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基本信息

标准号: DB21/T 1861.4-2010

中文名称:水产生物种质检验技术规程 简单重复序列扩增法

所属省份:辽宁省地方标准(DB21)

标准状态:现行

发布日期:2010-12-31

实施日期:2011-02-01

出版语种:简体中文

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标准分类号

标准ICS号:67.120.30

中标分类号:B50

相关单位信息

起草人:赫崇波、李宏俊、高祥刚、刘卫东、李云峰、鲍相渤

起草单位:辽宁省海洋水产科学研究院

归口单位:辽宁省海洋与渔业厅

发布部门:辽宁省质量技术监督局

标准简介

本标准提供了水产生物种质检验技术规程,包括使用简单重复序列扩增法(SSR)进行水产生物基因检测的详细步骤和方法,涉及PCR扩增、数据分析及遗传距离测量等技术。

部分标准内容

本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草,由辽宁省海洋水产科学研究院提出,并归口于辽宁省海洋与渔业厅。标准主要起草人包括赫崇波、李宏俊、高祥刚、刘卫东、李云峰、鲍相渤。标准适用于水产生物种质检测与鉴定工作,采用简单重复序列扩增法(SSR)进行水产生物的基因检测。 本标准规定了术语定义、原理、试剂、仪器、取样、DNA提取、微卫星引物筛选、PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶检测产物、数据统计及水产生物种质检验分析评价的相关要求。 规范性引用文件包括GB/T18654.15-2008《养殖鱼类种质检验 第15部分:RAPD分析》。 术语定义: 1. 简单重复序列(SSR):也称为微卫星,是指基因组中由短的重复单元(1~6个碱基)组成的DNA串联重复序列。 2. 聚合酶链式反应(PCR):一种分子生物学技术,用于放大特定DNA片段。 3. 脱氧核苷酸(DNA):由脱氧核苷酸磷酸酯组成的分子,是基因组中的基本构件。 4. 等位基因(allele):基因的变异体,每个基因位点有两个等位基因,分别来自父母。 5. 基因型(genotype):指特定座位的等位基因组成。 6. 座位(locus):染色体上的位点。 本标准详细描述了微卫星扩增法的原理,其中微卫星的重复单位数目存在高度差异,且其侧翼序列通常是保守的单一序列,可以用于设计引物扩增微卫星位点,进而获得长度上的多态性。 标准中的试剂包括裂解液、三羟甲基氨基甲烷饱和酚(Tris饱和酚)等,具体配制方法详见附录A。

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