NY/T 2631-2014
基本信息
标准号： NY/T 2631-2014
中文名称：南方水稻黑条矮缩病测报技术规范
标准类别：农业行业标准(NY)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.rar .pdf
下载大小：469KB
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
NY/T 2631-2014 南方水稻黑条矮缩病测报技术规范
NY/T2631-2014
标准压缩包解压密码：www.bzxz.net
标准图片预览
标准内容
ICS65.020
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2631—2014
南方水稻黑条矮缩病测报技术规范Rules for investigation and forecast ofSouthern rice black-streaked dwarf virus2014-10-17 发布
2015-01-01实施
中华人民共和国农业部
本标准按照CB/T1.1—2009给出的规则起节，本标准由农业部种植业管理司提出并归口。NY/T2631—2014
本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、江苏省农业科学院植物保护研究所、福建省植保植检总站、湖南省植保植检站、广西壮族白治区植保总站广东省农业有害生物预警防控中心。本标准主要起草人：刘力才、陆明红、周益军、吴建祥孔丽萍、工标、宋建辉、谢茂昌、陈玉托。1范围
南方水稻黑条矮缩病测报技术规范NY/T 2631--2014
本标准规定了南方水稻黑条矮缩病测报调查的病毒检测技术、病情调查方法以及谢查数据记载归档的要求，
本标准适用于农业植保部门南方水稍黑条矮缩病测报调查.有关研究及生产单位川参考执行。2术语和定义
下列术语和定义适用十本文件。2.1
南方水稻黑条矮缩病毒southern riceblack-streaked dwarf virus(以下简称SRRSDV)属斐济病毒属（Fjiwirus），病毒粒体球状，直径7Cnm-~75nm，病毒基因组10片段dsRNAs组成，该病毒可在传毒介体背飞虱体内增殖，循回期（从获毒至可传毒的间隔时间57d，最短传毒取食吋间为 5 min～10 min,
传毒介体transmissiun vector
携带可以俊染水稍的SRRSDV的昆虫。SRBSDV的传毒介体为白背飞虱（SogatellafurciJeruHorvath，white-backedplanthopper，以下简称WBPH)，属昆虫纲同翅日飞虱科。成出与若出皆能传毒，且若虫传毒效率高于成虫，但不经卵传毒。2.3
传毒方式virustransmission manmer白背飞虱传播SRBSDV的方式为持久性传.文称循回型传或增殖型传毒。白背飞虱在毒源植物上经较长时间吸食获得病毒，经数小时或更长时间的循回期厉即可传毒。获毒后，白背飞虱持毒期长,终身带毒
带毒率rate of viruliferous wBPH携带SRBSDV的白背飞虱虫量占白背飞虱调脊总虫量的百分率。2.5
显症symptomaticappearance
水稻感染 SRBSDV一段时间后表现出植株矮缩、倒生根,纵向排列的小瘤突等症状，一般感染 15 d左行达显症高峰
病丛(株)率diseased cluster(plant)rate发病水稻丛(株)数占调查总丛（株)数的介率。2.7
见病面积discased occurrence area指田问出现南方水稻黑条矮缩病的用块面积总租。2.8
发生面积diseascdepidcmicarea1
NY/T 2631—2014
指田何南方水稻黑条矮缩病实际发生病丛率大于1紧的田坎块而积总和：3白背飞虱带毒率调查检测
3.1带毒率测定方法
采用dot-ELISA检测试剂盒或采用商品化ICR试剂盒测定H背飞虱的带毒率情况。每批饮检测自背飞虱数量应在100头以上（如果1次采虫不是100头，川采用连续儿大收集或采集的出体标本进行检测）。然后逐个检查反应类型（带白背士现阳性反应）.记载帮毒出量，根据式(1)计算带毒率。0X100
式中：
H-—一帮毒率,单位为百分率(%)：S一带毒虫量,单位为；
Z一检测总虫革,单位为头，
3.2越冬白背飞虱虫口密度调查及带毒率检测3.2.1调查时间
每年2月中旬至翻耕前谢查1，各地每年调查时间应人致相同。3.2.2调查地点
白背飞虱常年可越冬区域或间歇越冬区域广东、广西、福建、云南、海南）3.2.3调查方法
在冬种稽、再生稻苗、落谷苗、稻桩，山边和沟边杂草（游草)等越冬场所调查，用网扫法（针对成、若虫），点扫10复网次（左右摆幅3m-总共30m以十）。若收集到的白背飞虱少于50头·则检测所有凹背飞虱，计算带毒率；若多1头，则检测50头白背飞甄，计算带毒率，检测结果填人表A.1并及时上报。
3.3灯下白背飞虱带毒率调查检测3.3.1调查时间
分年，中、晚稻，在每季水稻苗期至分藥期，逐H收集白背飞虱，每用集中检测1次：如遇门背飞虱集中迁人峰，则单狸检测峰目亡背飞虱。3.3.2调查地点
南方水稻黑条矮缩病发生省份或川能发生省份。3.3.3调查方法
采用自动出情测报灯，逐口收集白背飞虱，将每日白背飞或样品置十1.5mL尖底或2mL平底小离心管中。为防止虫体腐烂管内再放人适景经70%酒精漫润的纸巾或棉球，盖紧管盖、管壁标明地点和日期，初处理后及时进行检测。如灯下监测出现背飞虱明品迁人峰，则需要对迁入峰日的白背飞甄带市情况进行单独检测、检测结果填人表A.2、表A.3并及时1报。4水稻田间发病况调查
4.1系统调查
4.1.1调查时间
白行飞虱迁入高峰后.每10天调查1次（可结合白背飞虱出量调查同时行），至水稍蜡熟期结束、
4.1.2调查地点
水稻本田期，在白背飞虱带毒虫册高、常年南方水稍黑条矮缩病发病比较重、有代性的地区，选取不同抗感病品种、不同播裁期的类型用各1块，作为系统观测。4.1.3调查方法
NY/T 2631—2014
采用平行跳跃10点取样，每点查20丛，记载发病从数、病株数，根据式（2)分别计算病从率，病株率，果记人表 A,4。
式中：
1病丛(株)率，单位为百分率()；P,——病丛(株)数;
F——调查总从(株)数。
4.2病情普查
4.2.1调查时间
根据水稻不同播期与抗性，分别选择卓、中、晚及不同抗感类型田各3块~5块.干双季早稍、中程及双季晚稻的分末期和齐穗期务调查1次。4.2.2调查地点
南方水稻黑条矮缩病发生省份或可能发生省份。4.2.3调查方法
在观察区和辖区范围内调查每种主要水稻类型田不少丁20块，面积不少丁1hm2，叮结台白背飞虱大田普查同时进行。采用平行跳跃10点取样，本用每点调查20从。记录调查情况，并进行带率检测（记载发病田块数、发病丛数，计算病田率病丛率）。衔季水稻病情稳定后.根据行生育期发病普查结果，统计水稻种植及南方水稻黑条矮缩病见病、发生、防治面积。调查结果填入表A，5和表A.6并及时上报。
5数据报送和传输
5.1模式报表
按统汇报格式、时间和内容汇总上报（见附录B)。其中，发生程度分别用1、2、3、1、5表示。同历年比较的早、增、多高用“十表示，晚（迟）、减、少、低用“一”表示；马与历年相同和相近，用\0\表示；缺测项目用“××\表示。
5.2信息共享平台
全国农作物重大病虫害数字化监测预警系统南方水稀黑条矮缩病发生与监测信息共享平台·登陆地址：http：//202.127.42.217。6调查资料表册
全国制定统：的“调查资料表册”样表见附录A）其中的内容不能随意更改.各项调查内容须在调查结束时，认真统计和填马。3.1中采用lat-HI.ISA检测试剂盒测定白背飞虱的带毒率情况的方法见附录C,4.1.3中病从.病株的分级指标参见附录力。7预测预报方法
南方水稻熙条矮缩病由迁飞性害虫白背飞虱传播，其发牛为害与白背飞虱的出源基数和带毒率、耕作制度、气候条件.白背飞虱迁人期与水稻敏感期的吻合度等密切相关。预测预报可根据南方水稻黑条矮缩病叫问发病丛数调查结果，结合背飞虱的虫源基数和带毒率、耕作制度、气候条件、白背飞虱还人期与水稻敏感期的吻合度等因素综合分析，做出南方水韬黑条矮缩病发生程度趋势预报（参考附录）。3
NY/T 2631—2014
7.1虫源基数和带毒率
南方水稻黑条矮缩病森上要由白背飞虱携带传播，『「背飞虱一且获毒可终身惜毒，老虫、成虫均能传声，传毒效率非常高，但不经卵传毒。带毒白背飞鼠通过吸食传毒为害。南方水稻黑条矮缅病发生流行主要取决于背飞虱种群数量及其带毒率高低，带毒率高·种群数量人有利于病害发生流行。7.2耕作制度
山间稍作复杂、杂草多，右利丁带毒白背飞虱的辗转传毒为害；调查研究结果表明，育秧移裁由重十直播田；杂交稻重于常规稻；水稻混栈区丁连片稻作区；田块间发病程度差异显考；中、晚稻发病重十草稍等
7.3气候条件
冬季气温偏高有利丁门背飞虱越冬和其北界向高纬度延伸，扩大越冬范用和越冬出源数量，增加毒源积累，卷乖强对流天多，多雨有利丁大量的南方越冬区白背飞虱随气流北辽，特别是5月～8月强降雨天气增多，江人的白背飞虱虫量人，如果带毒率高，极有利于南方水稻黑条矮缩病发生流行，病害有可能加重流行。
7.4白背飞虱迁入期与水稻敏感期的吻合度水稍秧苗期至分藥前期刘南方水稻黑条矮缩病毒的抵抗力比较差，为南方水稍黑条矮缩病人敏感期,若此期闻巡上白背飞虱还人峰（且白背\飞虱带毒），极有利于病毒侵染发病。调查单位
（北纬：二
测报员
负责人
附录人
【规范性附录】
农作物病虫调查资料表册
南方水稻黑条矮缩病
东经：
海拔：
中华人民共和国农业部
NY/T 2631—2014
NY/T2631—2014
调代地点：
训查日期
调件地点：
凋查口期
月-月
调查地点：
高峰口期
谢查地点
调查月期
月-日
调香带点
调查H期
调查地点：
取样地点
取样地点
表 A.1白背飞虱越冬带毒情况调查县（市、区)站
腋样而积
检泌虫虽
带持量
表 A. 2灯下白背飞鼠带毒情况调查县（市、区)站
高峰期
给测出量
带声率
带毒业量
灯下高峰日白背飞虱带毒情况调查表A.3
其(市区)站
取样地点
类型田
水稻奖型
数季草韬
双牵挽稻
甲季中晚稻
简述发生概况利特点
高峰日虫量
检测虫量
带毒虫
南方水黑条矮缩病田间发病系统调查表县(市、区)站
生育期
升合期
病丛数
病丛率
调查总
南方水稻黑条矮缩病田间病情普查表县(市区）站
调查用决
发病用块
病田率
病株数
调存从
表A.6南方水稻黑条矮缩病发生基本情况省
水稻种的私！
县(市、区)站
病面积
发生面积
（环境类型）
带毒率
带毒率
病株率
发病从数
病丛率
防治面积
附泉B
（规范性附录】
南方水稻黑条矮缩病模式报表
越冬代H背飞甄南方水稻黑条矮缩病毒带毒率检测模式报表见表B.1B.1
NY/T 2631—2014
表B.1越冬代白背飞虱南方水稻黑条矮缩病毒带毒率检测模式报表序号
调在月期
取样面积+r
捕获自背飞风虫，头
捕获虫基比上年增减比例,%
捕获虫量比常年增减比例，另
检测白飞虱业量，头
带背，头
白背虱带毒率，%
带毒率比上年增减比例，%
报内窄
带毒率比历年平均增减比例，%
发生面积比率,站
填报举位
注：此表巾白背飞试越冬区各区域站在3月30并前调代汇报1次。B.2灯诱白背飞虱南方水稻黑条矮缩病毒带毒率检测模式报表见表B.2。报表程序
表B.2灯诱白背飞虱南方水稻黑条矮缩病毒带毒率检测模式报表号
调查期Www.bzxZ.net
检溅凹背匹虱虫堂.头
带毒虫虽,头
平均器，%
报表内容
平均带毒率比上年增减比例，%
平均带毒率比常年平均增减比例.为水稍生育期
项南方水稻粥条矮缩病发小程度,级预汁南方水稻黑条矮缩病发面积比例，兴填报单位
注:此表在 5月5月、6月5几、7月5日,8月日前调查上报。报表程序
NY/T 2631—2014
南方水稻黑条矮缩病田间发牛情况系统调查模式报袭见衣B.3，B3
表B.3南方水稻黑条矮缩病田间发生情况系统调查模式报表序号
谢查口期
口间虫量，头从
用间年比工年增减.
旧问虫虽比常年增减：3
稠作类型
本排病肽率，死
本用病株率，齐
填报单位
报表内容
注：此表几而间见病所每月逢1日调查汇报1次，B.4
南方水稻黑条矮缩病用间发生情况普查模式报表见表.1。表B.4南方水稻黑条矮缩病田间发生情况普查模式报表号
调使日期
稍作类型
生有期
本田病田率,%
本目病从率，%
本用病株率.为
见病面积，5G7m
发生面！.5671
防治面积，667㎡
填报单位
报表内容
报表程序
报去程序
注;此衰于每季水稻发病稳定后调查1.摄1次(早稻 6 月 10 H、小稀 7 月30 甘,晚稠 9 月 2℃ 月)。8
C.1试验原理
(规范性附录）
南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)dot-ELISA检测方法NY/T 2631—2014
do1-ELISA是以硝酸纤维素膜（NC膜）为固相载体的ELISA检测方法.具有简使、快速、特异、敏感、便丁推广、不需特殊仪器等优点，月前在人类、动精物病原检测中广泛应用。携带南方水稍黑条矮缩病毒的凹背飞丞（或水稍植株）样品的勾浆液点到NC膜工，干燥形成固相抗原；加人抗南方水稻黑条矮缩病毒的鼠单抗.测单抗与固机抗原（SRBSDV)形成抗原一抗体复合物：再加人辣根过氧化物酶（HRP)【检测植株时加入碱性磷酸酶（AP）标记的抗鼠IgC抗抗体（即二抗），则抗抗体与1逆抗原-抗体复合物结合兆成抗原一抗体一酶标抗抗体复合物：加入显色底物，复合物上的酶催化底物牛成沉淀型有色产物而显色。由予每步之间均有洗涤的步骤，若待测白背飞虱（水稻植株）样品中不含SRBSDV.则酶标抗体将被洗掉，底物不显色而呈阴性反应。肉眼观察斑点颜色有无及深浅求进行样品中SRBSDV的定性和半定量检测。
C.2白背飞虱样品检测
C.2.1主要试剂与材料准备
0. 01 mol/1. PBS
SRBSDV单克隆抗体
HRP标记羊抗鼠IgG二抗
TMB显色底物液
10X浓缩封闭液
10×抗体稀释液
20X浓缩洗涤液
以1试剂均保存于4℃下
C.2.2操作步骤
0. 04 mJ.
）一头F背E甄放人7.5ml.的离心管中后加人50mL-200ul.0.01mrl/LPBS.用牙签或20ul.枪头捣碎飞虱；
b）5000r/min离心3min.如无条件此步可以省略；取3ul上清点硝酸纤维素膜（Nc)上.室温干燥10min-~20min：NC膜浸人到封液中室温封闭30min；d
NC膜放人用抗体稀释液1：1.000倍稀释的单抗中室温孵育30min~60min；水平摇床上用洗涤液洗膜3次～4次，每次3min；NC膜效人用扰体稀释液1：1000倍稀释的HRP标记羊抗鼠IgG二抗中室温孵育30mi11~g?
60min;
h）水平摇床上用洗涤液洗膜4次~5次，每次3mini）将TMB底物显色液滴加划膜表面进行显色反应，待用性对照显色叫显，而阴性没有仟何显色时终止反应，即在白来水中漂洗-下，肉眼观察结果，并记录检测结果。9
NY/T 2631--2014
C.2.3缓冲液配方
磷酸盐缓冲液(FBS,0.01 mol/L-pH7.4),Na18 g、KCl 0.2g、KII.P,0.2g.NaHPOa
12H03g加蒸播水950mL溶解后调H至7.4，定容至1C00ml。b）封闭液：用去离子水将10×封闭液按1：9体积比进行稀释（1份10×封闭液十9份去离子水），稀释后的封闭液在4℃环境可保存1个几。e）洗涤液：用去离子水将20×液缩洗涤液按1：19体积比进行稀释（或按需量稀释）（1份20×浓缩洗涤液+19份去离子水），稀释后的洗涤液在1℃环境可保存1个几。d）抗体稀释液：用去离子水将10×抗体稀释液接1：9体积比进行稀释（1份1G×封闭液十9份么离子水），稀释后的抗体稀释液在4℃环境川保存1个月。C.2.4注意事项
硝酸纤维素膜位于2张保护纸中间，不要用于直接触摸膜，用镊子和戴一·次性PE手套取膜：a
b）NC膜CK一处为阳性对照（点带SRBSDV的背飞虱勺浆液）；c）NC膜CK一处为阴性对照（点无SRBSDV的白背飞鼠勾浆液）；d）NC膜工滴加检测样品的一也为正面，整个实验过程应朝上；抗体在使用前10it1之内稀释；
I）阳性对照和阴性对照来白于带毒和非带毒的背飞鼠·仅用了-dutELISA检测；g）该试剂盒反应温度为4℃~38℃，是住反应温度为37℃。C.2.5贮藏条件及保存期
试剂盒上2℃~-8℃避光保存，冷冻保存更佳。该产品有效期为6个月。C.3水稻植株样品检测
C. 3. 1 主要试剂与材料
0. 0I mol/I. PBS
SRBSDV单克隆抗体
AP标记羊抗鼠IgG二抗
ICX浓缩封闭液
10×抗体稀释液
20X浓缩洗涤液
NBT储备液
BCIP储备液
底物缓冲液
以上试剂均保存于4℃下
C.3.2操作步骤
水稀叶片称单后用液氮研磨成粉末，按1：（1~30)（重量：体积，g/mL）加人C.C1moi/LPBSa
后研磨；
5000 r/min离心3min;
去2 ul上清点到硝酸纤维系膜(N()L.率温干燥 1C tmin-~20 min;d)
NC.膜浸人到封闭液中温封闭 30 mine）NC膜放入用封闭液1：1000倍稀释的单抗中室温孵存30min~6Cmin）水平摇床1用洗涤液洗膜3次～4次.每次3min;NC膜放人用封闭液1：1000倍稀释的AP标记羊抗鼠Ig;一抗中室温孵30min~60min;g
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2631—2014
南方水稻黑条矮缩病测报技术规范Rules for investigation and forecast ofSouthern rice black-streaked dwarf virus2014-10-17 发布
2015-01-01实施
中华人民共和国农业部
本标准按照CB/T1.1—2009给出的规则起节，本标准由农业部种植业管理司提出并归口。NY/T2631—2014
本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、江苏省农业科学院植物保护研究所、福建省植保植检总站、湖南省植保植检站、广西壮族白治区植保总站广东省农业有害生物预警防控中心。本标准主要起草人：刘力才、陆明红、周益军、吴建祥孔丽萍、工标、宋建辉、谢茂昌、陈玉托。1范围
南方水稻黑条矮缩病测报技术规范NY/T 2631--2014
本标准规定了南方水稻黑条矮缩病测报调查的病毒检测技术、病情调查方法以及谢查数据记载归档的要求，
本标准适用于农业植保部门南方水稍黑条矮缩病测报调查.有关研究及生产单位川参考执行。2术语和定义
下列术语和定义适用十本文件。2.1
南方水稻黑条矮缩病毒southern riceblack-streaked dwarf virus(以下简称SRRSDV)属斐济病毒属（Fjiwirus），病毒粒体球状，直径7Cnm-~75nm，病毒基因组10片段dsRNAs组成，该病毒可在传毒介体背飞虱体内增殖，循回期（从获毒至可传毒的间隔时间57d，最短传毒取食吋间为 5 min～10 min,
传毒介体transmissiun vector
携带可以俊染水稍的SRRSDV的昆虫。SRBSDV的传毒介体为白背飞虱（SogatellafurciJeruHorvath，white-backedplanthopper，以下简称WBPH)，属昆虫纲同翅日飞虱科。成出与若出皆能传毒，且若虫传毒效率高于成虫，但不经卵传毒。2.3
传毒方式virustransmission manmer白背飞虱传播SRBSDV的方式为持久性传.文称循回型传或增殖型传毒。白背飞虱在毒源植物上经较长时间吸食获得病毒，经数小时或更长时间的循回期厉即可传毒。获毒后，白背飞虱持毒期长,终身带毒
带毒率rate of viruliferous wBPH携带SRBSDV的白背飞虱虫量占白背飞虱调脊总虫量的百分率。2.5
显症symptomaticappearance
水稻感染 SRBSDV一段时间后表现出植株矮缩、倒生根,纵向排列的小瘤突等症状，一般感染 15 d左行达显症高峰
病丛(株)率diseased cluster(plant)rate发病水稻丛(株)数占调查总丛（株)数的介率。2.7
见病面积discased occurrence area指田问出现南方水稻黑条矮缩病的用块面积总租。2.8
发生面积diseascdepidcmicarea1
NY/T 2631—2014
指田何南方水稻黑条矮缩病实际发生病丛率大于1紧的田坎块而积总和：3白背飞虱带毒率调查检测
3.1带毒率测定方法
采用dot-ELISA检测试剂盒或采用商品化ICR试剂盒测定H背飞虱的带毒率情况。每批饮检测自背飞虱数量应在100头以上（如果1次采虫不是100头，川采用连续儿大收集或采集的出体标本进行检测）。然后逐个检查反应类型（带白背士现阳性反应）.记载帮毒出量，根据式(1)计算带毒率。0X100
式中：
H-—一帮毒率,单位为百分率(%)：S一带毒虫量,单位为；
Z一检测总虫革,单位为头，
3.2越冬白背飞虱虫口密度调查及带毒率检测3.2.1调查时间
每年2月中旬至翻耕前谢查1，各地每年调查时间应人致相同。3.2.2调查地点
白背飞虱常年可越冬区域或间歇越冬区域广东、广西、福建、云南、海南）3.2.3调查方法
在冬种稽、再生稻苗、落谷苗、稻桩，山边和沟边杂草（游草)等越冬场所调查，用网扫法（针对成、若虫），点扫10复网次（左右摆幅3m-总共30m以十）。若收集到的白背飞虱少于50头·则检测所有凹背飞虱，计算带毒率；若多1头，则检测50头白背飞甄，计算带毒率，检测结果填人表A.1并及时上报。
3.3灯下白背飞虱带毒率调查检测3.3.1调查时间
分年，中、晚稻，在每季水稻苗期至分藥期，逐H收集白背飞虱，每用集中检测1次：如遇门背飞虱集中迁人峰，则单狸检测峰目亡背飞虱。3.3.2调查地点
南方水稻黑条矮缩病发生省份或川能发生省份。3.3.3调查方法
采用自动出情测报灯，逐口收集白背飞虱，将每日白背飞或样品置十1.5mL尖底或2mL平底小离心管中。为防止虫体腐烂管内再放人适景经70%酒精漫润的纸巾或棉球，盖紧管盖、管壁标明地点和日期，初处理后及时进行检测。如灯下监测出现背飞虱明品迁人峰，则需要对迁入峰日的白背飞甄带市情况进行单独检测、检测结果填人表A.2、表A.3并及时1报。4水稻田间发病况调查
4.1系统调查
4.1.1调查时间
白行飞虱迁入高峰后.每10天调查1次（可结合白背飞虱出量调查同时行），至水稍蜡熟期结束、
4.1.2调查地点
水稻本田期，在白背飞虱带毒虫册高、常年南方水稍黑条矮缩病发病比较重、有代性的地区，选取不同抗感病品种、不同播裁期的类型用各1块，作为系统观测。4.1.3调查方法
NY/T 2631—2014
采用平行跳跃10点取样，每点查20丛，记载发病从数、病株数，根据式（2)分别计算病从率，病株率，果记人表 A,4。
式中：
1病丛(株)率，单位为百分率()；P,——病丛(株)数;
F——调查总从(株)数。
4.2病情普查
4.2.1调查时间
根据水稻不同播期与抗性，分别选择卓、中、晚及不同抗感类型田各3块~5块.干双季早稍、中程及双季晚稻的分末期和齐穗期务调查1次。4.2.2调查地点
南方水稻黑条矮缩病发生省份或可能发生省份。4.2.3调查方法
在观察区和辖区范围内调查每种主要水稻类型田不少丁20块，面积不少丁1hm2，叮结台白背飞虱大田普查同时进行。采用平行跳跃10点取样，本用每点调查20从。记录调查情况，并进行带率检测（记载发病田块数、发病丛数，计算病田率病丛率）。衔季水稻病情稳定后.根据行生育期发病普查结果，统计水稻种植及南方水稻黑条矮缩病见病、发生、防治面积。调查结果填入表A，5和表A.6并及时上报。
5数据报送和传输
5.1模式报表
按统汇报格式、时间和内容汇总上报（见附录B)。其中，发生程度分别用1、2、3、1、5表示。同历年比较的早、增、多高用“十表示，晚（迟）、减、少、低用“一”表示；马与历年相同和相近，用\0\表示；缺测项目用“××\表示。
5.2信息共享平台
全国农作物重大病虫害数字化监测预警系统南方水稀黑条矮缩病发生与监测信息共享平台·登陆地址：http：//202.127.42.217。6调查资料表册
全国制定统：的“调查资料表册”样表见附录A）其中的内容不能随意更改.各项调查内容须在调查结束时，认真统计和填马。3.1中采用lat-HI.ISA检测试剂盒测定白背飞虱的带毒率情况的方法见附录C,4.1.3中病从.病株的分级指标参见附录力。7预测预报方法
南方水稻熙条矮缩病由迁飞性害虫白背飞虱传播，其发牛为害与白背飞虱的出源基数和带毒率、耕作制度、气候条件.白背飞虱迁人期与水稻敏感期的吻合度等密切相关。预测预报可根据南方水稻黑条矮缩病叫问发病丛数调查结果，结合背飞虱的虫源基数和带毒率、耕作制度、气候条件、白背飞虱还人期与水稻敏感期的吻合度等因素综合分析，做出南方水韬黑条矮缩病发生程度趋势预报（参考附录）。3
NY/T 2631—2014
7.1虫源基数和带毒率
南方水稻黑条矮缩病森上要由白背飞虱携带传播，『「背飞虱一且获毒可终身惜毒，老虫、成虫均能传声，传毒效率非常高，但不经卵传毒。带毒白背飞鼠通过吸食传毒为害。南方水稻黑条矮缅病发生流行主要取决于背飞虱种群数量及其带毒率高低，带毒率高·种群数量人有利于病害发生流行。7.2耕作制度
山间稍作复杂、杂草多，右利丁带毒白背飞虱的辗转传毒为害；调查研究结果表明，育秧移裁由重十直播田；杂交稻重于常规稻；水稻混栈区丁连片稻作区；田块间发病程度差异显考；中、晚稻发病重十草稍等
7.3气候条件
冬季气温偏高有利丁门背飞虱越冬和其北界向高纬度延伸，扩大越冬范用和越冬出源数量，增加毒源积累，卷乖强对流天多，多雨有利丁大量的南方越冬区白背飞虱随气流北辽，特别是5月～8月强降雨天气增多，江人的白背飞虱虫量人，如果带毒率高，极有利于南方水稻黑条矮缩病发生流行，病害有可能加重流行。
7.4白背飞虱迁入期与水稻敏感期的吻合度水稍秧苗期至分藥前期刘南方水稻黑条矮缩病毒的抵抗力比较差，为南方水稍黑条矮缩病人敏感期,若此期闻巡上白背飞虱还人峰（且白背\飞虱带毒），极有利于病毒侵染发病。调查单位
（北纬：二
测报员
负责人
附录人
【规范性附录】
农作物病虫调查资料表册
南方水稻黑条矮缩病
东经：
海拔：
中华人民共和国农业部
NY/T 2631—2014
NY/T2631—2014
调代地点：
训查日期
调件地点：
凋查口期
月-月
调查地点：
高峰口期
谢查地点
调查月期
月-日
调香带点
调查H期
调查地点：
取样地点
取样地点
表 A.1白背飞虱越冬带毒情况调查县（市、区)站
腋样而积
检泌虫虽
带持量
表 A. 2灯下白背飞鼠带毒情况调查县（市、区)站
高峰期
给测出量
带声率
带毒业量
灯下高峰日白背飞虱带毒情况调查表A.3
其(市区)站
取样地点
类型田
水稻奖型
数季草韬
双牵挽稻
甲季中晚稻
简述发生概况利特点
高峰日虫量
检测虫量
带毒虫
南方水黑条矮缩病田间发病系统调查表县(市、区)站
生育期
升合期
病丛数
病丛率
调查总
南方水稻黑条矮缩病田间病情普查表县(市区）站
调查用决
发病用块
病田率
病株数
调存从
表A.6南方水稻黑条矮缩病发生基本情况省
水稻种的私！
县(市、区)站
病面积
发生面积
（环境类型）
带毒率
带毒率
病株率
发病从数
病丛率
防治面积
附泉B
（规范性附录】
南方水稻黑条矮缩病模式报表
越冬代H背飞甄南方水稻黑条矮缩病毒带毒率检测模式报表见表B.1B.1
NY/T 2631—2014
表B.1越冬代白背飞虱南方水稻黑条矮缩病毒带毒率检测模式报表序号
调在月期
取样面积+r
捕获自背飞风虫，头
捕获虫基比上年增减比例,%
捕获虫量比常年增减比例，另
检测白飞虱业量，头
带背，头
白背虱带毒率，%
带毒率比上年增减比例，%
报内窄
带毒率比历年平均增减比例，%
发生面积比率,站
填报举位
注：此表巾白背飞试越冬区各区域站在3月30并前调代汇报1次。B.2灯诱白背飞虱南方水稻黑条矮缩病毒带毒率检测模式报表见表B.2。报表程序
表B.2灯诱白背飞虱南方水稻黑条矮缩病毒带毒率检测模式报表号
调查期Www.bzxZ.net
检溅凹背匹虱虫堂.头
带毒虫虽,头
平均器，%
报表内容
平均带毒率比上年增减比例，%
平均带毒率比常年平均增减比例.为水稍生育期
项南方水稻粥条矮缩病发小程度,级预汁南方水稻黑条矮缩病发面积比例，兴填报单位
注:此表在 5月5月、6月5几、7月5日,8月日前调查上报。报表程序
NY/T 2631—2014
南方水稻黑条矮缩病田间发牛情况系统调查模式报袭见衣B.3，B3
表B.3南方水稻黑条矮缩病田间发生情况系统调查模式报表序号
谢查口期
口间虫量，头从
用间年比工年增减.
旧问虫虽比常年增减：3
稠作类型
本排病肽率，死
本用病株率，齐
填报单位
报表内容
注：此表几而间见病所每月逢1日调查汇报1次，B.4
南方水稻黑条矮缩病用间发生情况普查模式报表见表.1。表B.4南方水稻黑条矮缩病田间发生情况普查模式报表号
调使日期
稍作类型
生有期
本田病田率,%
本目病从率，%
本用病株率.为
见病面积，5G7m
发生面！.5671
防治面积，667㎡
填报单位
报表内容
报表程序
报去程序
注;此衰于每季水稻发病稳定后调查1.摄1次(早稻 6 月 10 H、小稀 7 月30 甘,晚稠 9 月 2℃ 月)。8
C.1试验原理
(规范性附录）
南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)dot-ELISA检测方法NY/T 2631—2014
do1-ELISA是以硝酸纤维素膜（NC膜）为固相载体的ELISA检测方法.具有简使、快速、特异、敏感、便丁推广、不需特殊仪器等优点，月前在人类、动精物病原检测中广泛应用。携带南方水稍黑条矮缩病毒的凹背飞丞（或水稍植株）样品的勾浆液点到NC膜工，干燥形成固相抗原；加人抗南方水稻黑条矮缩病毒的鼠单抗.测单抗与固机抗原（SRBSDV)形成抗原一抗体复合物：再加人辣根过氧化物酶（HRP)【检测植株时加入碱性磷酸酶（AP）标记的抗鼠IgC抗抗体（即二抗），则抗抗体与1逆抗原-抗体复合物结合兆成抗原一抗体一酶标抗抗体复合物：加入显色底物，复合物上的酶催化底物牛成沉淀型有色产物而显色。由予每步之间均有洗涤的步骤，若待测白背飞虱（水稻植株）样品中不含SRBSDV.则酶标抗体将被洗掉，底物不显色而呈阴性反应。肉眼观察斑点颜色有无及深浅求进行样品中SRBSDV的定性和半定量检测。
C.2白背飞虱样品检测
C.2.1主要试剂与材料准备
0. 01 mol/1. PBS
SRBSDV单克隆抗体
HRP标记羊抗鼠IgG二抗
TMB显色底物液
10X浓缩封闭液
10×抗体稀释液
20X浓缩洗涤液
以1试剂均保存于4℃下
C.2.2操作步骤
0. 04 mJ.
）一头F背E甄放人7.5ml.的离心管中后加人50mL-200ul.0.01mrl/LPBS.用牙签或20ul.枪头捣碎飞虱；
b）5000r/min离心3min.如无条件此步可以省略；取3ul上清点硝酸纤维素膜（Nc)上.室温干燥10min-~20min：NC膜浸人到封液中室温封闭30min；d
NC膜放人用抗体稀释液1：1.000倍稀释的单抗中室温孵育30min~60min；水平摇床上用洗涤液洗膜3次～4次，每次3min；NC膜效人用扰体稀释液1：1000倍稀释的HRP标记羊抗鼠IgG二抗中室温孵育30mi11~g?
60min;
h）水平摇床上用洗涤液洗膜4次~5次，每次3mini）将TMB底物显色液滴加划膜表面进行显色反应，待用性对照显色叫显，而阴性没有仟何显色时终止反应，即在白来水中漂洗-下，肉眼观察结果，并记录检测结果。9
NY/T 2631--2014
C.2.3缓冲液配方
磷酸盐缓冲液(FBS,0.01 mol/L-pH7.4),Na18 g、KCl 0.2g、KII.P,0.2g.NaHPOa
12H03g加蒸播水950mL溶解后调H至7.4，定容至1C00ml。b）封闭液：用去离子水将10×封闭液按1：9体积比进行稀释（1份10×封闭液十9份去离子水），稀释后的封闭液在4℃环境可保存1个几。e）洗涤液：用去离子水将20×液缩洗涤液按1：19体积比进行稀释（或按需量稀释）（1份20×浓缩洗涤液+19份去离子水），稀释后的洗涤液在1℃环境可保存1个几。d）抗体稀释液：用去离子水将10×抗体稀释液接1：9体积比进行稀释（1份1G×封闭液十9份么离子水），稀释后的抗体稀释液在4℃环境川保存1个月。C.2.4注意事项
硝酸纤维素膜位于2张保护纸中间，不要用于直接触摸膜，用镊子和戴一·次性PE手套取膜：a
b）NC膜CK一处为阳性对照（点带SRBSDV的背飞虱勺浆液）；c）NC膜CK一处为阴性对照（点无SRBSDV的白背飞鼠勾浆液）；d）NC膜工滴加检测样品的一也为正面，整个实验过程应朝上；抗体在使用前10it1之内稀释；
I）阳性对照和阴性对照来白于带毒和非带毒的背飞鼠·仅用了-dutELISA检测；g）该试剂盒反应温度为4℃~38℃，是住反应温度为37℃。C.2.5贮藏条件及保存期
试剂盒上2℃~-8℃避光保存，冷冻保存更佳。该产品有效期为6个月。C.3水稻植株样品检测
C. 3. 1 主要试剂与材料
0. 0I mol/I. PBS
SRBSDV单克隆抗体
AP标记羊抗鼠IgG二抗
ICX浓缩封闭液
10×抗体稀释液
20X浓缩洗涤液
NBT储备液
BCIP储备液
底物缓冲液
以上试剂均保存于4℃下
C.3.2操作步骤
水稀叶片称单后用液氮研磨成粉末，按1：（1~30)（重量：体积，g/mL）加人C.C1moi/LPBSa
后研磨；
5000 r/min离心3min;
去2 ul上清点到硝酸纤维系膜(N()L.率温干燥 1C tmin-~20 min;d)
NC.膜浸人到封闭液中温封闭 30 mine）NC膜放入用封闭液1：1000倍稀释的单抗中室温孵存30min~6Cmin）水平摇床1用洗涤液洗膜3次～4次.每次3min;NC膜放人用封闭液1：1000倍稀释的AP标记羊抗鼠Ig;一抗中室温孵30min~60min;g
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。