QB 2583—2003.Cellulases.
QB 2583规定了纤维素酶制剂的术语和定义、要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输、贮存。本标准适用于以木霉属（Trichoderma）为代表的微生物及其变异株，经液体深层发酵或固态培养后，精制提纯制得的酸性（或中性）纤维素酶制剂。主要用于食品、纺织、造纸等工业。食品级纤维素酶制剂也可用作饲料添加剂。
规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 191包装储运图示标志
GB/T 4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB/T 4789.3食品卫生微生物学检验大肠菌群测定GB/T 4789.4食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB/T 5009.11食品中总砷的测定方法
GB/T 5009.12食品中铅的测定方法
GB/T 8451食品添加剂中重金属限量试验法QB/T 1803-1993工业酶制剂通用试验方法
QB/T 1804工业酶制剂通用检验规则和标志、包装、运输、贮存JJF 1070定量包装商品净含量计量检验规则
国家质量技术监督局[1995]第43号令定量包装商品计量监督规定3术语、定义、符号、缩略语
下列术语、定义、符号、缩略语适用于本标准。
3.1
纤维素酶cellulases
在各种酶组分的协同作用下，能降解纤维素，使之变成纤维寡糖、纤维二糖和葡萄糖的酶。
3.2
滤纸酶活力Filter paper activity (FPA)
lg固体酶（或1 mL液体酶)，在(50±0.1)℃、指定pH条件下（酸性纤维素酶pH4.8，中性纤维素酶pH6.0)，1h 水解滤纸底物，产生出相当于1mg 葡萄糖的还原糖量，为1个酶活力单位，以u/g(或u/ml）表示。
3.3
羧甲基纤维素酶活力Sodium carboxymethylcellulose activity (CMCA)
还原糖法1g困体酶(或1mL液体酶)，在(50士0.1)℃、指定pH条件下(酸性纤维素酶pH4.8，中性纤维素酶pH6.0)，1h水解羧甲基纤维素钠底物，产生出相当于1mg 葡萄糖的还原糖量，为1个酶活力单位，以u/g(或u/mL）表示。简写为CMCA-DNS.

ICS 67.22C. 20
分类号：X59
备菜号：12497-2003
中华人民共和国轻工行业标
QB 2583—2003
纤维素酶制剂
Cellulases
2003-09-13发布
中华人民共和国国家发展和改革委员会2003-10-01实施
本标准的第5，4条为强制性的，其余为推差性的QR25832003
本标准参考广联合国粮农纠沉/世养1生组织食的加剂联合专家品会物食品器加剂综准钢要第 _Cotnpendiun of Food Additivs Specifeations, Volume I, Joim Ao/wilO Expcn Committec tnFoodAddiive【TCFA）］食品I.业州牌制剂道则十的“卫生指标”，其一欧性栏臣为非等效：本标范的录A，附，附求C为规范性内效，附录D为资科丝对录。本标准日中国轻1业该合会是山。.本标准白全国食品发醇标准化十心归口：本标准起卓单信：示国食品发障下业研宽院，北京宁馨儿牛物科技开发有表公司、诺链（十国）年密技本有限公司、中法合资总山太涉东牛物1程台限公司、厂工科学院微生物研究所。本标要止节人：张、杰志、李忠兴、微文、赵力、刘建下、保、开纳。本标注育次发布。
YYKANrKAca=
QF 25832003
本标准是针对以大露写为代来低微生物，经发酵、提取制得的纤维素解制剂，实虑一种纤维丢的友合物（纤续案降系），在各种酶的协同作用下使红维降解，所以，统称火幻红索。股来讲，红继索耐中的多架分醇系包括外划β-1.4-蒂凝酶（Exoβ1,4-glucanae，TC3.2.1.91）、内现β-1,4-蔽买遮酶（Endloβ-1,4glucanaso，F3.2.「.4.）和纤袭二糖彭Cellobiase，EC3.21.21）：同农源纤醇制可产品中三种酶组外含的比例不间，因比其呆终的参观的活力会有差异。考来望场上的纤维系背剂多，等数不，降满力标示方法名不扫尚，故制定本标准，以统国以红造素嗨的测定方决及使月单位，便使与变流产品分类中酸性纤继索轻、中性纤维素配是按型制问在使用的反适H划分：亢表1中的H系醇制制线产品的.
附表人、B所述方法，是巡在定行维素转降姆战象主微的巡原微求反缺纤维育障的总科活力：对录所述方法、品以标油两为对图、道对测定底物度的降低，待到纤殊案的的相效醇行方（侧年度映纤难素醇的内切酶活力），上产者和用者可根产作的川途选择相应的试验方议山丁大然行维索的不降性，京彻结构的多样性，酸系组或，相关浓岛和化单结构的旁定性，内切、切性的协同件用以及复众的年用膜式，等和舒产物的不断形或及改溃控制等系的影响，必此半决方法让得较好的重职性和害现性，各实验室严济：去熙标准延的底物、明、反产间与皮等条件操作一分的：
在标准情活力的测，整考了[LIPAC，FCC、JECTA推荐两力法以及S内外格关企标准的测完方法，通为反支试验、验证餐改所成，1范压
纤维素酶制乳
QR2583-2003
本标准规定了纠汇索酶制剂的本设和定义，要求、试监方法，检监规则和标示，包装，适翰、忙存、本际适刀-以木军展（）为代农的做物及其变异恢，经被体深层发酵或固态培齐后，树制握红制得的鼓性（受中性）汗维案制剂，土要月丁食品、纺织、造纸等工业。食战圾年索酬制剂比可用作制率添加
2：规范性引用文件
下列变件中的条款通本标准的引用而或为本标准的条款：是注日期的用文件，以显后所均修改单（不包损期误的内斗）或计报炼不毕于木标准，然而，鼓随很据本标这成协谈内方研究是查可使用这行的新版本：起不注口期拍引文年，其微新版本是月丁不你准：GBT19包装储送至乐标点
GB/T4789.2食品下生微生物学检监南萍总教测定GBT4789.3年卫生微生物学控览人肠菌群测定GB/T4789.4食品1生微业物学险验泌门氏菌检验C/T5009.11食品：总神的测完方法GBT5009.12食品中铅范测定方料CB/T84S食品教中事金险量试验法QR1R03—1997业醇制剂通用试验方法QB/T184工业酵划剂通用检检规则和标咨、包装。运输、览行JIF1070定至包表商品净含量计量检验期息互家质景技术监督后195会43导令定用装商品计品监督期定3术，定义，号、缩暗略语
下例术评，是义，司、缩略语适月于不标准：3. 1
纤维素酶celluleses
在各冲胺组分的与同作出下，能降瓶纤维索，仙之变成纤维弃薪、汗维二培动菌薪筛的酶。3.2
滤纸醛活力Filerpapernetivity（FPA)1g固体每（或「mt.液体酶），在（50+0.1\℃，指宝pil条\下（磁性纤维素酶p4.8，中性纤维索pl.]，1h水解滤纸底物，产生出当丁1俩猫的还原滤世，为1个静活力鸟，以/（成u/mL）表示。
骏甲基纤维末酶浩力Sodiumarluxymelhykerlluloseaeuvity（CMC4）还惊法1因体或1m体随，在！，定H条件下（限性纤绳彩I4.尺中注年维醇6.0），1h术解纤维素讷心物，产生i当于1带难的还原难掌，需1个酶活位以u/（或u/mL）表示，简写为CMCA-DS，1.
TIKAONTKa
Q92533-2003
粘度法1固体：变1mL液做），在（40土.1℃，指定pH条个下睡性红维pH6.0，性纤激筛7.3），水舒照中量舒维素纳心物，使底物站皮降低而得到伪相对下标准品的纤练来配机对醇活力。简写为CMCA-VIS。
4产品分类
4.1举适用pH
分为酸性红望汞酶利工性纠维素酶。4.2按产品形态
分为固依酶制剂和波体酶制剂两科类型。5要求
5.1净含屏
按国案质基投术监督局[199引第43号令执行。5.2外观
固沐剂型浅灰色或浅黄色，格状或颗粒忧。不需变，潮辑，结案，关异味。品溶于本，落解时充许有少立沉淀物。
液体别型棕负或视血液体，无异味，无许有少量疑采物5.3埋化要求
理化措标成符表「的规定。
纤维素酶的理化指标
总酶活力
g（/）
CMCA DNS
CMCAVIS
波剂型
T业器b
同许剂剂
食品级“
食品级产品也用网添加剂：用询范加制所素降制剂达片符含其他相关标法规的要求，1龄产品个得良品工业及划料加剂有所均销和热强酒类降外：可板意的落
5.4卫尘要求
卫生指标应符合表2的规定。
纤维莱酶的卫生指标
免品级”
工业级
复金属（以Pb计），g/kg
第，mgikg
种，ng/kg
西再总数，cfu/
大腾菌鲜，MrN100g
沙元菌（25g样）
同表1。
不得检出
工业业，
5.5保质期
QB2583-2003
5.5.1在25七以下，因位奇剂保质期不少于：1804，保质期内乱活力成不低于标示的酶治力5.5.225以下，凌位悔剂仅质期不少于90d，代质期为醇活应不低了标示的静活力5试验方法
6.1净含量
交IJF 1070执行。
6.2外观
取样品102（或ml.），观家、唤闲，你出判断，做好记录。6.3酶清力
B6.3.t滤纸酶活力：FPA
按谢束A方法测定
6.3.2翼中基纤维素（还原糖法1融活力，CMCA-DNS按附录B力法测定。
8.3.3酸甲基纤统素：（粘度法）爵h，CMCA-YB按附录C方法额定：
技 QB/T[803-1993第9章侧定.
6.5 重金属
按G/[8451测定
按GH/5009.12测定。
按B/5009.11测定。
6. B茵落总数
按GB/1 4784.2测定。
6.9大肠函群
核0B/T 4789.3定
8.10沙门氏菌
按OB/T4789.4检验。
了检验观则和标志、包装，运輪、购存7.1包装储运图示标表核GH/T191热行.7.2、食比级纤维案醛制商，产在标签（或质量江明）上标注“贪品级”学档：7.3除上达接及条款外，均按QBT1804执。3
YY KAN KAca:
QB2583-2003
A.1 原理
附最人
1规范性附录）
滤渐酶活力（FTPA）的剧定方法红班款悔在，定温度和条：下：将维亲底动沌纸水，释放山让原、在性、意洲条件下，3，5-一硝水酸（DS试剂与还原糖发生品色反应，其颜色的源浅与还原糖（以新楚计）含册成正比，适过生540m逊其吸光度，可得到产生还凉糖的量，让款出经维系薪转滤纸的活，以此化表经维衰性的每活力
A.2试剂和溶液
陷卡另有说明：在分折中设用羽认为分析物讼剂和蒸留求或去离了水或相当绝度的水。A. 2. 1DNS 试问
称取3,一荫无水杨酸（1土0.1>，曾于约Wl.巾，逐渐加入氨氧化调1J，在50℃水浴中登力）源拌游解，小依次而人消不酸甲钢200品、苯份>2无水亚硫酸纳5，待部落微洁后，净至室温：用水定穿至i0mmE，社法、所仁T棕色试剂微中、十踏处放置了d片使用，A.2.2柠腾酸婴冲液，收4.8（适用酸性纤维索龄）动取水柠操酸4.83g：率！约751mL求户，在流半视下，人竹膝酸三钢7.94：用水定穿至00：调没的到4.+.5）备。
：可采TH4.8酸：称职=求乙哦纳8.16g，于的水，1入龄2.3mE.，正定密Im.，证有济波的H到4. 1 备所
A.2.3磷晚缓冲液。0. Imol/LpHG.0（活用小-中性间维素酶）分别称夜一本楼视二至钠121.0租二火磷酸室二钠21.附g将溶料在10L太离了水中。调节落液的H到(6.0土切.各用。液液在实温下时候存个H。A.2.4葡费糖标准备雅派（10mg/mL）称取二（11士2）下州十至重的无水1g：础些0.1mg，用永落解并穿100山4.2.5葡需糖标准使用溶液
分期及取商带糖款准比备溶液0.01、1.00、1.50.2.00、2.50、3.00、3.50mL丁10m客量税月未定穿互10ml，盖塞、据勾备用.上达划浓度虑根据需要口行谢整，42.6快速定性滤纸（杭州布华号浓跃）15cm每批说纸，用前用标准加以校正？A. 3皮器
除许道实验室仪举外，还应有：A.3.1分光光度计
A.3. 2醛度摘度±0.01pH
A.3.3编本浴150101)
A.3.4分析天下感0.1mg
A.3.5磁力搅控器
A.3. 疗秒表或定物
A.3.7沸术游（-用800W电护和套厚杯、抛党氧杯或其字器纠成）A.3.9月塞别度管25L
A.4分析步猴
A.4.1给标准线
QF2583—2003
按系A1折走的显、分别现股橱菌标诺快出滚液号25，深滴（A.2.2或431利15读微A.2.[)于各营中(每管号乎行计3全样：！将标准管时管于谢水落中，1作in。取，选冷定温，月水完探至25mL，益塞，泥，用10mm比色标，准分光光度计波长540nm效测量吸光度：以期糖量为横坐标，以吸光这为制非：，绘测标曲线，获得线性回归方，线性回归系数应在,90以上时方百使压（否则须互微），表A.葡裔着标准由线
简开标陆民用科道
避mg/mT.
A.4.2：将品能测定
A.4.2.1待训酶凌的制备
张取查mi.
计注吸联宝
NS试剂吸乎：
称最完体降样1g，杭确至0.1mg（或吸没体酶样1mT，精购率.01ml.）水泽解，磁力搅择避均，发准稀释定容（使试栏液与空白液至吸光度之差怡好落0.3~0.4范用内），放置10m，行湿A.4.2.2滤源条的准品
一将持用滤延版入（）于膜器中了确4，水分平使后的滤纸制成宽1m，量为士U5mg滤纸条，折成Mt型，各月A.4.3操作择序
表四支25mL刻股月需试节：-支字管，三京择品管）。一将折成M型的滤纸案，分别设入琴支试告能底部活1cm方间紧有放入1分判向四支管中，准确入相应H的绥冲确波（A.2.3或A.231.50L一分别弹确加入稀率的待测酶液A.4.2.1心50。十一立样品管一（空管不加）使内游液滋没滤纸，前亲：
将四支试管时置于（500.1）水浴中，准确计时：支应60mm，取出。-即约地向齐督中加入DMS诚剂A.2.0.再-空自营中他期给怪好商待谢液<4.4.2.10.mL，携：将支节同时放入递水中，加热10mn，我出，迅逆冷却至室温，圳水定容，摇
以空向管对液）调仪器求点、在分光为计波540nm下，刀10mm会杯，分洲三支乎行管中拉滋的吸光度，取平均消，以吸必度平均值查标准世线或用线性回出方程求出还原糖的乐。
KNrKAca
QB2583203
A.5结果计算
FPA雌后方按式（A.上计算：
×1/0.5xm
x——样品的然纸醉后方（FA)），（或/mL)：根据段度在标准曲线上查得（或计算出）的还原量，噪：1/0.5—**·换觉成醛液1mL
悔样的诺释倍数
A.6充许差
同一试样两次测试结灵的绝对本值，不游解过节术平均但的10：变异系数不超过100
B.1原理
附录B
（规范性附录】
甲基纤维素（还原髓法）酶活力（CMCA-DN8）刷定方法QB253—2003
纤继案嗨在一定温印PH条件一，将纤维需底物（及中基红维素钳）水释，释放山还原整有赋也，滤条件下，3，5.二硝苯水好酸（DNS试剂）冶原糖发生显色反应，儿题色的深浅与还原糖（以制勾糖计）含成正出，通迁在m测其吸光，可得到产生还原糕的册，计算山间维索龄的CMCATNS酶活力.以法代表纤绝素酸的酸活力。B.？试和溶液
非品存说明、产分行中使确认为分析纯的试泓和索留水或去高广求或性当纳发的水E.2.1中基纤维索钢(CMC-N）
化学（上浮光华化学剂」）在25，2水浓，粘座800mPa5-1200rPa*s。（带批般半些红维表钢使润前用标准科加以校)。.2.2檬酸钠冲减，0.05mul/LPH4.8（危用酸性纤维素每）称取一水柠檬酸4.83号，泥于约750mT.木中，在接拌说，加入柠檬酸一销7.94号：求定率至100m，调市穿液约到4.8±0.05>备月。净：也来用pFT4.\之段强陷液：称取-水7.酸钠8.168，带干约750mL求中，加人乙能2.31mT.，T.本定存率10m，我的，（1.810.05）用
B.2.3微酸滋斗液、0.1mol/T.pH6.0（适用于[性维索酶分对称收水磷酸二氢纳121.0号和二水磷醛氨二钠21.R9g，将其济解布：10L么离水中：调节穿液间[到6.0±0.05>，备用。液在室温\可保有个月。B.2. 4CMC-Mu落液
称取2gCMCN，精价至1m：额露入相应范缓冲液（B.2.2减B.2.3）路200m加热至就-90化，边加热边感力微，至CMC-Na全部溶解，冷却片用相应的冲液稀释率3m，均2mol/1.监酸盛氧化钠州与落液的pH到（4.R+0.05）（酸牛纤维索酶）或（6.0土0.0S）中性推系族）叔完容到300ml，斗购句，忙存于冰箱中备用。T.2.5DNS 试剂
称或3,5-档基水场数.10土0.1>g：置于药600mL米中，逐渐加入氛氧化钠10，生50℃水溶中（磁力）搅择溶后，再依次加入酒石垂评钠200、年前（更蒸）2息和无水亚硫期纳5：待全部济澄消后，冷动率滑，详水定奔至100正，过滤：些存棕色试资制中，于游处成室了d定位州。B.2.6葡萄糖标游贮备游液（10mg/ml.）称取-（103土2)：下烘十至重的无水充1，括确至0.1mg，用水容台100mL.2.了简耕杯准蚀出落波
分别吸取制期标准比备溶液0.00、1.00.1.50.2.00,2.50、3.00.3.50m于10ml.容册瓶=，日水定半10ml.，盖蜜、帮勾备用。上述系列浓度权据需要山行调整。H KANY KA=
QB2583-2003
B.3收器
自动连转务公胎器
THI. 3. 2漩涡混合器
B.3.3试替，求沿等攸器
B.4分析步露
B.4.1绘伤,你准的线
按表B.1规定的基，分别吸取菌萄辨标准使用溶凌(R.2.7>，缇冲率液（.2.2或B.2.3)和DNS试剂（B.2.5)十各管中（付告号平行作3个样），泥。将标准管同时百下姚水浴中，反座10in，攻山，迈速净至室温，片水完穿个25mL，盖害，港年。10试免不，车分流光度让波区540m处测量愿光度：以使萄整量头换坐标，以聚光双为数坐标绘制标准曲线，获得线性问出方提，践性回，-系数应在,州9以上H方可使用（须求做）。表 B.1
葡萄翻标准曲线
构带糖标冲仙用落波
浓度g
B.4.2样品的测定
B.4.2.1待谢酵没的制备
深冲液设耳盘www.bzxz.net
TNS品经联益
称理固体降样1：精的至0.1mg<或吸放法体醇择1.0mL，精至0.01mL），压水咨解，准消租择定弃（使试样波卒湾的吸光度之差恰好落含0.33.-0.33范用内），混匀或置10mm1：待。B. 4.2. 2 速作程序
取四支25ml.刻浪月座试（一支凹管、支样品管）。牙改四支管一，泄确加入用相应H缓况游液配制的CMC-N液B.2.4>2.00mL分准确J1人释好的待测醛液（B.4.2.1)0.50三支样以管中（白管切），用漩涡温器约、盖密
将四支试管同时置于（50土）水浴中，殊计时，反应30in，取出。迅建速、准通地向各它人DNS试礼B.2.530mL，J穿户音中准确人稀释好的待测牌液(.4.2.1)0.50ml.，举匀.将四支管同比放入满水浴，准确计时，加热0min，胶出，还送冷至完温：用水逆容至2$mL。以空户管（刘照液）调径器零点，在公光光度让波540n下，马10mm比色杯，分判测量支栏显管摔液吸为要，取平沟值，通对合标准山线或用线性方率求1还谅撕的含。B
B.5CMCA-DNS酶活力计算
CMCA-DNS酵活力，按式（B.1）梦。X = 4x1/0.5×#×2
式中,
X—.-费甲苯纤维（还原糖法》嗨活力（CMCADNS)，u/g（或u/m.)吸光度在标准曲毁上造得（或计算出）的还原错，：1/0.5一换算成醇液1m
.-额样的稀倍效：
2—--时间换异系数，
E.6允许差
QB2583—2003
同试样两次测试综是的绝对差值，不得起划算未平均值为10%：变异系数不码过5%。YY KANr KAca:
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