ICS65.020.30 CCSB41 DB65 新疆维吾尔自治区地方标准 牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验鉴别诊断方法 DB65/T4666-2023 A differential identification method of native hapten agar gel immuno-diffusion test for brucellosis of bovine and sheep 2023-07-20发布，新疆维吾尔自治区市场监督管理局，2023-09-20实施 前言 本标准按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草，由新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站提出，新疆维吾尔自治区畜牧兽医局归口并组织实施。起草单位包括新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站、新疆畜牧科学院兽医研究所（动物临床医学研究中心）、中国动物卫生与流行病学中心、青岛瑞尔唯特生物技术有限公司。主要起草人包括李岩、刘丽娅、易新萍、山莉莉、曹瑞、马晓菁、金庭辉、屈勇刚、叶锋、刻文亮、钟发刚、施远翔、张家瑞、张力、爲鑫、股涛、宋洁、张旭、张子荣、连晓春、何立雄。实施应用中的疑问请咨询新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站。 1 范围 本标准规定了牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验（NH-AGID）的方法，包括术语和定义、生物安全要求、仪器设备、试剂、检测步骤及结果判定。本标准适用于新疆维吾尔自治区范围内布鲁氏菌A19-△VirB12株、A19株和M5株疫苗免疫区牛羊布鲁氏菌病血清学检测。NH-AGID试验在牛羊免疫2个月后，可区分布鲁氏菌疫苗免疫抗体与感染抗体，并判定感染动物的布鲁氏菌活动（排菌）状态。 2 规范性引用文件 下列文件为本标准必不可少的条款。注日期的引用文件，仅所注日期版本适用；不注日期的引用文件，其最新版本（含修改单）适用。 - GB/T18646 动物布鲁氏菌病诊断技术 - GB19489 实验室生物安全通用要求 - NY/T541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 3.1 布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验（native hapten agar gel immuno-diffusion test, NH-AGID） 布鲁氏菌外膜光滑型脂多糖（S-Lipopolysaccharide, S-LPS）和天然半抗原（Native Hapten, NH）为布鲁氏菌抗原的重要检测标识物。S-LPS为优势抗原，可刺激动物产生抗体；NH抗原在布鲁氏菌活动期或排菌期持续刺激动物产生NH抗体。NH-AGID试验中通过NH沉淀线，可鉴别疫苗免疫动物与感染动物，并判断感染动物的布鲁氏菌活动状态。 4 缩略语 - NH：天然半抗原（Native Hapten） - S-LPS：光滑型布鲁氏菌脂多糖（Smooth Lipopolysaccharide） - NH-AGID：天然半抗原琼脂扩散试验（Native Hapten Agar Gel Immuno-Diffusion test） - RBT：虎红平板凝集试验（Rose Bengal Test） - iELISA：间接酶联免疫吸附试验