本标准规定了化学品固有生物降解性：赞恩-惠伦斯试验的方法概述、试验准备、试验程序、质量保证与质量控制、数据与报告。 本标准适用于测定可溶于水的、非挥发的、无强吸附性的、不因溶液发泡而损失的、对试验浓度下对微生物无抑制作用的化学品的固有生物降解性。 GB/T 21816-2008 化学品 固有生物降解性 赞恩-惠伦斯试验 GB/T21816-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net
本标准规定了化学品固有生物降解性：赞恩-惠伦斯试验的方法概述、试验准备、试验程序、质量保证与质量控制、数据与报告。 本标准适用于测定可溶于水的、非挥发的、无强吸附性的、不因溶液发泡而损失的、对试验浓度下对微生物无抑制作用的化学品的固有生物降解性。
本标准等同采用经济合作与发展组织(OECD)化学品测试导则No.302B(1992年)《赞恩?惠伦斯试验》(英文版)。
本标准做了下列编辑性修改:
---将计量单位改为我国法定计量单位。
本标准的附录A 为资料性附录。
本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会(SAC/TC251)提出并归口。
本标准负责起草单位:环境保护部化学品登记中心。
本标准参加起草单位:环境保护部南京环境科学研究所、沈阳化工研究院安全评价中心、上海市检测中心。
本标准主要起草人:刘纯新、卢玲、聂晶磊、刘济宁、石利利、侯松嵋、赵华清。

ICS 13. 300;13,020,40
民共利国家标
GB/T 21816—2008
化学品
固有生物降解性
赞恩-惠伦斯试验
Chemicals---Inherent -hiodegradability-Zahn-Wellens test080927000241
2008-05-12发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标滙化管理委员会
2008-09-01实施
2008年10月178年年
GB/T 21816-2008
本标准等向采用经济合作与发展组织（OECD)化学品测试导测No.302B(1992年）《赞恩·惠伦斯试验》英文版）。
本标准做了下列编辑性修改：
将计景单位改为我国法定计量单位。本标准的附录A为资料性附录：
本标准由金国危险化学品管理标准化技术委员会(SAC/TC251)提出并归口。本标雅负责起草单位：环境保护部化学品登记中心。本标滑参加起草单位：环境保护部南京环境科学研究所、沈阳化工研究院安余评价中心、上海市检測中心。
本标准主婴起草人：刘纯新、卢玲、豪晶磊、刘济宁、石利利、侯松媚、赵华清。I
化学品固有生物降解性
恩-惠伦斯试验
GB/T 21816--2008
本标准规定了化学品固有生物降解性赞恩·惠伦斯试验的方法概述、试验准备、试验程序、质量保证与质量控制，数据与报告。
本标推适用于测定溶于水的（水中质量欲度不低于50丑/L，以DOC计),非挥发的、无强吸附性的、不因溶液发泡面损失的、对试验浓度下对微生物无抑制作用的化学品的固有生物降解性。2术语和定义
“列术语和定义适用于本标。
同有生物降解性inlierentbiodegradanility最佳试验条件下，受试物长时间与接种物接触表现出的生物降解潜力。2.2
初级生物降解primarybiodegradation受试物在生物作用下化学结构发变化致使特性丧失的过程。2.3
总有机碳total organic carhon;T'or试验介质（包括溶液和悬浮液）中有机戳的总量。2.4
dissolved nrganic carhon;DOC溶解性有机碳
溶液中有机炭的含量,常措通过 0.4 um 滤膜过滤后液体中的有机碳含，或经4 000 r/min转遵离心15mi后上清中的有机磁含量，2.5
化学寧量chemical oxygen demand;Con在强酸并加热条件下，一定量的重铬酸盐氧化水样中还原性物质所消耗氧化剂的，可衰示为每烹克受试物消耗的氧气馨克数（mg/mg）。3受试物信息下载标准就来标准下载网
a）有机饿含量；
b）水中溶解度；
e）蒸气压；
d）发泡性，
e）微仕物性：
f）吸附性；
g）结构式。
GB/T 21816—2008
4方法概遂
A.1原理
含有受试物的试验培养基加人一定量的接种物，于20℃～25℃在散射光或黑暗中对试验溶液搅拌、爆气培养28d。间隔一定时闲采样，测定样品中DOC或COD含盘，生物降解率用DOC或COL的丢去除率表示（经空自值校正后），将受试物的生物降解率对相对应的时间点绘图，即为生物降解曲线。若受试物发生生物化学反应，需采用化学方法分析受试物初级生物降解性。4.2参比赖
为了检测活性污泥的活性，每次试验都需要平行设置含已知垂物降解性的物质作参比物，本标准推荐乙二醇、二甘醇、十二烷基碟酸盐或苯胺（舞燕馏得到激)作为参比物，若使用该参比物，这些物质在14d内DOC或COD去除率应不
5试验准备
5.1设备
a）玻圆柱形蓉器（
5 cm~10
旋转（也可
在容器底部饮1cm处#
一个供压缩空气通过的棉
杂质的室气察，
离心机（
d）pH计
e）DOC测
5.2接种物
#高于1000
其测定仪和
COD测定
可以由正常运转的水处理厂
求水冲洗两遍。1α
客心3mi
可能多样化的菌种，
不同来遍
按上述方法处理。污驱
能品要在采
比物来检验污泥的活性
5.3试验用水
使用去除性物质（好C
低，每组系列试验使用一批水。5.4培荞基
5.4.1试验培养基贮备液
个懿有水的活
乳径0.2m~0.45
OD 低于 25 r
墨将活
缆拌器腰求在容器底部以上
力搅找器代替除搅拌器外，还须教略管，用以息人空气：
清是一个传无、无油和无有机
新鲜活性污泥样舱，用培养基或白离。在特殊情锐下，为了得到尽河水等)得到端样品进行混合，并睿于培养基中爆气直至使用，用参物的高纯度去高子水或蒸馅水，为了辉低空值，水中所含有机碳应较用分析纯试剂制备下列备液：
a）磷酸缀冲液：称取8.50g磷酸二氮钾(KHPO.)、21.75g磷酸氢二钾（K,HPO）、33.40g二水合酸氢二(Na2HPO,·2HO)和0.5名氯化铵NH,CI)用水溶解，定容垒1L，PH值为7.4。
b）氯化钙溶液：称取27.50g无水氯化钙（CaCl,)或36.40g一水合氯化钙(CaCl2·2Hz0)，用水溶解,定容至 1 L。
硫酸镁溶液：称取22.50多七水合硫酸镁（MgSO，，7HIsO)，用水溶解，定容至1L，)
d）氯化铁溶液：称取0.25&六水合氯化铁（FeCl:·6H,O)，用水游解，定容茎1L。加人0.05mL浓盐酸或0.4g/LEDTA二钠盐缓冲溶波保存。上述贮备液中如果出现沉淀，则需罩新配制。2
5. 4. 2 试验培养基的制备
GB/T 21816—2008
胶5.1.1中磷酸缓冲10mL与800ml.试验用水溜合，再分别加入氯化钙溶液、硫酸镁溶液和氯化铁溶液各 I mL,定容至 1 L。6试验释序
6.1组别设计
通常，试验中需要设置下列组别：a）含受试物和接种物的试验组
b）仅含接利物的接种物空岛对照组；c）含参比物和接种物的程序对照组6.2试验操作
试验开始前，应用语会解方崧确定受试物在试验浓度下对活程考泥的规制作用。如果发现有抑制作用，则应降低受试物度
管垒不会产生抑效应的水平
向试验容器中增人部
0mL墙
100 mg/L 或 COD/100 g/I.
（如DOC）的比率
2.5 ： 1
量的受国我和技
置·个或两个仅给接舒物和暗着程序控制平行。如果需要获得非喜散射光或
验瓶放在20℃，
悬浮中的污活
隔检测pH值，
在试验并
清淀，培养28
时用NaOI
h+0.5h片
少采样4次；君降解过程在第2
28天采样，取梯体忍叔决于所健屏o
增加采样次数。
如果达到化
见附录
。同时
解方面的数据，购
用纯净潮湿的空气
期简精保
O，调节PH值至6.5
物，保证内含物含有DOC50mg/L-~g/L接种物（意），接种物和受试物验培养基定容割 1 L~5 I-。同时设中设置一用照物代替受试物的
过菌的、未接种的受试物溶液。将试鑫气、必时进行拌以确保试验
铱度不低量1mg/L按一定时间间
活生疗泥药受！
态到稳定测在武险
赫仪的类型，为
如累在试验的最后喜然到卵泰，鼠验时间。
时情说，在1天倒第27天期闯，至的最后两天取释，香则在第27天和第提期或是否游在到化过程，必须额外（如每获）进DOC或COD分析。
如需更多地了解&酬爱泥的行为，可将该污泥重新暴露于受试梦中，即停止搅择和螺气，使活性污泥沉淀，舍弃上湾液，莲验培养藻至原来的体积，搅拌15mi然后再重复一次上述操作。也可以用高心代替沉淀来分离活性漫记用经过上述处理的污泥需新逃行减验，如果已处理污泥的量达不到0.2 g/L～1g/L(千重)的要求，可间其电加人新鲜落涩6.4分析方法
对采的污泥愚浮液样品（包括试验纽空白对照组研程序控制组)进行过滤，合弃前5ml.滤液。过滤时应使用认真清洗过的滤纸或滤膜，同时必须确保所用滤纸或滤膜既不释放也不吸附有机化合物。如果不能确定，则应将滤膜用约60℃的去离子水或蒸馏水冲洗3次，去除可溶性有机物，净化的滤膜可置于水中保存。道过离心或其他合适的分高技术对难过滤的污泥进行分离。用适当的方法对过滬或分高后的样品进行DOC或COD测定，重复2次。初级生物降解性需采用特异方法（如紫外光谱法）分析受试物。若样品不能在采样当天进行分析，样品可在2℃~4℃下保存48h或在·18℃可保存较长时闻，但建议不要长时问保存。7质量保证与质量控制
7.114d内参比物的去除率达到70%或者试验悬浮中DOC贼COD在每天，每周逐步地去除(这表明生物降解的发生)，即说明试验是有效的，h
GB/T 21816-~2008
7. 2 DOC测定范国通常为 0. 5 mg/L～1 mg/L(以 C计),COD 测定一般为 15 mg/L(以 O.计)。8数据与报告
8.1数据处理
出式(1)计算t时刻的生物降解率：0,
武中：
D,——时刻t的物降率,以%表示：LLE
cA....3h士0.5h培养期后试验悬浮液中DOC或COD值，单位为离克每升（mg/L)；c:—时刻试验悬浮液巾DOC或COD平均值，单位为克每升(mg/L)；C——3h士0.5h培养期后，空白对照中DOC或COD平均值，单位为毫克升（mg/1.)：ca-时刻：空白对照中DOC或COD平均值，单位为毫克每升（mg/L）。（1)
参比物生物降解率的计算方法同上。绘出生物降解过程曲线图（如附录A），在数据表中记录所有结果。
在某些憎说下，试验开始后的3h内发生完全或很明显的降解，空白对照和试验溶液的差别意外地小，这表明物理化学吸附在起一定的作用。在这种情况下，可以将开始后3h的值，从人受试物的量计算得到的初始值及接补物如入前的测定值进行比较，以获得额外的信息，如果要知道生物降解（或部分降解）和吸附之间的准确区别，需做进一步的试验，较为适宜的是用悬浮的已别化的污泥做接种物进行呼吸快速生物降解试验，
受试物的降解率很低甚至为零时，可能是由于变试物对微生物存在抑制作用，此时应道过试验浓度下的微生物毒性试验来排除这种征能性。8. 2结果报告
试验报告应包括以下内容：
a）爱试物
物质的物理属性，以及相关的物理化学特性；受试物鉴别数据。
b）接种物
来源；
-浓度：
化情况。
c）试验祭件
分析方法；
-程序控制和控制所用的化合物：程序改变的原因及解释说明。
d）结果
生物降解曲线：
套性评价：
静态试验某天后的向有生物降解性（在28d试验结束时或不满28d已经达到完全降解时的生物降解程度）；
-活性污滤吸附情况（试验开始3h第--次采样时测定的DOC或COD结果与根捂受试物加入量算得到DOC或COD之问的显菁差异）：-从生物降解函线上确定的甄化期(d),降解期(d)和某天后达到的降解终点。e）结票讨论。
品化伴网
附录A
(资料性附录）
生物降解示例
生物降解和污泥化示例分别见图A.1和图A.2。100
活性污泥
时间/
生物降解的线亲例
降解期
污妮驹化示例
一蛋白陈
一脱防胺
GB/T 21816-2008
袭乙烯醇
时闻/d
GB/T 21816---2008
参考文献
[i] Zahn R, and Welens H. (lo74). Ein cinfaches Verfahren zur Prulung der biologischen Abba-ubarkeit von Produkten and Abwasserinhaltsslofen. Chenikcr Zcitung 98, 228-232.[2 Schefer W.end Walchli O.(1980).Prifung der biologischen Eliminierbarkeit organisch-che-mischerAbwasscr-Inhaltstoffen.Z.Wasser-andA.bwasserforschung 13,205-209.L3 Reynolds, L, et al (1987). Evaluation of the taxicity of substances tu be assessed for hiode-gradability.Chemosphere 16,2259.[4] DIN 38409, Teil 3; 1983 Bestimmung des gelosten organischen Kohlenstuffgehaltes(DOC).
[5] ISO 6060;1986 Water Quality-Determination of Cheinical Oxygen Demand.L6] OECD(1984).Test Guideline 209,Paris.[7]
1sO 8192:l086 Watcr Quality-Test for inhibition of oxygen consumption by activated全品伙伴网ht
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