ICS65.120 B46 山东省地 DB37 方 饲料中氟虫睛的测定 标准 DB37/T3629—2019 液相色谱一串联质谱法 2019-07-23发布 山东省市场监督管理局 2019-08-23实施 发布 前言 1范围 2规范性引用文件 3原理. 4试剂或材料， 5仪器设备， 6样品. 7试验步骤. 7.1提取. 7.2净化， 7.3标准工作曲线的制备 7.4仪器测定 8试验数据处理 9精密度. 附 录A（资料性附录） 目 氟虫标准溶液图谱， 次 DB37/T36292019 II 2 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。DB37/T3629—2019 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准负责起草单位：山东省饲料质量检验所，青岛市华测检测技术有限公司。本标准主要起草人：张芸、刘涛、刘雪芹、孙延军、莫贞峰、李斌、李俊玲。II 1范围 饲料中氟虫睛的测定 本标准规定了饲料中氟虫睛的测定方法。DB37/T36292019 液相色谱一串联质谱法 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和植物源饲料原料中氟虫的测定。本标准氟虫睛的检出限为0.002mg/kg，定量限为0.005mg/kg2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料：试样的制备3原理 样品用乙晴提取，经C18固相萃取柱、液液分配净化后，液相色谱串联质谱仪测定，外标法定量。4试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。4.1水：GB/T6682，一级。 4.2甲醇：色谱纯。 4.3乙睛：色谱纯。 4.4乙酸铵：色谱纯。 4.5甲酸：色谱纯。 4.6 80%乙腈水溶液：将80mL乙腈与20mL水混合均匀。4.780%甲醇水溶液：将80mL甲醇与20mL水混合均匀。4.80.1%甲酸水溶液（含4mmo1/L乙酸铵）：称取0.308g乙酸铵于适量水中，准确加入甲酸1mL，用水定容至1000mL。 4.9氟虫睛标准储备液（1mg/mL）：称取氟虫腊对照品（CAS：120068-37-3，纯度不低于98.7%）10mg（准确至0.01mg）于10mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.2)溶解定容。-18℃避光保存，有效期为1年。 4.10 氟虫晴标准工作液T（100ug/mL）：准确移取氟虫睛标准储备液（4.8）1mL于10mL棕色容量瓶中，用甲醇稀释定容。2～8℃保存，有效期为1个月。氟虫睛标准工作液II（1μg/mL）：准确移取氟虫睛标准工作液I（4.9）0.1mL于10mL棕色容4.11 量瓶中，用单醇稀释定容。2～8℃保存，有效期为1个月。4.12Cis固相萃取柱：1000mg/6mL，或性能相当者。1 4.13 微孔滤膜：0.22um，有机系。 5仪器设备 5.1液相色谱一串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。5.2电子天平：感量0.0001g和0.01mg。5.3旋涡混合器。 5.4离心机：转速不低于10000r/min。5.5固相萃取装置。 5.6超声波振荡器。 氮吹仪。 5.7 6样品 DB37/T36292019 按GB/T20195制备样品，至少200g，粉碎过0.42mm孔径的分析筛，充分混匀，装入磨口瓶中避光保存备用。 7试验步骤 7.1提取 平行做两份试验。称2g（准确至0.01g）样品于50mL离心管，准确加入25mL乙（4.3），振荡提取20min，4500r/min离心5min，取上层乙2.5mL于15mL的离心管，加入0.5mL水，涡旋混匀待用。 7.2净化 Cs固相萃取柱分别用6mL乙睛和6mL水活化，接收加载液，于50mL离心管中，近白然滴干时，再加入12mL80%乙睛水（4.6），并同时接收于上述离心管中，加入约1.5gNaC1使上述溶液饱和，振荡，4500r/min离心5min，取上层乙晴层浓缩至于。准确加入4mL80%甲醇水（4.7）溶液定容，过0.22m滤膜，待测。 7.3标准工作曲线的制备 准确量取适量标准工作液，用80%甲醇水溶液（4.7）稀释成浓度分别为0.1、0.2、0.5、1.0、5.0μg/L的标准溶液，现用现配，供液相色谱-串级质谱仪测定，对于基质效应较大的样品，采用基质空白溶液配制标准溶液进行定量。7.4仪器测定 7.4.1液相色谱参考条件 色谱柱：BEHCis柱，长50mm，内径2.1mm，粒径1.7um，或性能相当者。柱温：40℃。 流速：0.3mL/min。 进样量：1μL。 流动相：A为甲醇（4.2）：B为0.1%甲酸水溶液（4.8），梯度洗脱条件见表12