ICS 71.100.70 分类号：Y42 备案号：43649-2013 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 4617—2013 化妆品中黄芩苷的测定 高效液相色谱法 Determination of baicalin in cosmetics—High performance liquid chromatography 2013-12-31 发布 2014-07-01 实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：上海市质量监督检验技术研究院。 主要起草人：周泽琳、杨轶眉、顾宇翔、冯俊、王庆贺。 1 范围 本标准规定了采用高效液相色谱法测定化妆品中黄芩苷含量的方法。 本标准适用于水剂、乳剂类化妆品中黄芩苷的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样经75%乙醇涡旋振荡、超声提取、离心沉淀、过滤分离及必要的固相萃取净化后，采用反相高效液相色谱分离，使用二极管阵列检测器检测，以外标法进行定量分析。 4 试剂和材料 除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水应符合GB/T 6682—2008规定的二级水要求。 4.1 乙腈（色谱纯）。 4.2 乙醇。 4.3 体积分数为75%的乙醇溶液。 4.4 磷酸。 4.5 体积分数为0.1%的磷酸溶液。 4.6 甲醇。 4.7 甲酸。 4.8 黄芩苷：纯度不小于95%。 4.9 黄芩苷标准储备溶液：准确称取0.0500 g黄芩苷于250 mL棕色容量瓶中，用75%乙醇溶解并定容至刻度。该溶液浓度为0.200 mg/mL，置于4℃避光条件下可保存7天。 4.10 黄芩苷标准工作溶液：分别吸取标准储备溶液配制成浓度为0 μg/mL、1 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、40 μg/mL、100 μg/mL的系列标准溶液，置于棕色瓶中避光保存。 4.11 体积分数为5%的甲酸-甲醇溶液。 4.12 氢氧化钠。 4.13 质量分数为1%的氢氧化钠溶液。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪（配二极管阵列检测器）。 5.2 分析天平（感量0.1 mg）。 5.3 分析天平（感量0.01 g）。 5.4 棕色容量瓶（10 mL、100 mL、250 mL）。 5.5 具塞离心刻度试管（25 mL或50 mL）。 5.6 超声振荡器。 5.7 离心机（转速不小于8000 r/min）。 5.8 滤膜（孔径0.22 μm，材质可为聚四氟乙烯、聚偏氟乙烯或混合纤维素）。 5.9 涡旋振荡器。 5.10 阴离子交换固相萃取小柱。 5.11 氮吹装置。 5.12 移液管或移液器（2 mL、10 mL）。 6 分析步骤 6.1 样品处理 6.1.1 提取 称取样品1.00 g（精确至0.01 g）于具塞离心刻度试管中，加入75%乙醇溶液至约10.0 mL，涡旋振荡1 min，在30℃水浴中超声提取20 min。冷却至室温后补足至10.0 mL，以8000 r/min离心5 min，上清液经0.22 μm滤膜过滤备用。 6.1.2 净化（必要时） 当样品中存在干扰或需降低检出限时，采用阴离子交换固相萃取小柱进行净化。小柱先用5 mL甲醇和5 mL水活化，然后取上清液5 mL上样。上样后用5 mL甲醇洗涤，再用5 mL 5%甲酸-甲醇溶液洗脱。收集洗脱液，氮吹至干，用75%乙醇定容至1 mL并超声助溶，经0.22 μm滤膜过滤。 6.2 测定条件 高效液相色谱参考条件如下： 色谱柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）或等效柱； 流动相：乙腈与0.1%磷酸溶液按体积比22:78； 柱温：30℃。