本标准规定了烟草及烟草制品中淀粉的酶水解-离子色谱测定方法。本标准适用于烟草及烟草制品中淀粉的测定。 YC/T 283-2009 烟草及烟草制品 淀粉的测定 酶水解-离子色谱法 YC/T283-2009 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS65.160
备号：25966—2009
中华人民共和国烟草行业标准
YC/T283—2009
烟草及烟草制品
淀粉的测定
酶水解-离子色谱法
Tobacco and tobaceo products-Determination of starchEnzyme hydrolysis-ion chromatography2009-03-30发布
数码伪
国家烟草专卖局
2009-05-01实施
本标准的附录A和附录B为资料性附录本标准由国家烟草专卖局提出。YC/T283-—2009免费标准bzxz.net
本标准由全国烟草标准化技术委员会卷烟分技术委员会（SACTC144/SC1)口本标准起草单位：上海烟草（集团）公司，中国烟草标准化研究中心、广东中烟工业有限责任公司、湖南中烟工业有限责任公司，
本标准主要起草人：孙文梁、周苑虹、余永模、韩云辉、陈连芳、洗光林、胡静、姬文庄、吴名剑、廣苏行、韩星
1范围
烟草及烟草制品淀粉的测定
酶水解-离子色谱法
本标准规定了烟草及烟草制品中淀粉的酶水解离子色谱测定方法本标准适用于烟草及烟草制品中淀粉的测定本方法测定淀粉的定量检出限为0.05mg/gYC/T283--2009
规范性引用文件
主的引用而成为本标准的条款。凡是注期的
用文件，其随后所有
下列文件中的条款通
的修改单（不包括期误的客或修订版均不适用标准，而敲励根据有标准基成协议的各方研究版本适用丁本标准，
最新版本。
是不注日期的
是否可使用这些文件自
室用水规格和试验行
GB/T6682
YC/T31
烟草及烟卓制品
用文代共最新
T668226
试样的制备利水分测定
供前法
1SO36.6:19.7,MOD)
成烟草制品中的糖类幕干抗物质，利用。旋粉海和淀粉葡奇糖酶将淀粉专一采用乙醇除去
永解成葡萄糖·通
交换分离后定量橙测葡葡糖，进面计算律出焖草或烟草制品中的淀粉含量。P使用分析纯试剂
城行合GB/T
除特殊要求外
4.1氢氧化钠溶液
乙醇溶液80g
质量分数
Q淀粉酶.50U/
个2-淀粉酶活力
淀粉葡萄糖苷酶（AG)
爱水的规定
义为可在2月6.9.25
下每分钟水解淀树生成mol夏芽糖mg：来源：Aspergillus.niger
义为可在H.8.60气下每分钟水解旋粉度1mol葡葡糖注：1个淀粉葡葡糖苷酶活力盖
磷酸二氢钠磷酸氢二钠缓吨溶液.0.m/L.pH64.5
乙酸乙酸钠缓冲溶液.6.10mo%L·pH4.6.淀粉葡带糖苷酶溶液，280U/mL，由旋粉商萄械茸筋和乙酸乙酸钠缓冲溶液（4.6）配制、即配即用，
4.8苯甲酸溶液.0.13%（质量分数）。4.9标准溶液
4.9.1葡萄糖标准储备液
称取约50mg简萄糖.精确至0.1mg：以9。1对举甲酸溶液（4.8解并定容于190l.容量瓶中葡菌糖标准储备液应置于4下保存，有效期6个厅，取用时.应在达到常温后使用4.9.2葡萄糖工作标准液
分别移取50.0μL100.0L.250.0ml..500.0ul.和1000.0L葡葡糖标准储备液（4.9.1）于YC/T283—2009
25ml容量瓶中.以0.1%苯甲酸溶液（4.8）稀释定容，得到葡萄糖工作标准液。4.10流动相：移取50%氢氧化钠溶液（4.1）适量，稀释定容，配制200mmol/L氢氧化钠溶液，作为流动相A，流动相B为一级水。
仪器及材料
旋风式样品磨.40日筛
2分析天平，精确至0.1mg。
连续萃取装置，参见附录A
双层滤纸杯。
5.5常规玻璃仪器。
5.6真空抽滤装置
电热恒温水浴锅。
离子色谱仪，配置二元梯度泵和电化学检测器5.8
9糖离子交换柱，固定相为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物，官能团为功能性季胺盐，分析柱3mm×5.9
150mm.保护柱3mmX30mm。
制样和水分的测定
按YC/T31进行试样的制备和水分的测定。7分析步骤
7.1样品前处理
7.1.1乙醇提取
称取0.5g试样，精确至0.0001g置于双层滤纸杯（5.4）中，每个样品称取两个平行试样。将称取的试样置于连续萃取装置（5.3）内.以100ml乙醇溶液（4.2）于100℃水浴中提取2.0h7.1.2酶水解
7.1.2.1取出并打开滤纸杯，将残渣和滤纸置于250mL锥形瓶中，依次加人50mL磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液（4.5）和25mg-淀粉酶<4.3)，在100℃水浴中水解15h。7.1.2.2将α-淀粉酶水解液（7.1.2.1)冷却至60℃，依次加人50mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液（4.6）和8.0mL淀粉葡萄糖苷酶溶液（4.7）.在60℃水浴中水解2.0h，7.1.2.3水解完毕取出锥形瓶，立即抽滤，用约50mL苯甲酸溶液（4.8）清洗滤纸和滤渣。合并滤液和清洗液于250mL容量瓶中，以0.1%苯甲酸溶液（4.8)稀释定容.得到A溶液7.1.3溶液稀释
7.1.3.1移取5.0mL.A溶液7.1.2.3）于50ml.容量瓶中，以0.1%苯甲酸溶液（4.8）稀释定容，得到B溶液
7.1.3.2移取2ml.B溶液7.1.3.1)，经0.45um滤膜过滤后进行离子色谱分析。7.1.3.3当B溶液（7.1.3.1）中的葡萄糖含量超出标准工作曲线的定量范围时，应调整A溶液(7.1.2.33的稀释倍数
7.2离子色谱分析
7.2.1柱温：30℃,
7.2.2流速：0.50mL/min
7.2.3进样量：10L
7.2.4淋洗液梯度洗脱程序见表1fmn.
流动相A
淋洗液梯度洗脱程序
疏动相B/%
检测器采用脉冲安培检测模式·检测电位波形见表2表2检测器检测电位波形
7.3标准工作曲线
YC/T283-—2D09
开始进样和效据采集
学北数据柴集
积分状备
测定葡葡糖工作标准液（4.9.2）.根据葡莓糖工作标准液的浓度及其响应峰面积·建立葡萄糖标准工作曲线：工作曲线线性相关系数应不小于0.97.4样品测定
按照离子色谱分析条件测定B溶液（71.3.23中的葡葡糖，根据保留时间定性，峰面积定量。每个样品平行测定两次，烟草样品水解液的离子色谱图参见附录B结果的计算与表述
样品中淀粉的含量按式13进行计算.将B溶液（7.1多15中的葡萄糖含量换算为样品中的淀粉含量。以质量分数表示。
样品中的淀粉含量，%：
葡萄糖与淀粉之间的换算系数：B溶液和A溶液之间的稀释倍数：Xan%
B溶液中的葡萄糖含量，单位为毫克每升（mg/L：WA济液的体积，单位为升（L)：t
试样的质量，单位为毫克（mg）；样品的含水率，%
取两次平行测定值的平均值作为样品淀粉的测定结果，两次平行测定值间的相对平均偏差应不大当样品中的淀粉含量小于10%时，结果精确至0.D1%，当样品中的淀粉含量大于或等于手100%
YC/T283-—2009
10%时，结果精确至0.1%。
8回收率
本方法的回收率试验结果如表3所示。表3
样品名称
烤烟烟牛
烤烟烟叶
烤烟烟叶
白肋烟烟叶
白肋烟烟叶
白助烟烟叶
香料烟烟叶
香料烟烟叶
香料烟烟叶
烤烟型卷烟
烤烟型卷烟
烤烟型卷烟
混合型卷烟
混合型卷烟
混合型卷烟
淀粉含量
检验报告
检验报告应说明
参照本标准所
试验方法
在检测中观察到的异
检测日期：
检测人员。
回收率试验结果
加人标样量
测定值
以%表示
回收率
连续萃取装置如图A，1所示。
附录A
（资料性附录）
连续萃取装置尺寸示意图
934标准
萃取主件
014骏四氟
$7玻璃管：
标准塞
注：*1\（Φ34标准口）
*5\（24标准塞下接平底烧瓶
连续萃取装置尺才示意图
YC/T283—2009
单位为毫来
YC/T283-—2009
附录B
（资料性附录）
烟草样品水解液离子色谱图
烟草样品水解液的离子色谱响应如图B.1所示。90
glucose 9.800
烟草样品水解液的离子色谱图
IntAmpi
YC/T283-2009
中华人民共和国烟草
行业标准
烟草及烟草制品淀粉的测定
酶水解-离子色谱法
YC/T283—2009
中国标准出版社出版发行
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中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本880×1230
2009年5月第一版
印张o.75
字数13千字
2009年5月第一次印刷
书号：155066：2-19680
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定价16.00
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