DB34/T3987—2021 禽白血病病毒细胞培养分离检测技术规程
Technical regulations for cell culture, isolation and detection of avian leukemia virus

安徽省地方标准
发布日期：2021-09-03
实施日期：2021-10-03

前言
DB34/T3987-2021
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。本文件由安徽省农业农村厅归口。
本文件起草单位：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、桐城市畜牧兽医管理中心、合肥市动物疫病预防与控制中心、肥西县农业综合行政执法大队、滁州市动物疫病预防与控制中心、望江县畜牧兽医技术推广中心、宣城市动物防疫站、安徽省动物疫病预防与控制中心、安徽省新联禽业股份有限公司、阜南县农业农村局、池州市动物疫病预防与控制中心。
本文件主要起草人：沈学怀、王华付、司宏富、董先敏、季晶晶、胡江苗、程帮照、潘孝成、戴银、张丹俊、尹磊、赵瑞宏、胡晓苗、钱昌银、刘华、陈辉、翟银建、江美莲。

1 范围
本文件规定了禽白血病病毒细胞培养分离检测的血浆、精液、蛋清和肛拭子样品处理与接种、细胞样品的检测等技术内容和要求。本文件适用于禽白血病净化中血浆、精液、蛋清和肛拭子样品中禽白血病病毒的细胞培养分离检测。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件：
GB/T 26436 禽白血病诊断技术
GB/T 36873 原种鸡群禽白血病净化检测规程
NY/T 680 禽白血病病毒P27抗原酶联免疫吸附试验方法

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 禽白血病病毒 (avian leukemia virus, ALV)：属于反转录科的α反转录病毒属。ALV可分为A、J等10个亚群，其中A、B、C、D、E和J亚群病毒与鸡的禽白血病相关，可诱发鸡不同组织的良性和恶性肿瘤。A、B、C、D和J亚群属外源性病毒，与禽白血病的不同类型肿瘤发病相关。E亚群病毒为内源性病毒，其致病性很低或没有致病性。
3.2 鸡胚成纤维细胞系 (chicken embryo fibroblast cell line DF-1)：为鸡胚成纤维细胞的自发永生化细胞系。

4 接种样品的准备
4.1 血液样品的准备
4.1.1 血液的采集
用消毒酒精棉球对鸡翅下静脉部位进行消毒，使用1mL一次性注射器或真空采血管进行采血，使用1mg/mL肝素钠作为抗凝剂。使用1mL注射器时先吸入0.1mL肝素钠，采血至1mL，或使用含肝素钠抗凝剂的真空采血管采血1~2mL。