DB12/T795-2018 生活饮用水中5种人工合成甜味剂的测定液相色谱-串联质谱法 前言 本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》编制，由天津市卫生和计划生育委员会提出并归口。起草单位为天津市疾病预防控制中心，主要起草人：夏义平、张明几、张维、H光、永民。 1 范围 本标准规定了液相色谱-串联质谱法测定生活饮用水中5种人工合成甜味剂（安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖）的原理、测定方法、检出限、准确度和精密度。适用于生活饮用水中上述甜味剂的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对本标准的应用不可或缺：GB/T6682《分析实验用水规格和试验方法》等。凡注日期的引用文件，仅注日期的版本适用；凡不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修订单）适用。 3 原理 生活饮用水中的安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖经固相提取浓缩后，通过反相色谱柱分离，电喷雾离子源电离，多反应监测（MRM）检测，采用外标法进行定量。 4 试剂和材料 4.1 试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的水。 4.2 安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖标准品纯度≥99%，具体信息见附录A。 4.3 甲醇（CH3OH）、乙腈（CH3CN）：色谱纯。 4.4 Tris盐酸盐、磷酸、乙酸铵：优级纯。 4.5 甲醇-水（1:1）：量取100 mL甲醇，加100 mL水混合。 4.6 标准储备液：称取5种标准品各10.0 mg，置于10 mL容量瓶中，加入甲醇-水（1:1）定容至刻度，浓度1.0 mg/mL，-18℃避光保存，可稳定12个月。 4.7 混合标准工作液：取适量储备液，用甲醇-水（1:1）配制成适当浓度，使用前配制。 4.8 固相萃取柱：6 mL, 200 mg。 4.9 膜过滤器：0.45 μm。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱-质谱/质谱仪，配电喷雾离子源（ESI）。 5.2 可调流速真空泵，流速1~20 mL/min。 5.3 浓缩仪及浓缩管。 5.4 氮吹仪。 6 水样的采集与保存 开启水龙头放水数分钟后，采集500 mL水样于聚内烯瓶中，用磷酸调pH至2，在4℃冰箱保存。测定前放至室温并用0.45 μm膜过滤。 7 测定步骤 7.1 样品预处理：用5 mL甲醇与5 mL水活化固相萃取柱，将样品以4 mL/min通过柱，洗涤后于40℃氮吹至近干，再用50%甲醇-水定容至1 mL。 7.2 测定参考条件： 7.2.1 液相色谱条件 色谱柱：ISST3, 2.1 mm × 100 mm, 1.7 μm。 流动相：A为甲醇，B为10 mmol/L乙酸铵（含2 mmol/L Tris），梯度洗脱条件见表1。 流速：0.3 mL/min。 柱温：35℃。 进样量：5 μL。 7.2.2 质谱条件 电离方式：电喷雾负离子模式（ESI），毛细管电压：2.3 kV。 时间参数及其他条件按照表中设定进行。