ICS 65.150 B52 DB13 河北省地方标准 DB13/T 1415—2011 鱼类寄生虫性疫病诊断技术规程 Diagnosis protocol for parasite epidemics of fish 2011-06-15发布 河北省质量技术监督局 2011-06-30实施 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由河北省水产局提出。 本标准起草单位：河北省水产养殖病害防治监测总站。 本标准主要起草人：张志华、侯金良、李同庆、康辰香、孙伟彬、石洁卿、马瑞欣、邵铁凡、寇景。 1 范围 本标准规定了鱼类寄生虫性疫病即小瓜虫病、刺激隐核虫病、粘孢子虫病、三代虫病、指环虫病的诊断技术。 本标准适用于上述寄生虫病的诊断。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 OIE《水生动物疾病诊断手册》 3 通则 3.1 材料和试剂 3.1.1 材料 普通光学显微镜、双筒解剖镜、放大镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术刀、手术剪、解剖针、吸水纸、培养皿、滴管、解剖盘等。 3.1.2 试剂 0.85%生理盐水、30%人工配制海水、4%～5%和10%福尔马林、70%酒精、硝酸银、甘油胶陈、肖氏液、聚乙烯醇。 配置试剂用水应符合GB/T 6682的要求。 3.2 采样量 用于检查诊断的鱼应有一定数量，采集样品至少5尾～10尾，也可按照OIE《水生动物疾病诊断手册》采样方法进行采样，见附录A。 3.3 样品及运输 用于实验室检查的病鱼应为活体，运输时应加注原池水进行活体运输，每个容器只装运同一种病鱼，并采取充氧、降温等措施。 3.4 病原体计数 按不同感染部位采集组织进行观察，记录显微镜检查倍数及该倍数下虫体数量。孢囊以统计方式表示，虫体数为同一玻片3个视野平均值。 4 小瓜虫病 4.1 病原种类特征 见附录B。 4.2 现场样品目检 病鱼体色发黑、消瘦、游动异常，体表或鳃上可见约1mm小白点，严重时体表有大量黏液。刮取白点或黏液置于生理盐水中，静置1～2min，在光照下观察，如见白色小圆球缓慢游动且多集中于水滴边缘，可初步确诊。 4.3 实验室检测及标本保存 4.3.1 体表：刮取体表黏液置载玻片，加生理盐水压片，在显微镜或解剖镜下检查。 4.3.2 鳍：剪取各鳍置载玻片，加生理盐水压片检查；如有白点或溃烂部位同法处理。 4.3.3 鳃：剪取鳃组织置载玻片，加生理盐水压片检查，如有白点或孢囊则重点观察。 4.3.4 虫体收集保存：见附录C。 4.4 结果判定 40倍显微镜下平均每视野小瓜虫计数≥10个，判定为小瓜虫病；不足10个判定为小瓜虫感染。 5 刺激隐核虫病 5.1 病原种类特征 见附录B。 5.2 现场样品目检 诊断时滴加试剂为30%人工配制海水，其余步骤同4.2。 5.3 实验室检测及标本保存 诊断时滴加试剂为30%人工配制海水，其余步骤同4.3。 5.4 结果判定 40倍显微镜下平均每视野刺激隐核虫计数≥10个判定为刺激隐核虫病；不足10个判定为刺激隐核虫感染。 6 粘孢子虫病 6.1 病原种类特征 见附录B。 6.2 现场样品目检 粘孢子虫多寄生于鱼体表、鳃、肠道及体腔，可见白点状或白色瘤状孢囊，形状大小不规则，灰白不透明。取孢囊置载玻片，加生理盐水压片，如破裂并流出乳白色液体，可初步诊断为粘孢子虫病。 6.3 实验室检测及标本保存