GB/T 24128-2018
基本信息
标准号： GB/T 24128-2018
中文名称：塑料 塑料防霉剂的防霉效果评估
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
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标准简介
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标准内容
ICS83.080.01
中华人民共和国国家标准
GB/T24128—2018/ISO16869:2008代替GB/T241282009
塑料防霉剂的防霉效果评估
Plastics-Assessment of the effectiveness of fungistaticcompoundsinplasticsformulations（ISO16869:2008.IDT)
2018-12-28发布
国家市场监督管理总局
中国国家标准化管理委员会
2019-11-01实施
规范性引用文件
术语和定义
仪器和材料
试验样品
试样制备
试验步骤
霉菌生长的评估
结果描述
精度和偏差
试验报告：
参考文献
GB/T24128-—2018/ISO168692008前言
不标准按照GB/T1.12009给出的规则起草GB/T24128-—2018/IS016869:2008本标准代替GB/T24128—2009塑料防霉性能试验方法%，与GB/T24128--2009相比，主要技术变化如下：
修改了第1章\范围\的规定和适用范围.增加了试样厚度要求（见第1章，2009年版的1.1和1.2)：
删除了概要（见2009年版的第3章）；增加了术语和定义（见第3章）：删除了用途和意义（见2009年版的第1章）；一增加了原理（见第4章）：
将原来的第5章“仪器设备“和第6章“试剂和材料合并为第5章“仪器和材料\（见第5章，2009年版的第5章和第6章）；
修改了霉菌培养基将“马铃薯-蔗糖培养基\修改为“麦芽提取物琼脂和毛壳琼脂”（见第5.22009年版的6.5）；
修改了部分测试菌种（见5.3.1.2009年版的6.6.1)；修改了莓菌孢子接种方式（见8.4.2.2009年版的9.1)；—培养温度出原来\28%～30℃\修改为\21%士1\（见8.4.4.2009年版的9.2.1）；—培养时间由原来\28d\修改为\21d\（见8.4.4.2009年版的9.2.2)；一增加了有效性控制，制除了孢子活力检查（见8.4.5.2009年版的第7章）；防霉等级由原来的5个等级修改为3个等级（见第10章，2009年版的9.3）：一删除了“物理性能、光学性能、电性能的影响\（见2009年版的9.1)；一将“不确定度“修改为\精度和偏差“（见第11章，2009年版的第11章）本标准使用翻译法等同采用IS(）16869：2008塑料塑料防荐剂的防霉效果评估》。与本标准中规范性引用的国际文件有一致性对应关系的我国文件如下：GB/T2918—2018塑料试样状态调节利试验的标准环境（IS0291:2008.M0D）。为了便于使用.本标准还做了下列编辑性修改标注了测试菌种的中国普通微生物菌种保藏中心的菌株编号本标准由中国石油和化学工业联合会提出本标准由全国塑料标准化技术委员会老化方法分技术委员会（SAC/TC15/SC5)归口。本标准起草单位：广东省微生物研究所、广州合成材料研究院有限公司、金发科技股份有限公司、同轨科技成都有限公司、山东大环保科技有限公司、普天纳来科技（厦门）有限公司、广东迪美生物技术有限公司，北京大罡助剂有限任公司，上海润河纳米材料科技有限公司、泉州市隐形盾鞋服科技有限公司、晋江拓普旺防霉材料有限公司、浙江金海环境技术股份有限公司、北京票高纳米科技有限公司、宁波壹贰系科化塑胶技术有限公司、安阳北清科技创新研究院有限责任公司、中国有油化股份有限公司北京化工研究院、广州工业微生物检测中心。本标准主要起草人：谢小保、陈娟、宁凯车、昊继贤、王丽红、刘燃、陈宏愿、王浩江、刘罡、孙廷、顾海斌、林国栋、何水洞、俞剑、彭红芳、主峰、本李毕惠、李杰、李素娟、赵培静、周经纶、李维义、肖鹏GB/T24128-2018/IS016869:2008引言
众所周知·增塑剂以及塑料配方中的其他成分，易被细菌、酵母菌和寇菌等微牛物侵蚀·而菌是导致塑料质量下降最重要的原因。微生物俊蚀导致塑料质量下降.造成脆化以及变色。这种变质会造成重大的经济损失。
菌侵蚀的预防可以通过在配方中添加防霉剂的方式实现，防霉剂的功能是抑制塑料制品表面低何得菌的生长
本标准中所捕述的方法是用来确定塑料中添加防剂对试验等菌的防等效果GB/T24128-—2018/IS016869:2008塑料塑料防霉剂的防霉效果评估警示一一处理和操作具有潜在危险的微生物需要很高的技术能力·并必须遵守现行国家法律和条例。只有经过微生物学技术培训的人员才能进行这些检测工作，应严格执行相关的消毒、灭菌和个人卫生规范程序
1范围
本标准规定了一种确定塑料配方中用于保护如增塑剂、稳定剂等易感成分的防霉剂的防效果的武验方法。本方法可验证集种塑料制品是否能有效防止得菌的侵蚀通过目视检查评价防霉效果。
本标准适用丁由塑料制成的不超过10m厚的薄膜或片材。此外，如泡述塑料之类的多孔材料也可以在制成述形态时采用本方法进行测试防等剂在基体中要有一定的溶出性能与IS0）816不同.本标准不是在试样表面喷得菌孢子悬液.而是覆盖一层含孢子的琼脂。这样会更好地分散孢子，并且在原本具有疏水性的塑料表面工提供孢子萌发所必需的水分。2规范性引用文件
下列文件对丁本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用丁本义件。凡是不注期的引川文件·其最新版本（包括所有的修改单）适用丁本文件IS0291：2008塑料试样状态调节和试验的标准环境（PlastiesStandardatmospheresforcondition and testing)
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
易长霉塑料
plasticsusceptibletofungalattack配方中包含一个或多个可支持菌生长所需营养物质的塑料。3.2
防霉剂
fungistat
能够防止易感染霉菌材料表面霉菌生长的化合物4原理
将试样表面暴露在薄菌孢子悬浮液中，将孢子分散在测试样品表面的层薄的尤添加碳源的琼脂培养基中.这样能保证抱了均勾的分敢和适宜的水分供给。没有添加防链剂的塑料会导致霉菌孢子的萌发和初期生长，当塑料中有容易受霉菌侵蚀的组分并且在配方中没有添加有效的防等剂时，菌孢子将会在试样表面及其周围进一步生长并产生孢子，含有防霉剂的塑料将会抑制试样表面及其周围的孢子萌发和初期生长。防霉剂可以溶拍到试样周GB/T24128—2018/IS016869:2008周的琼脂中，产生一个史大的抑制抱子萌发和生长的抑菌环虽然抑菌环不作为测试结果评价指标：仍可以显尔防锂剂的抑菌效果5仪器和材料
采用下列方法之一将所有玻璃器Ⅲ和会接触到培养基和/或试剂的其他仪器进行火菌处理（无菌仪器除外：
方法A：使用高压蒸汽火菌锅（见5.1.2）.在121℃火菌至少15min；方法B：使用一个1热灭菌器（见5.1.2），在180℃灭菌至少30min.在170C灭菌至少1h，或在160℃灭菌至少2h；
方法C：使用孔径0.45um的膜过滤系统5.1.1培养箱.温度能保持在24℃1℃.相对湿度能保持在85%或以上，5.1.2灭菌设备
5.1.2.1混热杀菌，适宜的高压火菌锅，5.1.2.2
干热火菌·热烘箱需维持一个在方法B中指定的温度。脱过滤除菌，一种膜过滤装置·方法（中指定的孔径。分析天平，精确到土0.1mg。
实验室离心机.转速为2000r/min5000r/min。计数板（在显微镜下直接计数）。显微镜.放大倍数可达到100倍。pH计.精确度在土0.1pH单位.有温度校准功能涡旋振荡器转速为2000r/min~2500r/min玻璃容器：试管.烧瓶或容量适当的瓶子培养Ⅲl.直径90mm~100mm.深度至少15mm标准移液器，标准容量1.0ml.和15.0ml..经过校准的自动移液器标准量筒.最小容量30mL
玻璃珠.直径3mm~5mm。
5.2培养基和试剂
所有试剂应是分析纯级和/或适用于微牛物试验试剂5.2.1水
所使用的水应是蒸馏水或去离子水.电导率小于1uS/cm。5.2.2麦芽提取物琼脂（MEA）
芽提取物
大豆蛋门陈
定容补足至1000ml.
进行高儿蒸汽火菌（见5.1.2），火菌后，培养基的pH值应为7.0土0.22
球毛壳需琼脂
MgS0..7H,0
Fe.(SO,):H.O
酵母提取物
微纤维素
羧中基纤维素（钠盐）
水（5.2.1)
GB/T24128-2018/IS016869:2008定容补是至1000mL
进行高压蒸汽灭菌（见5.1.2)，灭菌后培养基的pH值应为7.2+0.25.2.4润湿剂
制备5%（m/V）吐温80（聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯）的储备液.用水稀释至0.05%（m/V）用于收集孢子
营养盐溶液和琼脂储备液
FeSO,.7H.0
ZnS0,7H.0
水（5.2.1)
定容补足至1000mL
在长期储存之前.应该将储备液通过膜过滤除菌。5.2.6
营养盐溶液
NaHPO2H0
MgSO,.7H.0
原液（5.2.5）
水（5.2.1)
定容补足至1000ml
进行高压蒸汽灭菌（见5.1.2）。灭菌后，培养基的pH值应为5.5土0.2。5.2.7
营养盐琼脂
NaHPO,2H.O
MgSO,7H,0
GB/T24128—2018/ISO16869:2008储备液（5.2.5）
水（5.2.1)bzxz.net
定容补足至1000ml
将准备好的培养基加热至琼脂溶化·然后测量温度并调节pH值到5.5主0.1.进行高压蒸汽灭菌（见5.1.2）
当没有有效的长期储存方法（超过3d）时琼脂平板应现配现用。火菌后的溶液至多存放3个月，储存时应防止水分蒸发。
微生物和培养
测试微生物
球毛壳霉
宛氏拟青霉
绳状青霉
长枝术
CGMCC3.3928或ATCC6275
CGMCC3.3601或ATCC6205
CGMCC3.4253或CBS628.66
CGMCC3.3875或ATCC9644
CGMCC3.4291或ATCC13631
根据产品用途和需要，可以增加其他测试霉菌（例如土曲霉、出芽短梗霉）.在试验报告中应列出使用的所有菌株。
注：CGMCC为中国普通改生物菌种保藏管理中心.ATCC为美国典型菌种保藏中心.CBS为荷兰微生物菌种保鼓中心。
5.3.2培养条件
在5.3.1.1和5.3.1.3至5.3.1.5中，应在试管中的麦芽提取物琼脂（5.2.2）斜面1培养菌株.在24℃±1~培养14d~21d。
在5.3.1.2中，应在球毛完霉琼脂（5.2.3）培养基十培养菌株.在24℃±1℃培养14d~21d。用于储存的培养物应保存在琼脂斜面上，最好是做成冻种或冷冻保存。6试验样品
形状和尺寸
将符合要求的切片器灭菌.根据需要从每个测试样品中切出直径1cm～4cm的圆片或边长1cm1cm的方片试样。试样的厚度不超过10mm，6.2
试样数量
每种测试样品至少制备3个试样进行测试评估7试样制备
7.1清洗
用镊子夹持测试样品.反复清洗（必要时用刷子）后存放在个净的容器中并自然晾1。使用镊子进行所有后续处理.以避免样品污染7.2标签和储存
在测试过程中标签或标记可能会与塑料相互作用.因此要在室温下将样品分开储存在密闭容器内4
（如培养m），标记容器而不足样品、8试验步骤
8.1试验温度
GB/T24128-—2018/IS016869:2008按照IS029：2008中2级大气条件温度23（士2℃和相对湿度（50士10）%制备租调节试样状态。
2倾注培养基
灭菌后.在每个培养血中倾注20mL营养盐琼脂（5.2.7）.使其凝固和干燥，直到在其表面上没有可见的水分。
3试样放置
分别将试样尽可能平整的分开放置在凝固后的培养基中间如果试样厚度超过5mm，要用和试样大小相同尺寸的打孔器在琼脂打孔·并将试样放人琼脂孔中.打孔器应灭菌、如火焰灭菌。8.4试样接种
8.4.1孢子悬液的制备
按以下方法从培养好的孢子培养物中制备混合孢子悬液：在每个培养管中加人（见5.3.2）5ml.润混剂（5.2.1).用尤菌接种环轻轻刮取孢子培养基的表面以获取抢子悬液，轻轻摇动培养管分散孢子.将孢子悬液倒人含有10个～20个玻璃珠的无菌锥形瓶巾，按上述过程重复洗涤次，然后用振荡器（5.1.8）振荡每一个放有玻璃珠的饱了液·斤且通过一层薄薄的无菌棉或玻璃棉进行过滤.以消除残留的菌丝。按无菌操作离心过滤后的抱子悬液·弃去上清液，用50mL的营养盐济液（5.2.6）将沉淀物重新悬浮，再一次离心用100ml相同的溶液（5.2.6）悬浮沉淀物用计数板测定每种孢子恩液的浓度，饱子数应至少在5×10”个/mL。在使用前，将每种孢子悬液等量混合在一起.用振荡器（5.1.8）混勾：单个孢子悬浮液在4℃下至多可储存4d.在一18℃下至多可储存2个月，或在一196℃下至多可储存12个月8.4.2营养盐覆盖琼脂接种
加热溶化试管中的15ml营养盐琼脂（5.2.7）并放置在45℃~48℃水浴中.直到需要用时再取出使用前每管琼脂接种1ml.混合孢子悬液（见8.4.1）8.4.3试样的覆盖
在琼脂基底和试样表面倾注已接种溶化后的营养盐琼脂，从而形成薄薄的第二层，小心旋转培养Ⅲ使培养基分散均勾铺平。
8.4.4培养
将接种的培养置于21℃主1，相对湿度不低于85%的条件下培养21d8.4.5有效性控制
作为一个有效性控制.试验应包括一种末经防毒处理且已知易被测试菌侵蚀的对照样。对照样GB/T24128—2018/IS016869:2008应和试样按照相同的方法进行处理如果没有对照样，可采取以下步骤进行右效性控制。准备一个装有芽提取物琼脂（5.2.2）的琼脂平板.将接种的营养盐琼脂（8.4.2）覆盖其上，并按照试验样品的方法进行测试培养后.对照样或在友芽提取物琼脂上应可以明显观察到有霉菌生长。如果未见霉菌生长.应重复试验。
霉菌生长的评估
按照表1要求，日视评估每个试样表面及四周的菌生长情况。实践证明.切向观繁有助丁检测寄南的初期生长
表1霉菌生长情况
没有生长
霉菌生长情况
初期生长（与其余的琼脂表面相比）明显生长稚产生孢子
注：另外，虽然抑菌环不是本标准的测试项[似可以同时测量彩色照片是一种对目视检结果的有效记录，宜尽可能放人最终试验报告中。10
结果描述
根据表1中给出的霉菌生长等级，描述每个试样目视评估的结果，结果可按表2所示进行描述
精度和偏差
设有准长
需菌生长情况
防霉等级
该材料可抗霉菌设蚀
初期生长（与其余的琼脂长面相比）明能生长和产生拖子
该材料部分可防止毒菌侵蚀或一股不易受到需菌饺蚀
该材料容易受霉菌役蚀
如果某个样品的平行试验得出不同的等级，应用新的试样重复测试，自视检食的准确性取决于受过培训的检测人员此外：建议同时将结果拍照留证该方法的精确度是由国际生物腐蚀研究组（IBRC）的塑料保护小组（卫PG）经过8个循环对比试验后确定的，塑料保护小组（PPG）的任务是建立一个准确的、可再现的方法，用于评估添加在塑料中的防等剂的防霉效果。这些实验室问的研究进行了6年（1991一1997年），塑料保护小组（PPG）能够证明该方法适用丁塑料配方中防霉剂的防霉效果评估。而且·这些实验空间的研究结果表明，该方法具有良6
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中华人民共和国国家标准
GB/T24128—2018/ISO16869:2008代替GB/T241282009
塑料防霉剂的防霉效果评估
Plastics-Assessment of the effectiveness of fungistaticcompoundsinplasticsformulations（ISO16869:2008.IDT)
2018-12-28发布
国家市场监督管理总局
中国国家标准化管理委员会
2019-11-01实施
规范性引用文件
术语和定义
仪器和材料
试验样品
试样制备
试验步骤
霉菌生长的评估
结果描述
精度和偏差
试验报告：
参考文献
GB/T24128-—2018/ISO168692008前言
不标准按照GB/T1.12009给出的规则起草GB/T24128-—2018/IS016869:2008本标准代替GB/T24128—2009塑料防霉性能试验方法%，与GB/T24128--2009相比，主要技术变化如下：
修改了第1章\范围\的规定和适用范围.增加了试样厚度要求（见第1章，2009年版的1.1和1.2)：
删除了概要（见2009年版的第3章）；增加了术语和定义（见第3章）：删除了用途和意义（见2009年版的第1章）；一增加了原理（见第4章）：
将原来的第5章“仪器设备“和第6章“试剂和材料合并为第5章“仪器和材料\（见第5章，2009年版的第5章和第6章）；
修改了霉菌培养基将“马铃薯-蔗糖培养基\修改为“麦芽提取物琼脂和毛壳琼脂”（见第5.22009年版的6.5）；
修改了部分测试菌种（见5.3.1.2009年版的6.6.1)；修改了莓菌孢子接种方式（见8.4.2.2009年版的9.1)；—培养温度出原来\28%～30℃\修改为\21%士1\（见8.4.4.2009年版的9.2.1）；—培养时间由原来\28d\修改为\21d\（见8.4.4.2009年版的9.2.2)；一增加了有效性控制，制除了孢子活力检查（见8.4.5.2009年版的第7章）；防霉等级由原来的5个等级修改为3个等级（见第10章，2009年版的9.3）：一删除了“物理性能、光学性能、电性能的影响\（见2009年版的9.1)；一将“不确定度“修改为\精度和偏差“（见第11章，2009年版的第11章）本标准使用翻译法等同采用IS(）16869：2008塑料塑料防荐剂的防霉效果评估》。与本标准中规范性引用的国际文件有一致性对应关系的我国文件如下：GB/T2918—2018塑料试样状态调节利试验的标准环境（IS0291:2008.M0D）。为了便于使用.本标准还做了下列编辑性修改标注了测试菌种的中国普通微生物菌种保藏中心的菌株编号本标准由中国石油和化学工业联合会提出本标准由全国塑料标准化技术委员会老化方法分技术委员会（SAC/TC15/SC5)归口。本标准起草单位：广东省微生物研究所、广州合成材料研究院有限公司、金发科技股份有限公司、同轨科技成都有限公司、山东大环保科技有限公司、普天纳来科技（厦门）有限公司、广东迪美生物技术有限公司，北京大罡助剂有限任公司，上海润河纳米材料科技有限公司、泉州市隐形盾鞋服科技有限公司、晋江拓普旺防霉材料有限公司、浙江金海环境技术股份有限公司、北京票高纳米科技有限公司、宁波壹贰系科化塑胶技术有限公司、安阳北清科技创新研究院有限责任公司、中国有油化股份有限公司北京化工研究院、广州工业微生物检测中心。本标准主要起草人：谢小保、陈娟、宁凯车、昊继贤、王丽红、刘燃、陈宏愿、王浩江、刘罡、孙廷、顾海斌、林国栋、何水洞、俞剑、彭红芳、主峰、本李毕惠、李杰、李素娟、赵培静、周经纶、李维义、肖鹏GB/T24128-2018/IS016869:2008引言
众所周知·增塑剂以及塑料配方中的其他成分，易被细菌、酵母菌和寇菌等微牛物侵蚀·而菌是导致塑料质量下降最重要的原因。微生物俊蚀导致塑料质量下降.造成脆化以及变色。这种变质会造成重大的经济损失。
菌侵蚀的预防可以通过在配方中添加防霉剂的方式实现，防霉剂的功能是抑制塑料制品表面低何得菌的生长
本标准中所捕述的方法是用来确定塑料中添加防剂对试验等菌的防等效果GB/T24128-—2018/IS016869:2008塑料塑料防霉剂的防霉效果评估警示一一处理和操作具有潜在危险的微生物需要很高的技术能力·并必须遵守现行国家法律和条例。只有经过微生物学技术培训的人员才能进行这些检测工作，应严格执行相关的消毒、灭菌和个人卫生规范程序
1范围
本标准规定了一种确定塑料配方中用于保护如增塑剂、稳定剂等易感成分的防霉剂的防效果的武验方法。本方法可验证集种塑料制品是否能有效防止得菌的侵蚀通过目视检查评价防霉效果。
本标准适用丁由塑料制成的不超过10m厚的薄膜或片材。此外，如泡述塑料之类的多孔材料也可以在制成述形态时采用本方法进行测试防等剂在基体中要有一定的溶出性能与IS0）816不同.本标准不是在试样表面喷得菌孢子悬液.而是覆盖一层含孢子的琼脂。这样会更好地分散孢子，并且在原本具有疏水性的塑料表面工提供孢子萌发所必需的水分。2规范性引用文件
下列文件对丁本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用丁本义件。凡是不注期的引川文件·其最新版本（包括所有的修改单）适用丁本文件IS0291：2008塑料试样状态调节和试验的标准环境（PlastiesStandardatmospheresforcondition and testing)
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
易长霉塑料
plasticsusceptibletofungalattack配方中包含一个或多个可支持菌生长所需营养物质的塑料。3.2
防霉剂
fungistat
能够防止易感染霉菌材料表面霉菌生长的化合物4原理
将试样表面暴露在薄菌孢子悬浮液中，将孢子分散在测试样品表面的层薄的尤添加碳源的琼脂培养基中.这样能保证抱了均勾的分敢和适宜的水分供给。没有添加防链剂的塑料会导致霉菌孢子的萌发和初期生长，当塑料中有容易受霉菌侵蚀的组分并且在配方中没有添加有效的防等剂时，菌孢子将会在试样表面及其周围进一步生长并产生孢子，含有防霉剂的塑料将会抑制试样表面及其周围的孢子萌发和初期生长。防霉剂可以溶拍到试样周GB/T24128—2018/IS016869:2008周的琼脂中，产生一个史大的抑制抱子萌发和生长的抑菌环虽然抑菌环不作为测试结果评价指标：仍可以显尔防锂剂的抑菌效果5仪器和材料
采用下列方法之一将所有玻璃器Ⅲ和会接触到培养基和/或试剂的其他仪器进行火菌处理（无菌仪器除外：
方法A：使用高压蒸汽火菌锅（见5.1.2）.在121℃火菌至少15min；方法B：使用一个1热灭菌器（见5.1.2），在180℃灭菌至少30min.在170C灭菌至少1h，或在160℃灭菌至少2h；
方法C：使用孔径0.45um的膜过滤系统5.1.1培养箱.温度能保持在24℃1℃.相对湿度能保持在85%或以上，5.1.2灭菌设备
5.1.2.1混热杀菌，适宜的高压火菌锅，5.1.2.2
干热火菌·热烘箱需维持一个在方法B中指定的温度。脱过滤除菌，一种膜过滤装置·方法（中指定的孔径。分析天平，精确到土0.1mg。
实验室离心机.转速为2000r/min5000r/min。计数板（在显微镜下直接计数）。显微镜.放大倍数可达到100倍。pH计.精确度在土0.1pH单位.有温度校准功能涡旋振荡器转速为2000r/min~2500r/min玻璃容器：试管.烧瓶或容量适当的瓶子培养Ⅲl.直径90mm~100mm.深度至少15mm标准移液器，标准容量1.0ml.和15.0ml..经过校准的自动移液器标准量筒.最小容量30mL
玻璃珠.直径3mm~5mm。
5.2培养基和试剂
所有试剂应是分析纯级和/或适用于微牛物试验试剂5.2.1水
所使用的水应是蒸馏水或去离子水.电导率小于1uS/cm。5.2.2麦芽提取物琼脂（MEA）
芽提取物
大豆蛋门陈
定容补足至1000ml.
进行高儿蒸汽火菌（见5.1.2），火菌后，培养基的pH值应为7.0土0.22
球毛壳需琼脂
MgS0..7H,0
Fe.(SO,):H.O
酵母提取物
微纤维素
羧中基纤维素（钠盐）
水（5.2.1)
GB/T24128-2018/IS016869:2008定容补是至1000mL
进行高压蒸汽灭菌（见5.1.2)，灭菌后培养基的pH值应为7.2+0.25.2.4润湿剂
制备5%（m/V）吐温80（聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯）的储备液.用水稀释至0.05%（m/V）用于收集孢子
营养盐溶液和琼脂储备液
FeSO,.7H.0
ZnS0,7H.0
水（5.2.1)
定容补足至1000mL
在长期储存之前.应该将储备液通过膜过滤除菌。5.2.6
营养盐溶液
NaHPO2H0
MgSO,.7H.0
原液（5.2.5）
水（5.2.1)
定容补足至1000ml
进行高压蒸汽灭菌（见5.1.2）。灭菌后，培养基的pH值应为5.5土0.2。5.2.7
营养盐琼脂
NaHPO,2H.O
MgSO,7H,0
GB/T24128—2018/ISO16869:2008储备液（5.2.5）
水（5.2.1)bzxz.net
定容补足至1000ml
将准备好的培养基加热至琼脂溶化·然后测量温度并调节pH值到5.5主0.1.进行高压蒸汽灭菌（见5.1.2）
当没有有效的长期储存方法（超过3d）时琼脂平板应现配现用。火菌后的溶液至多存放3个月，储存时应防止水分蒸发。
微生物和培养
测试微生物
球毛壳霉
宛氏拟青霉
绳状青霉
长枝术
CGMCC3.3928或ATCC6275
CGMCC3.3601或ATCC6205
CGMCC3.4253或CBS628.66
CGMCC3.3875或ATCC9644
CGMCC3.4291或ATCC13631
根据产品用途和需要，可以增加其他测试霉菌（例如土曲霉、出芽短梗霉）.在试验报告中应列出使用的所有菌株。
注：CGMCC为中国普通改生物菌种保藏管理中心.ATCC为美国典型菌种保藏中心.CBS为荷兰微生物菌种保鼓中心。
5.3.2培养条件
在5.3.1.1和5.3.1.3至5.3.1.5中，应在试管中的麦芽提取物琼脂（5.2.2）斜面1培养菌株.在24℃±1~培养14d~21d。
在5.3.1.2中，应在球毛完霉琼脂（5.2.3）培养基十培养菌株.在24℃±1℃培养14d~21d。用于储存的培养物应保存在琼脂斜面上，最好是做成冻种或冷冻保存。6试验样品
形状和尺寸
将符合要求的切片器灭菌.根据需要从每个测试样品中切出直径1cm～4cm的圆片或边长1cm1cm的方片试样。试样的厚度不超过10mm，6.2
试样数量
每种测试样品至少制备3个试样进行测试评估7试样制备
7.1清洗
用镊子夹持测试样品.反复清洗（必要时用刷子）后存放在个净的容器中并自然晾1。使用镊子进行所有后续处理.以避免样品污染7.2标签和储存
在测试过程中标签或标记可能会与塑料相互作用.因此要在室温下将样品分开储存在密闭容器内4
（如培养m），标记容器而不足样品、8试验步骤
8.1试验温度
GB/T24128-—2018/IS016869:2008按照IS029：2008中2级大气条件温度23（士2℃和相对湿度（50士10）%制备租调节试样状态。
2倾注培养基
灭菌后.在每个培养血中倾注20mL营养盐琼脂（5.2.7）.使其凝固和干燥，直到在其表面上没有可见的水分。
3试样放置
分别将试样尽可能平整的分开放置在凝固后的培养基中间如果试样厚度超过5mm，要用和试样大小相同尺寸的打孔器在琼脂打孔·并将试样放人琼脂孔中.打孔器应灭菌、如火焰灭菌。8.4试样接种
8.4.1孢子悬液的制备
按以下方法从培养好的孢子培养物中制备混合孢子悬液：在每个培养管中加人（见5.3.2）5ml.润混剂（5.2.1).用尤菌接种环轻轻刮取孢子培养基的表面以获取抢子悬液，轻轻摇动培养管分散孢子.将孢子悬液倒人含有10个～20个玻璃珠的无菌锥形瓶巾，按上述过程重复洗涤次，然后用振荡器（5.1.8）振荡每一个放有玻璃珠的饱了液·斤且通过一层薄薄的无菌棉或玻璃棉进行过滤.以消除残留的菌丝。按无菌操作离心过滤后的抱子悬液·弃去上清液，用50mL的营养盐济液（5.2.6）将沉淀物重新悬浮，再一次离心用100ml相同的溶液（5.2.6）悬浮沉淀物用计数板测定每种孢子恩液的浓度，饱子数应至少在5×10”个/mL。在使用前，将每种孢子悬液等量混合在一起.用振荡器（5.1.8）混勾：单个孢子悬浮液在4℃下至多可储存4d.在一18℃下至多可储存2个月，或在一196℃下至多可储存12个月8.4.2营养盐覆盖琼脂接种
加热溶化试管中的15ml营养盐琼脂（5.2.7）并放置在45℃~48℃水浴中.直到需要用时再取出使用前每管琼脂接种1ml.混合孢子悬液（见8.4.1）8.4.3试样的覆盖
在琼脂基底和试样表面倾注已接种溶化后的营养盐琼脂，从而形成薄薄的第二层，小心旋转培养Ⅲ使培养基分散均勾铺平。
8.4.4培养
将接种的培养置于21℃主1，相对湿度不低于85%的条件下培养21d8.4.5有效性控制
作为一个有效性控制.试验应包括一种末经防毒处理且已知易被测试菌侵蚀的对照样。对照样GB/T24128—2018/IS016869:2008应和试样按照相同的方法进行处理如果没有对照样，可采取以下步骤进行右效性控制。准备一个装有芽提取物琼脂（5.2.2）的琼脂平板.将接种的营养盐琼脂（8.4.2）覆盖其上，并按照试验样品的方法进行测试培养后.对照样或在友芽提取物琼脂上应可以明显观察到有霉菌生长。如果未见霉菌生长.应重复试验。
霉菌生长的评估
按照表1要求，日视评估每个试样表面及四周的菌生长情况。实践证明.切向观繁有助丁检测寄南的初期生长
表1霉菌生长情况
没有生长
霉菌生长情况
初期生长（与其余的琼脂表面相比）明显生长稚产生孢子
注：另外，虽然抑菌环不是本标准的测试项[似可以同时测量彩色照片是一种对目视检结果的有效记录，宜尽可能放人最终试验报告中。10
结果描述
根据表1中给出的霉菌生长等级，描述每个试样目视评估的结果，结果可按表2所示进行描述
精度和偏差
设有准长
需菌生长情况
防霉等级
该材料可抗霉菌设蚀
初期生长（与其余的琼脂长面相比）明能生长和产生拖子
该材料部分可防止毒菌侵蚀或一股不易受到需菌饺蚀
该材料容易受霉菌役蚀
如果某个样品的平行试验得出不同的等级，应用新的试样重复测试，自视检食的准确性取决于受过培训的检测人员此外：建议同时将结果拍照留证该方法的精确度是由国际生物腐蚀研究组（IBRC）的塑料保护小组（卫PG）经过8个循环对比试验后确定的，塑料保护小组（PPG）的任务是建立一个准确的、可再现的方法，用于评估添加在塑料中的防等剂的防霉效果。这些实验室问的研究进行了6年（1991一1997年），塑料保护小组（PPG）能够证明该方法适用丁塑料配方中防霉剂的防霉效果评估。而且·这些实验空间的研究结果表明，该方法具有良6
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