本标准规定了霍乱的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 本标准适用于全国各级各级医疗、卫生、疾病预防控制机构及其工作人员对霍乱的诊断和报告。 WS 289-2008 霍乱诊断标准 WS289-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS11.020
备案号：22758-2008
中华人民共和国卫生行业标准
WS289—2008
霍乱诊断标准
Diagnostic criteria for cholera2008-01-16发布
大迎味意临
2008-08-01实施
中华人民共和国卫生部发布
根据中华人民共和国传染病防治法》制定本标准WS289-2008
按照国家质检总局，国家标准委公告（2005年第146号）.GB15984—1995律乱诊断标准及处理原则》自本标准实施之日起废正
本标准的附录A是规范性附录，附录B和附录C是资料性附录本标准由卫生部传染病标准专业委员会提出，本标准由中华人民共和国卫生部批准，本标准起草单位：中国疾病预防控制中心广西壮族自治区疾病顶防控制中心江苏省疾病预防控制中心，山东省疾病预防控制中心、四川省疾病预防控制中心广东省疾病预防控制中心本标准主要起草人：蜗飘、张静、董柏青、汪华、毕振强、祝小平、钟豪杰1范围
霍乱诊断标准
本标准规定了霍乱的诊断依据，诊断原则和鉴别诊断WS289-2008
本标准适用于全国各级各类医疗卫生机构及其工作人员对霍乱病例及带随者的诊断、报告2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准
腹泻diarrhea
是指1d排便3次或以上且具有粪便性状改变的一种临床症状3诊断依据
3.1流行病学
3.1.1生活在翟乱流行区，或5d内到过霍乱流行区，或发病前5d内有饮用生水成进食海（水）产品或其他不清食物和铁料等饮食中
3.1.2与葡乱患者或带菌者有密切接触史或共同暴露史3.2临床表现
3.2.1轻型病例
无腹痛腹泻，可伴有哇，常无发热和里急后重表现，少数病例可出现低热（多见于儿童）、腹部隐痛或饱胀感，个别病例有阵发性纹痛3.2.2中、重型病例
腹得次数颜紫或剧烈，粪便性状为水样便，伴有呕吐，迅速出现脱水或严重脱水，循环衰竭及肌肉痉挛（特别是肠肌）等体克表现
3.2.3中毒型病例
为一较罕见类型（干性徽乱），在霍乱流行期出现无得吐或泻吐较轻，无脱水或仅轻度脱水，但有严重中毒性循环衰竭。
3.3实验室检测
3.3.1粪便，收吐物或肛拭子细菌培养分离到O1群和（或>O139群霍乱弧菌·操作方法见附录A。3.3.2在腹泻病惠者日常生活用品或家居环境中检出01群和（或）0139群霍乱弧菌，操作方法见附录A
3.3.3便、呕吐物或肛拭子标本霍乱素基因PCR检测阳性，操作方法见附录B3.3.4粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱弧菌快速辅助检测试验阳性，操作方法见附录B4诊断原则
依据思者的流行病学、临床表现及实验室检查结果进行综合判断5诊断
5.1带苗者
无赛乱临床表现但符合3.3.1者
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5.2疑似病例
符合下列情况之一者即可诊斯，5.2.1具备3.1.2加3.2.1著：
5.22具备3.2.1加3.3.3
5.2.3具备32.1加33.4者：
5.2.4具备3.2.3加33.3者：
5.2.5具备3.2.3加3.3.4者：
5.2.6具备3.2.2者
5.3临床诊断病例
，共中的任一USE
符合下列情况之一者即可诊断
5.3.2在一起确认的霍乱是00
大群中
5.4确诊病例
5.4.1凡具备3.2中的
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鉴别诊断
霍乱应与其他
爽、沙门菌肠炎、病
中的任一项者
年同时备
养检出推和C或O139群准乱瓶菌前后名5d内有腹湾症状者HS
生物引起的腹写相蜜别，主要鉴割诊听包括：大肠杆菌性肠炎、副溶血弧菌肠奇炎，急性细菌性荆疾，金黄色葡岛球菌所致腹得等（参见附录S
A1标本的收集
附录A
【规范性附录】
霍乱弧菌的分离与鉴定
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惠者粪便、呕吐物，肛子为必取标本，永样便或呕吐物采样量一般为1mL一3mL，成形便采取指甲大小的粪量：肛试子可用直肠棉拭或采便管中旺门插人直肠内3cm一5cm处旋转后取出，置增菌液或运送培养基送检
A.2标本的送检
采得的标本应立即接
二氏保存液或插人Cary
A3分高培养
不能业即芋母的应放入
的碱性蛋白陈水或文腊
商体保存境养基中选检，标本与保存液的比你的为15A3.1增菌后分离培养所有标本均应接种减性强白陈水培养基置37℃增菌6—8后，从菌膜下表层取一接种环培养物，划我按于强、弱选择性增养基各置7e增准18h~24h，必零时进行二次增菌培养A.3.2直接分离培养，寸急性期息者水样便标个在进行增菌培养的同时可取接和环或用肛拭子直接接种在选择性理养手
上置37℃培养18h-24h
A.3.3常用强选音养基包括庆大靠款球脂FCBS琼脂和四号琼脂等，弱选择性音养基一般使用碱性营养琼脂等
A.3.4不同分离拍#上生长的霍乱弧菌典型菌落特征不间，套见分离培养基间3718h24h培养物的菌落特征如下！
A.3.4.1破性营美原：疆乱弧菌在碱性塞养晾脂士生长的菌落量现为无色，形透明或半透明、表留客直径一般约为2mm，
面光滑、润湿、扁平或箱起、边缘整齐A.3.4.2庆大霉素京脂四号琼脂：菌落特正碱性营养琼脂上生长的菌落相似宜透明性略差，多星半透明状，由于这类培基有亚碲酸盐成分，菌落中央望东色或灰黑色，并随培养时间的延长而加深。A.3.4.3、TCBS琼脂：落生长呈黄色发亮表面光醋，润讯、精占起、边终整齐。A.4葡株鉴定
A.4.1首株初筛
包括玻片凝集实验，氧化酶试验A.4.1.1玻片凝集实验
a）从分离培养基上挑取疑似菌落接种于非选择性垢养基进行纯培养（37℃18h～24h），取纯培养物与O1群覆乱弧菌诊断用单克隆抗体或O1群多价诊断血清及O139群霍乱弧菌诊断用单克隆抗体或诊断清做玻片诞集试验进行0I群和@139群套乱弧黑的初筛b）玻片疑集试验使用的血清效价范围应为1！32～1：64，如玻片疑集试验在1min内出现内眼可见的明显凝集快，但在生理盐水中不产生靠集的培养菌判为凝集阳性，应立即保存菌株做复核与分型鉴定：在lmin内不出现凝集块者判为凝集阴性。e生长在碱性营养琼脂、庆大需素琼脂及四号琼脂上的疑似菌落如足够大，可直接挑取疑似菌落与O1群靠乱弧菌多价诊断血清及139群重乱弧菌诊断血清做玻片避集试验进行初筛，但生长在TCBS培养基上的疑菌落带因培养基中能糖的影响造成难于乳化·不能直接进行玻片凝集试验应先3
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以非选择性培养基纯培养后再作玻片集d）要注意同一标本存在1群和0139群等多个血清群霍乱弧菌混合的可能，每份标本至少挑选5个以的疑似菌落逐一进行鉴定
A.4.1.2氧化酶试验
a）试剂1%盐酸对氨基二甲基苯胺或盐酸二甲基对苯二胺水溶液。b）试验方法：取生长在非选择性培养基上的新鲜培养物涂抹在清活的滤纸上，然后满加上述试润，如培养物在Lmm～2min内出现粉红-紫红紫蓝色，有的最后呈紫黑色，判断为氧化酶试验阳性：培养物不显色判为阴性
A.4.2葡株复核
经初筛阳性或可疑阳性的菌株，在发出初步鉴定报告的同时，应尽快送当地疾病预防控制中心（CDC）进行复核鉴定。复核结果符合O1群或O139群霍乱弧菌的菌株，按菌株管理的要求进行保存与上送：如复核结果出现问.应尽快将菌株上送省级或省级以上CDC参比实验室进行确认分析，菌株的复核鉴定应以纯培养物为基础，至少应包括以下项目：血清凝集试验与血清分型、革兰染色，黏丝试验、氧化酶试验，动力试验，对一次流行的首批病例菌株和玻片疑集反应不典型的菌株应增做试管凝集试验霍乱弧葡系统生化鉴定详见表A1A.5
最适生长温度（）
氧化酶
黏丝试验
硝酸盐还原
靛基质
V-P试验
尿素酶
L-赖氮酸
L-鸟氨酸
L-精氨酸
通萄糖产气
麦芽糖
D甘露醇
L-阿拉伯糖
虾维二铺
水杨素
明胶素
在不同盐量陈水中
生长试验
0%NuCI
3%Nacl
6%NaCI
8%NaCI
10%NaCI
O/129敏感性
耐酶血
生：邮分O139群套乱美值为抗性（R)部分弧菌科细葡的系统生化鉴定创伤
河弧菌
弗尼斯
霍利斯
辛幸那
提弧菌
B.1霍乱毒素基因PCR检测
（资料性附录）
霍乱实验室诊断的相关实验技术WS289-2008
崔乱强菌包含多种毒力相关因子，其中霍乱毒素是霍乱弧菌主要的致病因子，因此，在霍乱诊断上我乱毒素基因ctAB）的PCR检测具有重要的诊断价值。该方法特异性和灵敏度均较高·需要在符合PCR实验条件的实验室中进行，同时需要严格的核酸提取操作，扩增检测征乱毒素基因cAB的引物为：PISCTCAGACGGGATTIGTTAGGCACG3P2:5TCTATCTCTGTAGCCCCTATTACG3扩增产物长302bp扩增参数为：
预变：94℃.5min
扩增循环：94℃30s，68℃30s72℃30s，共30个循环：未轮延伸：72℃7min
在不同厂商和型号的PCR扩增仪器上，退火温度可能略有不同。该方法直接检测是否为产毒株。需注意有时会出现由非产毒的霍乱弧菌引起的病例或小范围暴发B.2霍乱弧菌快速辅助检测
目前使用催乱弧菌胶体金快速检测法较多，该方法主要针对检测1群和O139群雅乱弧菌抗原成分·操作简单，目前此类方法的检出限为10个菌/毫升，因此在轻型病例及带菌者调查中存在漏检的可能，需要进行增菌培养后检测，以提高检出率WS289-2008
C1副溶血弧首肠炎
附录C
（资料性附录）
霍乱弧菌的鉴别诊断
多数起病急骤，有食用海（水）产品和或）不洁食物史，潜伏期2h～4d，常先吐后泻，排便前往往有肠鸣，阵发性腹部剧痛，常为水样或类似角疾样瓶血便个别重型惠者大便可有清水样或洗肉水样，早OUSE
期据有发热和其他中毒症状。大便控养副齐血弧菌阳性C2大肠杆菌性肠炎
C2.1产肠毒事性大肠杆菌EC)性肠炎：潜休期h~24h有发热、恶小呕吐及腹部绞痛，腹泻，黄永或清水样便，无脓血便腹泻者尔可严生重度脱永，更幼想儿常质此而意及生命。C.2.2肠致病性大肠杆面（EPEC)性脂炎：主要能状为腹湾大便为黄鱼或黄吸色蛋花样便，量较多，常有特殊腥臭味，重者有脱水及全身症状以上两者粪便的可获得相应的大肠杆留C3鼠伤寒沙门黄感染
侵犯各年龄红个月以内婴儿易题惠·新生儿病情尤为严重，多发生于每年的月一8月，常有发热，可有腹泻或出是·腹泻大便为稀水银·亦可有胜血便常引起不同程度脱不大更培养可获得鼠伤寒沙门菌。
C.4空肠弯曲菌脑3
本首可侵装
期有发热或有乏
吸结肠引起病变
现已证实本办可产生肠毒素而致病，潜优期3d～5d，起病初几及肌痛等症状，维而胶痛牌泻，大使为水样、黏液状、汁样或呈血性严重病例可有重度脱水及循竭。个别患者还可表现为急取车，一般典型病例不难与霍乱鉴别，大便培养可检出变曲菌
C.5病毒性肠炎
常见病原为人轮状病连·夜见各龄组，多见于婴幼儿，好发于秋冬季可呈流行性·部分惠者同时伴有上呼吸道感染症状及发热，中快轻，常为自限性，腹温次数可不多，大便稀软或黄水样，多无腹痛，成人病后常有1周～2周疲王力本床表现与轻型重乱相以，但在流行中见不到与霍乱相似的中，重型病例，类便培养霍乱弧菌明性轮状病毒检查阳性，其他如诺瓦克样（Norwalk-like）因子，腺病毒，冠状病毒，星状病毒等亦可引起腹泻也而等型C.6急性细菌性疾
由志贺菌起，潜伏期一3d，起病急，以发热、腹痛腹泻，单急后重面便为主费特有全身中度中毒症状。重症患者伴有惊既、头痛、全身肌肉酸痛，也可引起脱水和电解质紊乱，不典型的急性细菌性疾以婴儿多见，多无全身中毒症状，不发热或低热，腹痛较轻，粪便呈水样或稀糊样，含少量黏液，左下腹可有压痛应注意鉴别。急性中毒性细菌性痫疾可出现高热·在儿童患者早期出现烦躁、请妄，惊既等，发病初期肠道症状不期显，成人患者主要表现为脓血便频繁，循环系统症状明显，从类便或肛拭标本等中检出痫疾志贺菌可确诊。6
C7金黄色葡萄球菌所致腹泻
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潜伏期短，从吃进食物至发病间隔为30min-8h，一股2h一h，有严重的恶心，率李性腹痛，吸吐及虚脱常伴有腹泻.病程短，常为1d一2d.是常见的食物中鑫.可呈暴发性，收集惠者龚便收物，肛拭子、可疑食品检出金黄色滴衡球菌进行确诊WS289
中华人民共和国
卫生行业标准
霍乱诊断标准
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本：880×1230:1/16
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交2008年5月第1版第1次印刷
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