本标准规定了食品中单辛酸甘油酯的气相色谱和气相色谱-质谱测定方法。 本标准适用于生湿面制品、糕点、焙烤食品馅料及表面用挂浆（仅限豆馅）、肉灌肠、辣条中单辛酸甘油酯的测定。

中华人民共和国国家标准
GB 5009.293—2023
食品安全国家标准
食品中单辛酸甘油酯的测定
2023-09-06发布
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
2024-03-06实施
1范围
食品安全国家标准
食品中单辛酸甘油酯的测定
本标准规定了食品中单辛酸甘油酯的气相色谱和气相色谱-质谱测定方法，GB
5009.293—2023
本标准适用于生湿面制品、糕点、焙烤食品馅料及表面用挂浆（仅限豆馅）、肉灌肠、辣条中单辛酸甘油酯的测定。
第一法　气相色谱法
2原理
生湿面制品中的单辛酸甘油酯用正已烷饱和乙腈提取，经乙睛饱和正已烷除脂，气相色谱测定，以保留时间定性，外标法定量。
豆馅、糕点、肉灌肠和辣条中的单辛酸甘油酯用正已烷饱和乙腈提取，经凝胶渗透色谱净化，气相色谱测定，以保留时间定性，外标法定量。3试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂
3.1.1无水乙醇(C2H。O)，色谱纯。3.1.2乙腈(CH3CN)，色谱纯。
3.1.3正已烷(C。H，4），色谱纯。3.1.4乙酸乙酯(CH3CooC2H5)、色谱纯。3.1.5环已烷（CeH1z），色谱纯。3.2试剂配制
3.2.1正已烷饱和乙、乙睛饱和正已烷：量取100mL乙睛（3.1.2）于250mL分液漏斗中，加入100mL正已烷，剧烈振摇数分钟，静置分层后，取下层即得正已烷饱和乙睛溶液，取上层即得乙腈饱和正已烷溶液。
3.2.2乙酸乙酯-环已烷（1+1）：将乙酸乙酯和环已烷按1：1的体积比混合均匀。3.3标准品
单辛酸甘油酯标准品(capryl
monoglyceride,CnH2204,CAS号：26402-26-6)，纯度≥98%，或经过国家认证并授予标准物质证书的标准品。3.4标准溶液配制
3.4.1单辛酸甘油酯标准储备液（10.0mg/mL)：准确称取0.1g（精确至0.0001g）单辛酸甘油酯标准1
GB5009.293—2023
品于10mL容量瓶中，用无水乙醇溶解并定容至刻度，混匀。将溶液转移至棕色玻璃瓶中，于-20℃保存，有效期6个月。
3.4.2单辛酸甘油酯标准中间液(1.0mg/mL)：吸取单辛酸甘油酯标储备液（10.0mg/mL)1mL于10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀，临用现配。3.4.3单辛酸甘油酯标准系列工作液：分别吸取单辛酸甘油酯标准中间液（1.0mg/mL)20μL、50μuL，及单辛酸甘油酯标准储备液（10.0mg/mL)10μuL、20μL、50μL和100μL，用无水乙醇分别配成浓度为0.0200mg/mL、0.0500mg/mL、0.100mg/mL、0.200mg/mL、0.500mg/mL、1.00mg/mL的单辛酸甘油酯标准系列工作液。临用现配。4仪器和设备
4.1气相色谱仪(GC)：带氢火焰离子化检测器(FID)。4.2凝胶渗透色谱仪(GPC)：相关参数见附录A。4.3电子天平：感量分别为0.1mg和0.01g4.4涡旋混合器。
4.5离心机。
4.6旋转蒸发仪。
氮吹仪。
4.8微孔滤膜(有机相）:0.22μm。4.9超声波发生器：功率为185W。5分析步骤
5.1样品前处理
5.1.1试样制备
取代表性样品约200g，生湿面制品和豆馅用研钵磨碎，糕点、肉灌肠和辣条用粉碎机粉碎，混合均匀，装入洁净容器后，于4℃密封保存。5.1.2提取
称取2g（精确到0.01g）试样于50mL离心管中，加入15mL正已烷饱和乙睛，涡旋混合1min，超声提取10min，以4000r/min离心5min，取全部上清液过滤至另一个50mL离心管中，残渣用15mL正已烷饱和乙睛重复提取一次，合并两次的提取液于同一50mL离心管中，准确吸取15mL生湿面制品提取液于50mL离心管中，待净化，准确吸取15mL豆馅、糕点、肉灌肠和辣条提取液至茄型蒸发瓶，于30℃~40℃旋转蒸发至约2mL，待凝胶色谱净化。5.1.3净化
5.1.3.1生湿面制品
以10mL乙睛饱和正已烷分两次5mL加入5.1.2中装有15mL生湿面制品提取液的离心管中每次涡旋1min，以4000r/min离心5min，弃去上层正已烷溶液，并将两次下层溶液转移至同一带刻度试管，于30℃~40℃氮吹至近干，用无水乙醇定容至2mL，过0.22μm有机滤膜，供气相色谱测定。5.1.3.2豆馅、糕点、肉灌肠和辣条将5.1.2中的豆馅、糕点、肉灌肠和辣条浓缩液全部转移至10mL容量瓶中，以6mL乙酸乙酯-环2
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已烷分两次（每次3mL）洗涤茄型蒸发瓶，将洗涤液合并至同一10mL容量瓶中，用乙酸乙酯-环已烷（1+1）定容至刻度，以0.22μm有机滤膜过滤。滤液经凝胶渗透色谱净化，收集洗脱液（凝胶渗透色谱条件可参考附录A），于30℃~40℃旋转蒸发至近干，用无水乙醇定容至1mL，过0.22μm有机滤膜，供气相色谱测定。www.bzxz.net
5.2仪器参考条件
气相色谱参考条件如下：
色谱柱：（35%-苯基）-甲基聚硅氧烷毛细管色谱柱，30m×0.25mm（内径）×0.25um（膜厚），或相当者。
升温程序：初始温度60℃，保持1min，以20℃/min升温至340℃，保持5min。b）
进样口温度：340℃。
检测器温度：340℃，氢气流量30mL/min，空气流量400mL/min，尾吹流量30mL/min。d)
载气：氮气，纯度≥99.999%,恒流模式，流速1.0mL/min。e）
进样方式：不分流进样，0.5min后开阀。f)
g）进样量：1.0μL。
5.3标准曲线的制作
将单辛酸甘油酯标准系列工作液分别注入气相色谱仪中，测定相应的单辛酸甘油酯峰面积，以标准工作液中单辛酸甘油酯的浓度为横坐标，以单辛酸甘油酯的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。单辛酸甘油酯标准溶液的色谱图参见附录B中图B.1。5.4定性测定
在5.2的仪器条件下，测定待测液和标准系列工作溶液，如果待测液中色谱峰的保留时间与标准溶液中的色谱峰保留时间相差不超过土2%，则可判断样品中存在单辛酸甘油酯。5.5试样溶液的测定
将试样溶液分别注入气相色谱仪中，得到单辛酸甘油酯的峰面积，根据标准曲线得到待测液中单辛酸甘油酯的浓度。
6结果计算
试样中单辛酸甘油酯的含量按式(1)计算。X=×V×1000× f
m×1000
式中：
一一试样中单辛酸甘油酯的含量，单位为克每千克(g/kg);X
一从标准曲线中得到的试样溶液中单辛酸甘油酯的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；p
V一一样品最终的定容体积，单位为毫升(mL);1000一一换算系数；
稀释倍数，本方法稀释倍数为2；试样取样的质量，单位为克(g)。计算结果保留3位有效数字。
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7精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。8其他
本方法的检出限为0.050g/kg，定量限为0.10g/kg。第二法气相色谱-质谱法
9原理
生湿面制品中的单辛酸甘油酯用正已烷饱和乙提取，经乙腈饱和正已烷除脂，气相色谱-质谱测定，采用选择离子监测模式SIM)，以保留时间和定性离子碎片的丰度比定性，外标法定量豆馅、糕点、肉灌肠和辣条中的单辛酸甘油酯用正已烷饱和乙腈提取，经凝胶渗透色谱净化，气相色谱-质谱测定，采用选择离子监测模式(SIM)，以保留时间和定性离子碎片的丰度比定性，外标法定量。10
试剂和材料
10.1试剂
同3.1。
10.2试剂配制
同3.2。
10.3标准品
同3.3。
10.4标准溶液配制
单辛酸甘油酯标准储备液（10.0mg/mL)：同3.4.1。10.4.1
10.4.2单辛酸甘油酯标准中间液（1.0mg/mL)：同3.4.210.4.3单辛酸甘油酯标准系列工作液：分别吸取单辛酸甘油酯标准中间液（1.0mg/mL)20μL、50μL，及单辛酸甘油酯标准储备液（10.0mg/mL)10μL、20μL、50μL和100μL，分别配成浓度为
mg/mL、0.200mg/mL、0.500mg/mL、1.00mg/mL的单辛酸0.0200mg/mL、0.0500mg/mL、0.100甘油酯基质标准溶液。临用现配。11
仪器和设备
11.1气相色谱-质谱仪(GC-MS)：配置电子轰击离子源(EI)。2凝胶渗透色谱仪(GPC)：相关参数见附录A。11.2
11.3电子天平：感量分别为0.1mg和0.01g。11.4涡旋混合器。
11.5离心机。
11.6旋转蒸发仪。
11.7氮吹仪。
11.8微孔滤膜（有机相）:0.22μm。11.9
超声波发生器：功率为185W。
12分析步骤
12.1样品前处理
同5.1，供气相色谱-质谱测定。12.2气相色谱参考条件
GB5009.2932023
色谱柱：（35%-苯基）-甲基聚硅氧烷毛细管色谱柱，30mx0.25mm（内径）×0.25μm（膜厚），12.2.1
或相当者。
12.2.2升温程序：初始温度60℃，保持1min，以20℃/min升温至340℃，保持5min。12.2.3进样口温度：340℃。
12.2.4载气：氢气，纯度≥99.999%，恒流模式，流速1.0mL/min。12.2.5进样方式：不分流进样，0.5min后开阀。12.2.6进样量：1.0μL。
12.2.7质谱参考条件
质谱参考条件如下：
a）离子源：电子轰击离子源(EI)。b）电离能量：70 eV。
c）离子源温度：230℃。
d）质谱接口温度：280℃。
e）扫描方式：选择离子监测(SIM)，监测离子为127、145、187、158，其中127为定量离子。f）溶剂延迟：5 min。
监测离子及相对丰度：见附录C。g)
12.3标准曲线的制作
将基质标准系列工作液分别注入气相色谱-质谱仪中，测定相应的单辛酸甘油酯峰面积，以标准工作液中单辛酸甘油酯的浓度为横坐标，以单辛酸甘油酯的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。单辛酸甘油酯标准溶液的色谱图参见附录B中图B.2。12.4定性测定
在12.2仪器条件下，试样待测液中色谱峰的保留时间与标准溶液中的色谱峰的保留时间相差不超过土2.5%，在质谱图中，所选择的监测离子均出现，且相对丰度与浓度相当的标准溶液相比，误差符合表1，则可判断样品中存在单辛酸甘油酯。表1相对离子丰度的最大允许误差相对丰度
允许的最大偏差
>20%～50%
>10%～20%
≤10%
5009.2932023
5试样溶液的测定
将待测液注入气相色谱-质谱仪中，测得单辛酸甘油酯的峰面积，根据标准曲线得到待测液中单辛酸甘油酯的浓度。
结果计算
试样中单辛酸甘油酯的含量按式（2)计算。X=p×V×1 000×f
m×1000
式中：
试样中单辛酸甘油酯的含量，单位为克每千克(g/kg);.(2)
一从标准曲线中得到的试样溶液中单辛酸甘油酯的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）)；一一样品最终的定容体积，单位为毫升(mL);1000一换算系数；
一一稀释倍数，本方法中稀释倍数为2；一试样取样的质量，单位为克（g）。计算结果保留3位有效数字。
14精密度
同第7章。
15其他
本方法的检出限为0.050g/kg，定量限为0.10g/kg6
附录A
凝胶渗透色谱参考分析条件
凝胶渗透色谱参考分析条件如下：a)
GB 5009.293—2023
色谱柱：400mm×25mm（内径），内装中性、多孔的聚苯乙烯二乙烯基苯微球体填料（粒径为38μm~75μm)），或相当的净化柱；流动相：乙酸乙酯-环已烷（1+1）；流速：5mL/min;
流出液收集时间：
10 min~30 min;
进样量：5mL。
5009.2932023
单辛酸甘油酯标准溶液的气相色谱图和气相色谱-质谱选择离子监测(SIM)图单辛酸甘油酯标准溶液的气相色谱图见图B.175000-
50000-
25000--
单辛酸甘油酯标准溶液（50
μg/mL）的气相色谱图
单辛酸甘油酯标准溶液的气相色谱-质谱选择离子监测(SIM)图见图B.2，
500000
200000
100000
200000
m/z127
m/z145
m/z158
m/z187
单辛酸甘油酯生湿面制品基质匹配标准溶液（50气相色谱-质谱选择离子监测(SIM)色谱图
-t/min
+t/min
μg/mL）的
化合物
单辛酸甘油酯
“定量离子。
单辛酸甘油酯的监测离子及相对丰度表c.1
单辛酸甘油酯的监测离子及相对丰度监测离子(m/z)
5009.293—2023
相对丰度/%
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