DB23/T3778-2024
寒地野生大豆耐盐碱性鉴定技术规程

发布日期：2024-08-30
实施日期：2024-09-29
发布机构：黑龙江省市场监督管理局

前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由黑龙江省农业农村厅提出。本文件起草单位：黑龙江省农业科学院耕作栽培研究所。本文件主要起草人：刘建新、樊超、梁文卫、杨光、李炜、刘淼、毕影东、邸树峰、李估恺、张舒昱。

1 范围
本文件规定了寒地野生大豆耐盐碱性鉴定的术语和定义、鉴定溶液配制、芽期耐盐碱性鉴定、苗期耐盐碱性鉴定、耐盐碱性分级标准。本文件适用于寒地野生大豆种质资源的耐盐碱性鉴定。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 5520 粮油检验 发芽试验
DB23/T 2024 寒地野生大豆资源扩繁更新技术规程

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 野生大豆耐盐碱性：野生大豆对盐碱环境的敏感程度。

4 鉴定溶液的配制
4.1 基础盐碱液配制
配制1000mmol·L⁻¹的基础盐碱液1L：取36g NaCl，5.30g Na₂CO₃，37.80g NaHCO₃，63.90g Na₂SO₄，摩尔比为1:1:9:9，分别用无菌水溶解，过滤后定容至1L。经灭菌锅高压121℃、20min灭菌后，于4℃冰箱冷藏保存。
4.2 芽期胁迫盐碱液配制
芽期的盐碱溶液浓度为80mmol·L⁻¹，即取出80mL基础盐碱液用无菌水定容至1L。
4.3 苗期胁迫盐碱液配制
苗期的盐碱溶液浓度为200mmol·L⁻¹，即取出200mL基础盐碱液，用基础营养液定容至1L。
基础营养液盐分组成与浓度如下表所示：
表1 基础营养液组成
组分 | 盐分浓度 (mg·L⁻¹)
KNO₃ | 253.00
NH₄NO₃ | 40.00
KH₂PO₄ | 68.00
MgSO₄ | 120.50
C₁₀H₁₂N₂NaFe | 36.70
KI | 0.83
Ca(NO₃)₂ | 472.50
H₃BO₃ | 6.20
MnSO₄ | 22.30
ZnSO₄ | 8.60
Na₂MoO₄ | 0.50
CuSO₄ | 0.05
CoCl₂ | 0.05

5 芽期耐盐碱性鉴定
5.1 种子选择与处理
5.1.1 种子选择
选取收集或保存的寒地野生大豆，经单粒传的后代。
5.1.2 种子处理
按DB23/T 2024规定的方法对种子进行破皮处理。破皮后的野生大豆种子用75%的乙醇溶液浸泡1min，期间充分震荡以进行表面消毒。消毒后的种子用无菌水清洗3次，置于灭菌后的滤纸上吸干表面水分。
5.2 培养
5.2.1 播种
宜采用55mm直径的培养皿，将两层55mm直径的定性滤纸置于培养皿底部铺平，将处理好的种子每皿均匀摆放20粒。
5.2.2 胁迫处理
每皿加入3mL芽期胁迫盐碱液；对照组加入3mL无菌水。盖好盖子，做好标识，进行培养。每隔一天先将残余的水分吸走，用盐碱胁迫溶液冲洗滤纸2次，吸净残余水分后再补充3mL胁迫溶液；对照组则补充3mL无菌水。
5.2.3 培养条件
按照GB/T 5520标准在培养箱中进行暗培养，培养温度为25℃。
5.3 调查
5.3.1 发芽势
发芽势调查按GB/T 5520的规定执行。处理后第3d统计种子发芽数、计算发芽势，发芽标准为芽长达到种子长度一半以上。
5.3.2 发芽率
发芽率调查按GB/T 5520的规定执行。处理后第7d统计种子发芽数、计算发芽率，发芽标准为芽长达到种子长度一半以上。
5.3.3 芽长
培养7d时，测定种子芽的长度。
5.4 统计方法
5.4.1 统计值的计算
相对发芽势：盐碱处理发芽势与对照发芽势的比值；相对发芽率：盐碱处理发芽率与对照发芽率的比值；相对芽长：盐碱处理芽长与对照芽长的比值。
5.4.2 芽期耐盐碱度
野生大豆芽期耐盐碱度按以下公式计算：
STD = RGE + RGR + RFL
式中：STD为野生大豆芽期耐盐碱度；RGE为相对发芽势；RGR为相对发芽率；RFL为相对芽长。

6 苗期耐盐碱性鉴定
6.1 种子选择与处理
6.1.1 种子选择
种子选择方法同5.1.1。
6.1.2 种子处理
按DB23/T 2024规定的方法对种子进行破皮处理，破皮后的野生大豆种子用无菌水清洗3次。
6.1.3 催芽
在托盘中放置灭菌后的滤纸，加入无菌水保持滤纸湿润且无积水。将种子均匀铺在滤纸表面，托盘上覆盖保鲜膜保湿，置于培养箱中25℃催芽2d。