量。4.14果实大小整齐度
选择：0株正常结果的植株.果实成熟期称取每个果实质量数，单位为千克（kg），精确到0.01kg，按式（1)计算果实大小变异系数（CV)，变异系数越小表示果实大小整齐度越高，果实人小变异系数小于或等于参照品种判定为整齐。
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果实大小变异系数；
单果架实质量，单位为干克(ka)；n 二：果实数量.
4.15果实成熟一致性
果实成熟期调合果实成热一致性，分为一致（果实全部成熟）和不：-致（10%以上的果实术成熟或过熟）。4.16果皮底色
果实成熟期调查果实底色，分为没黄、黄.深黄、绿白、浅绿、黄绿、绿、深绿、缘。4. 17果皮覆纹形状
果实成热期调果实表面覆纹形状，分为网条，齿条、条带、放射条、斑点。网茶
4.18果皮厚度
改射茶
图 2 果皮覆纹形状
果实成熟期谢查，纵剂果实，测量果实阳面和阴面果皮平均厚度，以厘米表示(crm），精确到0.1cm1。4.19果实中心可溶性固形物含量将果实心部位的果肉汁液滴手持糖计，记录度数，以分数表示（%），精确到0.1%。4.20果肉剖面
果实成熟期纵切果实后调查果肉的外观状况，分为瓣色均勺瓣色不均句，裂缝、空心、黄筋、纤维块等
4.21果肉颜色
果实成熟期调杏查果实果肉颜色，分为白、浅、黄、橘黄、粉红、红、大红，4.22果肉纤维
果实成熟期调查，根璐内果肉清泽残留的感官评价，分为少、、多。4.23果肉质地
果实成熟期调查果肉感的综合评价.分为软、沙、脆、硬。4.24种子干粒重
随机选择100粒发育正常种子（种子含水量8关）称重，统计种子下粒重，单位为究（g）精确到0.1g，下粒重10g的为小,干粒重200 的为大,4.25枯萎病抗性
参见附录A。
4. 26病毒病抗性
参见附录B。
组菌性果斑病抗性
参见附录C。
4.28南方根结线虫抗性
参见附录 D。
9和质染色体倍性
参贞附录E，确定种质染色体组数量倍性)，可分为二倍休、三倍休体、四倍休。5判定
5.1优良种质资源判定
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以公布频率最高的指标判定种质资源性状，符合表1中果实人小整齐度，果实成熟一致性、果实巾心可溶性固形物含量、坐果指数和其他任意1项以上（含1项)指标的种质资源为优良种质资源。5.2
特：异种质资源判定
以公布频率最高的指标判定种质资源性状，符合表2中任何1项以上(含1项)指标的种质资源为特异种底资源。
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A.1适用范国
附录A
[资料性附录]
枯萎病抗性鉴定
本附录适用十枯萎病LFusariumorysporumfsp.niveum（FF.Smith）SnyderctHansen抗性鉴定。A.2鉴定方法
苗期人工接种鉴定。
A.3仪器设备
A.3.1显微镜。
A.3.2血球计数板。
A.3.3生化培养箱。
A.3.4普通冰箱。
A.4病原采集
在枯萎病重病区采集发病植株，用组织分离法分离病菌，马伶薯葡菊糖琼脂培养基(PDA)培养和繁，经致病性验证后，冰箱低温保存。A.5接种程序
A.5.1供试材料幼苗的准备
经粒选的种子用0.1%升汞消毒10min，用清水冲洗干净，浸种2h~3h即可捞起，用纱布包好放在30℃～32℃的恒温箱内催芽，大约36h后肝根长到2mm~~3Imm时，播种在盛有经消毒的珍珠岩育苗盘内，放在28左石的溢室内生长。A.5.2接种体的准备
为了克服因多次转而使分离物致病减退的现象，贮藏在试管内的菌株必须经过活化和复壮.通过重新接在夺十1再分离病源，或者直接取白发病植株根部维管束的样品，经单抱分离增养得到病源，将病源接种装有马铃薯蔗糖的液体培养基的三角瓶中，放置在25℃-～28℃条件下，并保持110次/min~120次/mit的恒温振满培养7d~10d后.将培养菌液通过4层～8层消年纱布过滤，滤去的丝，把滤液放在3(000r/nin的瓶内离心10min后，将离心瓶上面清液倒掉，再用消每蒸馏水将沉淀瓶底的孢子冲洗至烧杯内并稀释，在显微镜下用而球计数板统计菌液中的孢丁数.加火菌蒸馅水配制成1x1or/m.的接种袍子液浓度。A.5.3接种时期
幼苗真叫露心期。
A.5.4接种方法
接种前将行苗岛放在水中浸范儿分钟，以避免幼苗掘出时断根。接种时先将根部用水轻轻冲洗十净，用吸水纸吸去水分，放人配好的菌液中浸泡上)min后，再将苗移裁到有珍殊出的塑料钵中。
A.5.5接种后管理
接种及对照同放在20℃～28℃的温案内培养，接种后2d内，可酌情遮阴A.6病情调查
NY/T2387—2013
浸根接种后10d左右开始显示枯萎病症状，14d开始记载枯萎病和剖观察维管束褐变情况，每随2d观案记载枯萎株数，按武(A.1)计算出枯萎发病率(R)。接种后35d试验结束。R = (n/N) X 100
........
我中：
R一-枯萎发病率,单位为百分率(%);n--发生枯萎病株数；
N-—-接种株数。
A.7评价标准
根据沾萎发病率的高低作为抗性评价标准。高抗1.HR):萎发病率为0%～20%;中抗:MR)：枯萎发病率为21%~~50%；轻抗(R)：枯萎发病率为51%～80%；感病(S)：枯萎发病率为81%～100%。A.1)
..+++....+++....+
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B.1适用范围
附泉B
(资料性附录】
病毒病抗性鉴定
本附录适用于由小西胡芦黄花叶病毒（ZYMV）、瓜花叶病毒（WMV）、黄瓜花叶病毒（CMV）、番和瓜环斑病毒一西瓜株系(PRSV-W)和南瓜花叶病毒（SgMV)慢染引起的病害抗性鉴定B.2病原分离
从发病植株的典型病叶上以常规汀液摩擦法分离黄瓜花叶病毒病病原物。分离物经血清学、寄主范围、枯斑寄主、理化性状及传播方式测定，电子显微镜观察病毒粒子形态等方达鉴定，确认病毒种炎届，再进行分离物纯化和致病性测定，保存备用。B.3接种体繁殖和保存
B.3.1接种体繁殖
取少鼠保存的病毒供试株察的鲜病叶摩擦接种在西葫芦Ⅲ片上，置防虫温室内，在26℃28℃条件下培育7d~10d后采集病叶，1g鲜病叶加30ml.的0.03nol/L磷骏盐缓冲液（pI18.0)勺浆，纱布过滤或3000r/min离心15min，取滤液或上清液为接种悬浮液。B.3.2接种体保存
接种体可常年保存在防虫温室内的听葫芦上，或将鲜病叶制作成冻十叶保存在一20℃以下的冰箱内。B.4鉴定程序
B.4.1供试材料幼苗的准备
经粒选的种子用0.1%开汞消毒1Cmin.用清水冲洗十净，浸种2~~3h即可捞起，用纱布包好放在30℃~32℃的恒温箱内催穿，胚根长到2mm~3mm时，播种在盛有经消毒的诊珠岩育苗盘内，放在28℃左右的温室内生长。
B.4.2接种方法
当幼苗片叶时进行接种。在叶片上方轻轻弹撒金刚砂·使之覆盖-薄层，数上一次性于袭蘸取病琦液进行糜擦接种，
B.5病情调查
接种--周后开始观察症状表现，接种后35记载发病情况，进行病情分级。病情分级标准为：
1级叶片无低何症状；
1级：叶片褪绿斑或明脉；
2级：轻度花叶，无蕨叶1
3级严年花叶无蕨叶：
4级：严重花叶，轻微蕨川：
5级：严秉花叶和蕨叶,叶片严亚畸形。8
按对:(B.1)计算出平均病情级数(RI)。式中：
RI-—平-均病情级数；
r：-—病害级别;
-相应病害级别的株数；
i：—病害分级的各个级别；
调查总株数。
B.6评济标准
以平均病情级数作为抗性评价标准：高抗(HR):平均病情级数为 0~1. 0;抗(R):平均病情级数为1.1~2.0;中抗（MR)：平均病情级数为2.1~3.0；感(S):平均病情级数为3.1~4.0
高感(HS);平均病情级数为 1. 1~～5.0。R
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NY/T 2387—2013
C.1适用范围
附录C
(资料性附录）
细菌性果斑病抗性鉴定
本附录适用细菌性果斑病（Aridorra.r:ritrutliWillemsetil抗性鉴定C.2鉴定方法
苗期人工接种鉴定。
C.3仪器设备
C.3.1显微镜。
C.3.2血球计数板。
C.3.3生化培养箱
C.3.4普通冰箱。
C.4病原菌的分离和纯化
C.4.1培养基的制备
C.4.1.1KB固体培养基的制备
丙三醇
胰蛋白陈
水至1 000 ml,调pl[为7. 0,121℃灭菌20min。KB液作培养基除不含琼脂外，成分与固体培养基和同：C.4.1.2YTC固体培养基的制备
酵性提取物
葡萄糖
碳酸钙粉末
C.4.2病原采集与分离
（1）创先把熔化好的YTD:培养基倒在培养I中，凝成平板后，翻转放置至表而无冷凝水后使用。（2)以感病植株为材料.用灭菌刀切划取病组织，5头次氯酸钠消毒3rin，再无菌水冲洗3次后，放在盛有无菌水的灭菌培养Ⅲ中，用灭菌玻棒研卒，并让组织碎块在水中双泡10min1，使细菌释放到灭菌水中。3)而灭菊的接种坏取组织没泡液在十燥的培养基平板表断划线分离。(4)翻转培养Ⅲl,放在28%恒温箱中培养21h~18h后,再逊行划线纯化。（5)挑取病原菌的单菌落，经培养后出现的菌落在形态特征方面都趋于致，并与典型描述的特征10
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中华人民共和国农业行业标准
NY/T2387—2013
农作物优异种质资源评价规范
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[Citrullus lanatus (Thunb.) Matsun & Nakai]2013-09--10发布
2014-01-01实施
中华人民共和国农业部
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准出农业部种植业管理司提出。本标难出全国蔬菜标准化技术委员会（SAC/TC467)归口。NY/T2387-2013
本标准起草单位：中国农业科学院郑州果树研究所、农业部果品及苗木质量监督检验测试中心（郑州)、新疆维吾尔白治区葡萄瓜果开发研究中心。本标准主要起草人：徐永阳、马双武、徐志红、土吉明、谢汉忠、廖新福、赵光伟、邢兼、尚建立.。1范围
农作物优异种质资源评价规范
NY/T2387—2013
本标:准规定了西瓜属西瓜种[Cirullus laruius（Thunb.）Malsum&Nakail优异种质资源评价的术语定义技术要求、鉴定方法和判定。本标准适用于西瓜优异种质资源评价。2术语和定义
下列术语和定义适用丁本文件。2.1
优良肿质资源clite germplasm resources主要农艺性状泰现好且具有重要价值的种质资源，2.2
特异冲质资源 rare germplasm resources性状：表现特殊，稀有的种质资源。2.3
优异种质资源eliteand raregermplasm resources优良冲质资源和特异种质资源的总称。3技术要：求
3.1样本：采集
应选：泽30株正常生长的植株进行采样(特别说明的除外)。3.2监定数据
每个性状至少应在同-~生态区域进行3年的重复鉴定。性状观测值取其3年平均值进行判定3.3指标：
3.3.1优良种质资源指标
优良种质资源指标见表1。
表1优良种质资源指标
雕花问隔节位
坐果指数
裂果率
单瓜质量
果实大小整齐度
果实成熟一致性
果皮厚度
朵实中心可溶性固形物含品
少(G6.0)（蜜宝）
高（G1.0)（蜜气）
低（G5.0%）（蜜宝）
小果型四瓜1.6kg(金兰选）
般西瓜≥8.0kg（西农八号）
赣齐(蜜宝)
一致(蜜宝）
小果型两瓜≤0.5m(金兰选）
-般西瓶≤0.8cm(京欣一号)
小果型西瓜≥11.5%(金兰选）
般西底210.5%（京欣一号）
NY/T2387—2013
果肉劑面
果岗纤维
枯萎病抗性
病毒病抗性
细菌性,果斑病抗性
南方根结线虫抗性
表1（续）
色均句（京欣一）
少(都-·)
中抗及以上(R50%)
中抗及以上(RI≤2.0)
中抗及以上(R12.0)
小抗及以上（R12.0）
注：指标中提供的参照种质是为了方便标准使用，不代表对该种质的认可和推荐，任何可以得到与参照种质相同结果的种质均可作为参照样品
3.3.2特异种质资源指标
特异种质资源指标见表2
表2特异种质资源指标
了叶颜色稳定性
莞上些毛
叶片颜色
叶片斑点
叶片缺刻类型
蔓自封项
無花育性
果皮底色
果皮凝纹形状
果肉颜色
果闵质地
种子干粒重
粘萎病抗性
蜗毒蜗抗性
红菌性果斑病抗性
南方根结线虫抗件
种质染色体倍性
后绿（96B9h)
无（欧根选）
黄(黄苗西瓜)
黄绿（克伦生）
有(Moon st.ar）
无（板叶号）
有(无权早)
丛生（本知革）
雄性不育(AB不育系)
靡花两性花同株（苏联一号)
全雌株（姜向游伞系）
羲黄(黄皮小西斑）
深黄（金瓜）
绿白白)
放射条（印尼西）
斑点(Moan star)
白(三凹)
浅黄（黄旭都）
黄(黄小玉)
橘黄(金兰选)
软（早花）
硬（然美人）
小（oao sed)
大（泉兰籽瓜）
高抗及以上（R20%）
执及以上(RI1.0)
抗及以上(R≤1.0)
抗及以上(R1.0)
四倍体(蜜枚)
注：指标中提供的参照种质是为了方便标准使用，不代表对该种质的认可和推样，在何可以得到与参照种质相同结果的种质均可筛为参照样品。
4鉴定方法
4.1子叶额色稳定性
子叶期观察幼凿子叶颜色变化，分为稳定、后缘、老黄。4.2蔓上茸毛
NY/T 2387--2013
仲签明调查植株蔓上有无岸毛分布或其毛质地的差异情况，分为无，软、硬3种情况，4.3叶片颜色
仲蔓期随机调查成熟叶片颜色，根据叶片不同类型颜色分为黄、黄绿、浅绿、绿、深绿。4.4叶片斑点
植株我熟叶片上的斑点，分为有和无。4.5叶片-缺刻类型
植株生长期调查成熟叶片土脉两侧对称羽状缺刻发生状况，分为无、1对、2对3对、4对。无
4.6蔓自封顶
图1叶片缺刻类型
植株生长期调查瓜蔓端白封顶，分为有和无。4.7株型
坐果期调查，根据瓜蔓长短及节间密度，可分为从生、紧漆、蔬散3种株型。4.8雄花育性
雄花开放期调查雄花发育状况·根括雄花育性分为正常、雄性不育。4.9性型
雌花开放期调查花内雄蕊发状况，分为雌雄异花同株，雄花两性花同株、全雌株，4.10雕花间隔节位(G,）
开花垒果期统计第1.第2、第3雌花之间机距的节数，计算平均数即为雌花间隔节位，精确到0.1。4.11坐果指数(Gs)
坐果期调查坐果数，计算单株平均数即为坐果指数，精确到0.1，4.12裂果率(Gc）
果实成熟采摘前，单位面积内发生出间裂果的数最与总果数的比率，以百分数表示。4.13单质量
果实成熟期称取果实质量数，单位为千克(kg),精确到0.01kg，计算果实平均质量。4.14果实大小整齐度
选择：0株正常结果的植株.果实成熟期称取每个果实质量数，单位为千克（kg），精确到0.01kg，按式（1)计算果实大小变异系数（CV)，变异系数越小表示果实大小整齐度越高，果实人小变异系数小于或等于参照品种判定为整齐。
NY/T 2387--2013
果实大小变异系数；
单果架实质量，单位为干克(ka)；n 二：果实数量.
4.15果实成熟一致性
果实成熟期调合果实成热一致性，分为一致（果实全部成熟）和不：-致（10%以上的果实术成熟或过熟）。4.16果皮底色
果实成熟期调查果实底色，分为没黄、黄.深黄、绿白、浅绿、黄绿、绿、深绿、缘。4. 17果皮覆纹形状
果实成热期调果实表面覆纹形状，分为网条，齿条、条带、放射条、斑点。网茶
4.18果皮厚度
改射茶
图 2 果皮覆纹形状
果实成熟期谢查，纵剂果实，测量果实阳面和阴面果皮平均厚度，以厘米表示(crm），精确到0.1cm1。4.19果实中心可溶性固形物含量将果实心部位的果肉汁液滴手持糖计，记录度数，以分数表示（%），精确到0.1%。4.20果肉剖面
果实成熟期纵切果实后调查果肉的外观状况，分为瓣色均勺瓣色不均句，裂缝、空心、黄筋、纤维块等
4.21果肉颜色
果实成熟期调杏查果实果肉颜色，分为白、浅、黄、橘黄、粉红、红、大红，4.22果肉纤维
果实成熟期调查，根璐内果肉清泽残留的感官评价，分为少、、多。4.23果肉质地
果实成熟期调查果肉感的综合评价.分为软、沙、脆、硬。4.24种子干粒重
随机选择100粒发育正常种子（种子含水量8关）称重，统计种子下粒重，单位为究（g）精确到0.1g，下粒重10g的为小,干粒重200 的为大,4.25枯萎病抗性
参见附录A。
4. 26病毒病抗性
参见附录B。
组菌性果斑病抗性
参见附录C。
4.28南方根结线虫抗性
参见附录 D。
9和质染色体倍性
参贞附录E，确定种质染色体组数量倍性)，可分为二倍休、三倍休体、四倍休。5判定
5.1优良种质资源判定
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以公布频率最高的指标判定种质资源性状，符合表1中果实人小整齐度，果实成熟一致性、果实巾心可溶性固形物含量、坐果指数和其他任意1项以上（含1项)指标的种质资源为优良种质资源。5.2
特：异种质资源判定
以公布频率最高的指标判定种质资源性状，符合表2中任何1项以上(含1项)指标的种质资源为特异种底资源。
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A.1适用范国
附录A
[资料性附录]
枯萎病抗性鉴定
本附录适用十枯萎病LFusariumorysporumfsp.niveum（FF.Smith）SnyderctHansen抗性鉴定。A.2鉴定方法
苗期人工接种鉴定。
A.3仪器设备
A.3.1显微镜。
A.3.2血球计数板。
A.3.3生化培养箱。
A.3.4普通冰箱。
A.4病原采集
在枯萎病重病区采集发病植株，用组织分离法分离病菌，马伶薯葡菊糖琼脂培养基(PDA)培养和繁，经致病性验证后，冰箱低温保存。A.5接种程序
A.5.1供试材料幼苗的准备
经粒选的种子用0.1%升汞消毒10min，用清水冲洗干净，浸种2h~3h即可捞起，用纱布包好放在30℃～32℃的恒温箱内催芽，大约36h后肝根长到2mm~~3Imm时，播种在盛有经消毒的珍珠岩育苗盘内，放在28左石的溢室内生长。A.5.2接种体的准备
为了克服因多次转而使分离物致病减退的现象，贮藏在试管内的菌株必须经过活化和复壮.通过重新接在夺十1再分离病源，或者直接取白发病植株根部维管束的样品，经单抱分离增养得到病源，将病源接种装有马铃薯蔗糖的液体培养基的三角瓶中，放置在25℃-～28℃条件下，并保持110次/min~120次/mit的恒温振满培养7d~10d后.将培养菌液通过4层～8层消年纱布过滤，滤去的丝，把滤液放在3(000r/nin的瓶内离心10min后，将离心瓶上面清液倒掉，再用消每蒸馏水将沉淀瓶底的孢子冲洗至烧杯内并稀释，在显微镜下用而球计数板统计菌液中的孢丁数.加火菌蒸馅水配制成1x1or/m.的接种袍子液浓度。A.5.3接种时期
幼苗真叫露心期。
A.5.4接种方法
接种前将行苗岛放在水中浸范儿分钟，以避免幼苗掘出时断根。接种时先将根部用水轻轻冲洗十净，用吸水纸吸去水分，放人配好的菌液中浸泡上)min后，再将苗移裁到有珍殊出的塑料钵中。
A.5.5接种后管理
接种及对照同放在20℃～28℃的温案内培养，接种后2d内，可酌情遮阴A.6病情调查
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浸根接种后10d左右开始显示枯萎病症状，14d开始记载枯萎病和剖观察维管束褐变情况，每随2d观案记载枯萎株数，按武(A.1)计算出枯萎发病率(R)。接种后35d试验结束。R = (n/N) X 100
........
我中：
R一-枯萎发病率,单位为百分率(%);n--发生枯萎病株数；
N-—-接种株数。
A.7评价标准
根据沾萎发病率的高低作为抗性评价标准。高抗1.HR):萎发病率为0%～20%;中抗:MR)：枯萎发病率为21%~~50%；轻抗(R)：枯萎发病率为51%～80%；感病(S)：枯萎发病率为81%～100%。A.1)
..+++....+++....+
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B.1适用范围
附泉B
(资料性附录】
病毒病抗性鉴定
本附录适用于由小西胡芦黄花叶病毒（ZYMV）、瓜花叶病毒（WMV）、黄瓜花叶病毒（CMV）、番和瓜环斑病毒一西瓜株系(PRSV-W)和南瓜花叶病毒（SgMV)慢染引起的病害抗性鉴定B.2病原分离
从发病植株的典型病叶上以常规汀液摩擦法分离黄瓜花叶病毒病病原物。分离物经血清学、寄主范围、枯斑寄主、理化性状及传播方式测定，电子显微镜观察病毒粒子形态等方达鉴定，确认病毒种炎届，再进行分离物纯化和致病性测定，保存备用。B.3接种体繁殖和保存
B.3.1接种体繁殖
取少鼠保存的病毒供试株察的鲜病叶摩擦接种在西葫芦Ⅲ片上，置防虫温室内，在26℃28℃条件下培育7d~10d后采集病叶，1g鲜病叶加30ml.的0.03nol/L磷骏盐缓冲液（pI18.0)勺浆，纱布过滤或3000r/min离心15min，取滤液或上清液为接种悬浮液。B.3.2接种体保存
接种体可常年保存在防虫温室内的听葫芦上，或将鲜病叶制作成冻十叶保存在一20℃以下的冰箱内。B.4鉴定程序
B.4.1供试材料幼苗的准备
经粒选的种子用0.1%开汞消毒1Cmin.用清水冲洗十净，浸种2~~3h即可捞起，用纱布包好放在30℃~32℃的恒温箱内催穿，胚根长到2mm~3mm时，播种在盛有经消毒的诊珠岩育苗盘内，放在28℃左右的温室内生长。
B.4.2接种方法
当幼苗片叶时进行接种。在叶片上方轻轻弹撒金刚砂·使之覆盖-薄层，数上一次性于袭蘸取病琦液进行糜擦接种，
B.5病情调查
接种--周后开始观察症状表现，接种后35记载发病情况，进行病情分级。病情分级标准为：
1级叶片无低何症状；
1级：叶片褪绿斑或明脉；
2级：轻度花叶，无蕨叶1
3级严年花叶无蕨叶：
4级：严重花叶，轻微蕨川：
5级：严秉花叶和蕨叶,叶片严亚畸形。8
按对:(B.1)计算出平均病情级数(RI)。式中：
RI-—平-均病情级数；
r：-—病害级别;
-相应病害级别的株数；
i：—病害分级的各个级别；
调查总株数。
B.6评济标准
以平均病情级数作为抗性评价标准：高抗(HR):平均病情级数为 0~1. 0;抗(R):平均病情级数为1.1~2.0;中抗（MR)：平均病情级数为2.1~3.0；感(S):平均病情级数为3.1~4.0
高感(HS);平均病情级数为 1. 1~～5.0。R
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C.1适用范围
附录C
(资料性附录）
细菌性果斑病抗性鉴定
本附录适用细菌性果斑病（Aridorra.r:ritrutliWillemsetil抗性鉴定C.2鉴定方法
苗期人工接种鉴定。
C.3仪器设备
C.3.1显微镜。
C.3.2血球计数板。
C.3.3生化培养箱
C.3.4普通冰箱。
C.4病原菌的分离和纯化
C.4.1培养基的制备
C.4.1.1KB固体培养基的制备
丙三醇
胰蛋白陈
水至1 000 ml,调pl[为7. 0,121℃灭菌20min。KB液作培养基除不含琼脂外，成分与固体培养基和同：C.4.1.2YTC固体培养基的制备
酵性提取物
葡萄糖
碳酸钙粉末
C.4.2病原采集与分离
（1）创先把熔化好的YTD:培养基倒在培养I中，凝成平板后，翻转放置至表而无冷凝水后使用。（2)以感病植株为材料.用灭菌刀切划取病组织，5头次氯酸钠消毒3rin，再无菌水冲洗3次后，放在盛有无菌水的灭菌培养Ⅲ中，用灭菌玻棒研卒，并让组织碎块在水中双泡10min1，使细菌释放到灭菌水中。3)而灭菊的接种坏取组织没泡液在十燥的培养基平板表断划线分离。(4)翻转培养Ⅲl,放在28%恒温箱中培养21h~18h后,再逊行划线纯化。（5)挑取病原菌的单菌落，经培养后出现的菌落在形态特征方面都趋于致，并与典型描述的特征10
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