DB46/T700—2025《芒小果普瘦蚊检疫鉴定规范》由海南省市场监督管理局发布，2025年9月1日实施。本文件由海南省农业农村厅提出并归口，起草单位为中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，主要起草人包括韩冬银、王建赞、叶政培、李磊、符悦冠、张方平、赵菁、邱海燕。本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》起草。 1 范围 本文件规定了植物检疫中芒小果普瘦蚊的检疫鉴定方法，包括方法原理、器材和试剂、鉴定特征、现场检疫、室内检测、结果判定、标本保存及档案管理。本文件适用于芒小果普瘦蚊的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件通过文中规范性引用构成本文件必不可少的条款，其中注明日期的引用文件仅该日期对应版本适用，不注明日期的引用文件，其最新版本（包括修改单）适用：SN/T2122《进出境植物及植物产品检疫抽样方法》。 3 术语和定义 3.1 芒小果普瘦蚊（mango fruit-feeding gall midge）：学名Procontarinia fructiculi Jiao, Wang, Bu & Kolesik，隶属于双翅目Diptera、瘘蚊科Cecidomyiidae、普瘦蚊属Procontarinia，为害芒果的一种害虫。芒小果普瘦蚊生物学特性见附录A。 4 方法原理 鉴定以芒小果普瘦蚊的形态特征为主要依据，COI基因序列特征为辅助依据。相关序列在GenBank系统中的编号为MG637425、MG637426。 5 器材和试剂 5.1 器材：PCR仪、电泳仪、紫外分光光度计、凝胶成像系统、冰箱、低温冰箱、制冰机、水浴锅、离心机、电子天平、微量加样器、体视显微镜、相机、放大镜、小毛笔、镊子、剪刀、白瓷盘、解部针、指形管标签等。 5.2 试剂：TE缓冲液、Tris-盐酸、EDTA、氯化钠、蛋白酶K、氯仿、异戊醇、无水乙醇、75%乙醇、Taq聚合酶、琼脂糖、DNA提取试剂盒、PCR反应试剂盒等。 6 鉴定特征 6.1 普瘦蚊属形态特征：雄成虫触角具12个鞭小节，第1和第2鞭小节融合呈双结状，端结和基结大小接近，上具一圈发达的大环状环丝，颈部相对较长；雌成虫触角大多呈单结状，结部具带状环丝，颈部较雄虫短。翅R脉在基部前半段与C脉汇合，Cu脉分叉，雄器端部锥状或平钝，着生小感觉孔。肛下板通常宽大愈合，端缘中央略微凹陷。 6.2 芒小果普瘦蚊形态特征：产卵器具有一定伸缩性或不可伸缩，整体愈合或部分分离，宽圆但不分瓣。成虫形态特征及雄成虫各部位特征示意图见附录B。