ICS01.120
DB34
安徽省地方标准
DB34/T3488—2019
猪链球菌的分子分型MLST方法
Multilocus sequence typing detection method for Streptococcus suis
2019-12-25发布
安徽省市场监督管理局
2020-01-25实施

前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽浩翔农牧有限公司提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：安徽浩翔农牧有限公司、安徽冠华农牧有限公司、安徽杜洛克种猪育种有限责任公司、安徽农业大学、安徽省动物疫病预防与控制中心、阜阳市动物卫生监督所、怀宁县动物疫病预防与控制中心、巢湖市畜牧兽医局、六安市动物疫病预防与控制中心。
本标准主要起草人：高亚飞、占松鹤、何长生、谢玉洁、程竹兵、李春芬、程圣芳、段倩倩、李郁孙装、袁献宇、刘雪兰、徐小伟、高亚成。

1 范围
本标准规定了猪链球菌的分子分型MLST的术语和定义、试剂和材料、仪器和设备、操作步骤、生物安全和防污染措施。
本标准适用于猪链球菌的分子分型检测。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682：分析实验室用水规格和试验方法
GB19489：实验室生物安全通用要求
GB/T27401：实验室质量控制规范
动物检疫
DB34/T2996：猪链球菌检验操作规程

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 MLST (multilocus sequence typing)：一种基于核酸测序的细菌分型方法，通过PCR扩增多个管家基因内部片段，测定其序列，分析菌株的变异，从而进行分型。
3.2 管家基因 (house-keeping genes)：在大多数情况下持续表达。

4 试剂和材料
4.1 实验用水符合GB/T6682中一级水的要求。
4.2 除有特殊说明外，所有实验用试剂均为分析纯，应用无DNA酶污染的容器分装。
4.3 细菌基因组DNA提取试剂盒。
4.4 普通琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒。
4.5 Taq DNA酶。