HJ 960-2018.Soil and sediment-Determination of carbamate pesticides-Post-column derivatization-high performance liquid chromatography.
1适用范围
HJ 960规定了测定土壤和沉积物中10种氨基甲酸酯类农药的柱后衍生-高效液相色谱法。
HJ 960适用于土壤和沉积物中涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、3~羟基克百威、涕灭威、残杀威、克百威、甲萘威、异丙威、甲硫威等10种氨基甲酸酯类农药的测定。
当取样量为10g，试样定容体积为1.0ml, 进样体积为15 μl时，10 种氨基甲酸酯类农药的方法检出限为1~3 μg/kg,测定下限为4~ 12 μgkg。详见附录A。
2规范性引用文件
本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB 17378.3海洋监测规范 第3 部分:样品采集、贮存与运输
GB 17378.5海洋监测规范第5 部分:沉积物分析
HJ 494水质采样技术指导
HJ 613土壤干物质和水分的测定重量法
HJ 783土壤和沉积物 有机物的提取加压流体萃取法
HJ/T 166土壤环境 监测技术规范
3方法原理
土壤或沉积物中的氨基甲酸酯类农药经有机溶剂提取、固相萃取柱净化、浓缩、定容、用液相色谱柱分离后，在碱性条件下水解生成甲胺式(1)，与衍生化试剂反应生成具有强荧光物质式(2)，用荧光检测器测定。根据保留时间定性，外标法定量。
4干扰和消除
具有相近保留时间的物质对测定产生干扰，可通过改变流动相梯度洗脱程序、标准添加法、定量定性波长吸收比等方法消除干扰。
7样品
7.1 样品采集和保存
按照HJ/T 166的相关要求采集和保存土壤样品，按照HJ 494的相关要求采集水体沉积物样品，按照GB 17378.3的相关要求采集海洋沉积物样品。样品采集后，0~4℃密封、避光保存，7d内完成萃取。

中华人民共和国国家环境保护标准HJ960—2018
土壤和沉积物
氨基甲酸酯类农药的测定
柱后衍生-高效液相色谱法
Soil and sedimentDetermination of carbamate pesticidesPost-column derivatization-high performance liquid chromatography2018-08-02发布
2019-01-01实施
生态环境部发布
中华人民共和国生态环境部
2018年第27号
HJ960—2018
为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护生态环境，保障人体健康，规范生态环境监测工作，现批准《土壤和沉积物氨基甲酸酯类农药的测定柱后衍生-高效液相色谱法》等四项标准为国家环境保护标准，并予发布。
标准名称、编号如下：
《土壤和沉积物氨基甲酸酯类农药的测定柱后衍生-高效液相色谱法》（HJ960一2018）：《土壤和沉积物氨基甲酸酯类农药的测定高效液相色谱-三重四极杆质谱法》（HJ961-2018）：
《土壤pH值的测定电位法》（HJ962—2018）：四、《固体废物有机磷类和拟除虫菊酯类等47种农药的测定气相色谱-质谱法》（HJ963-
2018）。
以上标准自2019年1月1日起实施，由中国环境出版集团出版。标准内容可在生态环境部网站(kjs.mep.gov.cn/hjbhbz/）查询。特此公告。
生态环境部
2018年8月2日
1适用范围.
规范性引用文件，
方法原理
干扰和消除..
试剂和材料.
仪器和设备..
分析步骤.
结果计算与表示
精密度和准确度
质量保证和质量控制
废物处理
附录A（规范性附录）
附录B（资料性附录）
方法检出限和测定下限
方法精密度和准确度
HJ960—2018
HJ960—2018
为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护生态环境，保障人体健康，规范土壤和沉积物中氨基甲酸酯类农药的测定方法，制定本标准。本标准规定了测定土壤和沉积物中10种氨基甲酸酯类农药的柱后衍生-高效液相色谱法。本标准的附录A为规范性附录，附录B为资料性附录。本标准为首次发布。
本标准由环境监测司、科技标准司组织制订。本标准起草单位：浙江省环境监测中心。本标准验证单位：江苏省环境监测中心、杭州市环境监测中心站、绍兴市环境监测中心站、苏州市环境监测中心站、浙江环境监测工程有限公司和中检集团理化检测有限公司。本标准生态环境部2018年8月2日批准。本标准自2019年1月1日起实施。本标准由生态环境部解释。
氨基甲酸酯类农药的测定
土壤和沉积物
柱后衍生-高效液相色谱法
HJ960—2018
警告：实验中使用的溶剂和标准溶液对人体健康有害，溶液配制及样品前处理过程应在通风橱内进行；操作时应按要求佩戴防护器具，避免直接接触皮肤和衣物。1适用范围
本标准规定了测定土壤和沉积物中10种氨基甲酸酯类农药的柱后衍生-高效液相色谱法。本标准适用于土壤和沉积物中涕灭威亚砜、涕灭威、灭多威、3-羟基克百威、涕灭威、残杀威、克百威、甲萘威、异丙威、甲硫威等10种氨基甲酸酯类农药的测定。当取样量为10g，试样定容体积为1.0ml，进样体积为15μl时，10种氨基甲酸酯类农药的方法检出限为1～3μg/kg，测定下限为4～12μg/kg。详见附录A。2规范性引用文件
本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB17378.3海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输GB17378.5海洋监测规范第5部分：沉积物分析HJ494水质采样技术指导
HJ613土壤干物质和水分的测定重量法HJ783土壤和沉积物有机物的提取加压流体萃取法HJ/T166土壤环境监测技术规范
3方法原理
土壤或沉积物中的氨基甲酸酯类农药经有机溶剂提取、固相萃取柱净化、浓缩、定容、用液相色谱柱分离后，在碱性条件下水解生成甲胺式（1），与衍生化试剂反应生成具有强荧光物质式（2），用荧光检测器测定。根据保留时间定性，外标法定量。CH3+H20
碱性水溶液
CHO+CH3NH2
CH3NH2+R—OH+CO32
SCH2CH2OH
碱性水溶液
CHO+HSCH2CH2OH
HJ9602018
4干扰和消除
具有相近保留时间的物质对测定产生干扰，可通过改变流动相梯度洗脱程序、标准添加法、定量定性波长吸收比等方法消除干扰。5试剂和材料
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的不含目标物的纯水。5.1乙腈（CH3CN)：液相色谱级。5.2甲醇（CH3OH)：液相色谱级。5.3二氯甲烷（CH2Cl2）：液相色谱级。5.4氢氧化钠（NaOH)。
5.5四硼酸钠（NazB.O,·10H2O）。5.62-巯基乙醇（HSC2H4OH）或2-二甲氨基乙硫醇盐酸盐（C4HuNS·HCI)。5.7邻苯二甲醛（CgHgO2）。
5.8无水硫酸钠（Na2SO4）。
马弗炉中450℃灼烧4h，稍冷却后置于干燥器中备用。5.9水解液：氢氧化钠溶液，（NaOH）=0.05mol/L。称取2.0g氢氧化钠（5.4），用水溶解并稀释至1L，经滤膜（5.19）过滤。也可直接购买市售商品。5.10四硼酸钠溶液：c（NazBa0.10H20）=0.05mol/L称取19.1g四硼酸钠（5.5），用水溶解并稀释至1L，经滤膜（5.19）过滤。也可直接购买市售商品。
5.11衍生化试剂。
称取0.1g邻苯二甲醛（5.7)，溶于10ml甲醇（5.2）。移取200μl2-巯基乙醇（5.6）或称取2.0g2-二甲氨基乙硫醇盐酸盐（5.6），溶于10ml四硼酸钠溶液（5.10）。将上述2种溶液混合后用四硼酸钠溶液（5.10）稀释至1L。
5.12甲醇-二氯甲烷混合溶剂：1+2。用甲醇（5.2）和二氯甲烷（5.3）按1：2体积比混合。5.13甲醇-二氯甲烷混合溶剂：1+9。用甲醇（5.2）和二氯甲烷（5.3）按1：9体积比混合。5.14氨基甲酸酯类农药标准贮备液：p=100mg/L。直接购买市售有证标准溶液，按标准溶液证书要求保存。5.15氨基甲酸酯类农药标准使用液：P=10mg/L。取500μl氨基甲酸酯类农药标准贮备液（5.14）于5ml容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，混勾，置于-18℃冰箱，密封、避光保存，保存期为6个月。5.16固相萃取柱：石墨化炭黑/N-丙基乙二胺复合填料萃取柱（500mg/6ml）或其他性能相近的固相萃取柱。
5.17硅藻土：0.6~0.9mm（30~20目）。5.18石英砂：150~830um（200~100目）。马弗炉中450℃灼烧4h，稍冷却后置于洁净干燥器中备用。5.19滤膜：0.45μm聚醚砜或其他等效材质。5.20滤膜：0.45um聚四氟乙烯或其他等效材质。2
5.21氮气：纯度≥99.99%。
6仪器和设备
6.1高效液相色谱仪。
6.1.1具有荧光检测器、梯度洗脱功能。6.1.2具有柱后衍生系统，能自动完成衍生反应。HJ960—2018
6.1.3色谱柱：填料粒径为5μm，柱长为25.0cm，内径为4.0mm的Cg色谱柱或其他性能相近的色谱柱。6.2冷冻干燥仪。
6.3提取装置：加压流体萃取仪（配有50ml以下萃取池）、索氏提取装置、自动索氏提取仪或其他性能相当的提取装置。
6.4浓缩装置：氮吹浓缩仪、旋转蒸发仪或其他性能相当的设备。6.5分析天平：感量为0.01g。
6.6一般实验室常用仪器和设备。7样品
7.1样品采集和保存
按照HJ/T166的相关要求采集和保存土壤样品，按照HJ494的相关要求采集水体沉积物样品，按照GB17378.3的相关要求采集海洋沉积物样品。样品采集后，0～4℃密封、避光保存，7d内完成萃取。7.2样品的制备
除去样品中的异物（枝棒、叶片、石子等），将样品完全混勾。如样品水分含量较高，应先用冷冻干燥仪（6.2）干燥。称取两份约10g（精确至0.01g）的样品。土壤样品一份用于测定干物质含量，另一份用于提取。使用加压流体萃取法提取时，加入适量硅藻土（5.17），装入萃取池中。使用索氏提取时，加入适量无水硫酸钠（5.8），装入提取管中。沉积物样品一份用于测定含水率，另一份用于提取，提取方法参照土壤样品。7.3水分的测定
按照HJ613测定土壤样品干物质含量，按照GB17378.5测定沉积物样品含水率。7.4试样的制备
7.4.1提取
7.4.1.1加压流体萃取
采用甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.12）提取样品中氨基甲酸酯类农药，压力10.34MPa，萃取温度80℃，加热时间5min，静态萃取时间5min，冲洗量80%，萃取后氮气吹扫60s，循环萃取3次。或按照HJ783进行萃取条件的设置和优化。
7.4.1.2索氏提取
将滤筒置于索氏提取器回流管中，在圆底溶剂瓶中加入200ml甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.12)，提取12h，回流速度控制在4～6次/h。提取完毕，取出圆底溶剂瓶，待浓缩。注：若经过验证也可使用其他等效提取方法。3
HJ960—2018
7.4.2浓缩
用浓缩装置（6.4）将萃取液（7.4.1）浓缩至近1.0ml，待净化。7.4.3净化
用5.0ml甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.13）以2ml/min的速度活化固相萃取柱（5.16），在填料即将暴露于空气之前，将浓缩液（7.4.2）转移至柱头，在填料即将暴露于空气之前，用5.0ml甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.13）洗脱萃取柱，收集洗脱液于刻度管中。注：使用不同批次萃取柱净化样品时，需通过实验确定洗脱溶剂用量。7.4.4净化后浓缩
用氮吹浓缩仪（6.4）将洗脱液（7.4.3）30℃以下浓缩至近干，用甲醇（5.2）定容至1.0ml，过滤膜（5.20），待测。
处理好的试样应于-18℃以下冰箱冷冻保存，在30d内完成分析。7.5空白试样的制备
用石英砂（5.18）代替实际样品，按照与试样的制备（7.4）相同的步骤制备空白试样。8分析步骤
8.1参考测量条件
8.1.1柱后衍生条件bzxZ.net
反应器温度：100℃。衍生泵流速：0.3ml/min。8.1.2色谱条件
流动相：流动相A乙睛（5.1)，流动相B水，梯度洗脱程序见表1。流速：0.8ml/min；进样体积15ul；柱温：37℃；荧光检测器：激发波长330nm，定量发射波长460nm，定性发射波长435nm。表1梯度洗脱程序
时间/min
8.2标准曲线的建立
流动相A/%
流动相B/%
移取适量的氨基甲酸酯类农药标准使用液（5.15）至5ml容量瓶，用甲醇（5.2）稀释至标线，配制至少5个质量浓度点的标准系列，标准系列质量浓度分别为0.05μg/ml、0.50μg/ml、1.00μg/ml、2.50μg/ml和5.00μg/ml（此为参考浓度）。由低质量浓度到高质量浓度依次对标准系列溶液进样，按照测量条件（8.1）分析，以标准系列溶液中各氨基甲酸酯农药的质量浓度为横坐标，以其对应的峰面积（或峰高）为纵坐标，建立标准曲线。8.3试样测定
按照与标准曲线的建立（8.2）相同的步骤进行试样（7.4）的测定。4
8.4空白试验
按照与试样测定（8.3）相同的步骤进行空白试样（7.5）的测定。9结果计算与表示
9.1定性分析
HJ960-2018
根据试样中目标物和标准溶液中目标物的保留时间进行定性。必要时还可采用标准添加法、定量定性波长吸收比等方法辅助定性。在本标准规定的测量条件（8.1）下，标准溶液色谱图见图1。LU
9.2结果计算
1—涕灭威亚矾：2—沸灭威砜；3-灭多威：4—3-羟基克百威：5—沸灭威：6—残杀威：7—克百威：8—甲萘威：9—异丙威：10—甲硫威。图1标准溶液色谱图
土壤样品中目标物的质量分数按照式（3）进行计算：W, =Pit×V×1000
m,×Wam
式中：wu
一土壤样品中第i种目标物质量分数，ug/kg：一土壤试样中第i种目标物质量浓度，mg/L：V-一土壤试样定容体积，ml：
土壤样品湿重，g；
土壤干物质含量，%。
沉积物样品中目标物的质量浓度按照式（4）进行计算：min
HJ960—2018
式中：W21-
Wa, = Pat ×V, ×1 000
m,×(1-WH,o)
沉积物样品中第1种目标物质量分数，μg/kg：沉积物试样中第i种目标物质量浓度，mg/L；一沉积物试样定容体积，ml；
-沉积物样品湿重，g：
沉积物水分含量，%。
9.3结果表示
测定结果小数点位数与方法检出限保持一致，最多保留3位有效数字。10精密度和准确度
10.1精密度
6家实验室分别对含氨基甲酸酯类农药加标质量分数为500μg/kg和5μg/kg的统一沉积物样品进行了6次重复测定，实验室内相对标准偏差范围分别为：1.6%～7.6%，2.4%～13%：实验室间相对标准偏差范围分别为：4.1%~12%，4.9%~19%：重复性限范围分别为：56~73μg/kg，1～2μg/kg；再现性限范围分别为：79～161μg/kg，2～3μg/kg。精密度结果参见附录B。
10.2准确度
6家实验室对含氨基甲酸酯类农药均小于方法检出限的统一沉积物样品进行了加标分析测定，加标量分别为500μg/kg和5μg/kg，加标回收率范围分别为：78.7%106%，82.6%~141%加标回收率最终值分别为：（86.7±20）%～（102±8.2）%，（93.8±10）%～（111±28）%。准确度结果参见附录B。
11质量保证和质量控制
11.1空白试验
每20个样品或每批次（少于20个样品/批）至少分析1个实验室空白，空白测试结果应低于方法检出限。
11.2校准
标准曲线的相关系数r≥0.995
选择标准曲线的中间浓度点进行连续校准，每分析20个样品或每批次（少于20个样品/批）进行1次连续校准，测定结果相对偏差应≤20%，否则需重新建立标准曲线。11.3平行样
每20个样品或每批次（少于20个样品/批）至少分析1个平行样，平行样相对偏差≤30%。6
11.4基体加标
HJ960—2018
每20个样品或每批次（少于20个样品/批）至少分析1个基体加标样，加标回收率应在60%～145%12
废物处理
实验中产生的废液和废物应集中收集，并做好相应标识，委托有资质的单位进行处理。7
HJ960—2018
附录A
（规范性附录）
方法检出限和测定下限
当取样量为10g，试样定容体积为1.0ml，进样体积为15μl时，10种氨基甲酸酯类农药的方法检出限和测定下限见表A.1。
化合物
涕灭威亚砜
沸灭威砜
灭多威
3-羟基克百威
涕灭威
残杀威
克百威
甲蔡威
异丙威
甲硫威
方法检出限和测定下限
英文名称
Aldicarb Sulfoxide
Aldicarb Sulfone
Methomy!
3-Hydroxycarbofuran
Aldicarb
Propoxur
Carbofuran
Carbaryl
Isoprocarb
Mercaptodimethur
CAS编码
1646-87-3
1646-88-4
16752-77-5
16655-82-6
116-06-3
114-26-1
1563-66-2
63-25-2
2631-40-5
2032-65-7
检出限/
(μg/kg）
测定下限/
(μg/kg）
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