DB64/T1511—2017
宁夏回族自治区地方标准
葡萄及葡萄酒中花色苷的测定 高效液相色谱法

发布日期：2017-11-01
实施日期：2018-02-01
发布单位：宁夏回族自治区质量技术监督局

前言
本标准按照 GB/T 1.1-2009 规定的编写规则起草。本标准由宁夏农林科学院提出，宁夏葡萄酒产业发展局归口。
本标准起草单位：宁夏农产品质量安全检测技术研究所、宁夏农林科学院。
本标准参加起草单位：宁夏国有林场和林木种质资源保护工作总站、西北农林科技大学食品与生物工程学院、中卫市农产品质量安全检验检测中心。
本标准主要起草人：葛谦、刘冰、路洁、赵了丹、陈杭、卡艳、张艳、工晓蓓、袁亚宏、吴燕、张锋锋、苟春林、陈翔、魏晓琴。

1 范围
本标准规定了采用高效液相色谱法测定葡萄及葡萄酒中飞燕草色素、矢车菊色素、矮牵牛色素、天竺葵色素、芍药色素和锦葵色素的方法，其中包括原理、试剂和材料、仪器与设备、分析步骤、结果计算及精密度。
本标准适用于葡萄及葡萄酒中 6 种花色苷的测定。
本标准的方法检出限：矮牵牛色素、锦葵色素的检出限均为 0.040 mg/kg；矢车菊色素、芍药色素、飞燕草色素、天竺葵色素的检出限均为 0.020 mg/kg。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6379.1 测量方法 结果的准确度（正确度与精度）第1部分：总则与定义
GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性再现性的基本方法
GB/T 6682 分析实验用水的规格和试验方法

3 原理
试样经过乙醇+水（2+1+1，V/V）的强酸溶液超声波萃取后，经沸水浴中加热 1 小时，将结合态的花色苷水解成花色苷，采用高效液相色谱法测定，以保留时间定性，峰面积外标法定量。

4 试剂和材料
除非另有规定，本法所使用试剂均为分析纯。
4.1 水：GB/T 6682 规定的 3 级水
4.2 无水乙醇 (C₂H₅OH)：色谱纯
4.3 甲醇 (CH₃OH)：色谱纯
4.4 磷酸 (H₃PO₄)：优级纯
4.5 盐酸 (HCl)：优级纯
4.6 提取液：无水乙醇 + 水 + 盐酸 (2+1+1，V/V)，取 200 mL 无水乙醇、100 mL 水和 1 mL 盐酸混合。
4.7 10% 盐酸甲醇溶液 (V/V)：或 10 mL 盐酸、90 mL 乙醇混匀。
4.8 飞燕草素 (Delphinidin)：CAS 号 528-53-0，纯度 96%
4.9 矢车菊素 (Cyanidin)：CAS 号 528-58-5，纯度 $ge$ 98%
4.10 矮牵牛色素 (Petunidin)：CAS 号 1429-30-7，纯度 $ge$ 96%