HJ 1216—2021
基本信息
标准号： HJ 1216—2021
中文名称：水质浮游植物的测定0.1 ml计数框-显微镜计数法
标准类别：环境保护行业标准(HJ)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.zip .pdf
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
HJ 1216—2021.
1适用范围
HJ 1216规定了测定水中浮游植物的0.1 ml计数框-显微镜计数法。本标准适用于地表水中浮游植物的密度测定。
样品浓缩50 倍时，对角线方式计数方法检出限为9.2×10cellsL;行格方式计数方法检出限为3.0×103 cellsL;全片方式计数方法检出限为9.2×102cells/L;随机视野方式计数的方法检出限与观察的视野数、显微镜视野面积有关，按附录A计算。
2规范性引用文件
HJ 1216引用了下列文件或其中的条款。凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
GB/T 14581
水质湖泊和水库采样技术指导
HI/T 91
地表水和污水监测技术规范
HI 494
水质)采样技术指导
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1
浮游植物phytoplankton
在水中营浮游生活的微小藻类植物，通常浮游植物就是浮游藻类，包括原核的蓝藻和其它各类真核藻类。
3.2
显微镜计数视野microscope counting field
显微镜视野中限定一定面积的区域，用于定量计数浮游植物。
3.3
检出限detection limit
单次计数过程中，发现的概率不低于99%时最低的浮游植物密度。
4方法原理
在显微镜下，利用0.1 ml计数框对样品中的浮游植物进行人工分类和计数，计算单位体积样品中
1适用范围
HJ 1216规定了测定水中浮游植物的0.1 ml计数框-显微镜计数法。本标准适用于地表水中浮游植物的密度测定。
样品浓缩50 倍时，对角线方式计数方法检出限为9.2×10cellsL;行格方式计数方法检出限为3.0×103 cellsL;全片方式计数方法检出限为9.2×102cells/L;随机视野方式计数的方法检出限与观察的视野数、显微镜视野面积有关，按附录A计算。
2规范性引用文件
HJ 1216引用了下列文件或其中的条款。凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
GB/T 14581
水质湖泊和水库采样技术指导
HI/T 91
地表水和污水监测技术规范
HI 494
水质)采样技术指导
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1
浮游植物phytoplankton
在水中营浮游生活的微小藻类植物，通常浮游植物就是浮游藻类，包括原核的蓝藻和其它各类真核藻类。
3.2
显微镜计数视野microscope counting field
显微镜视野中限定一定面积的区域，用于定量计数浮游植物。
3.3
检出限detection limit
单次计数过程中，发现的概率不低于99%时最低的浮游植物密度。
4方法原理
在显微镜下，利用0.1 ml计数框对样品中的浮游植物进行人工分类和计数，计算单位体积样品中
标准图片预览
标准内容
中华人民共和国国家生态环境标准HJ1216—2021
浮游植牛
Waterquality
显微镜
文本，由生
本电子版为正式标准
2021-11-29发布
0.1ml计数框
lankton
.1 ml chamber
不境部环境示准研究所审校排版。息服务平
2022-06-01实施
部发布
行业标准信息服务平台
适用范围
规范性引用文件
术语和定义
方法原理
试剂和材料
仪器和设备
分析步骤.
结果计算与表示.
精密度
质量保证和质量控制
注意事项
废物处置
附录A（规范性附录）
附录B（资料性附录）
附录C（资料性附录）
参考文献，
随祝社
.......
野方式方法检出限白
视野面积的测量和计
...........
......+....
物计数原始记录表..
.........
HJ1216—2021
息服务平台
HJ1216—2021
为贯彻《中华人民共和国环境保护法》《中华人民共和国水污染防治法》，防治生态环境污染，改善生态环境质量，规范水中浮游植物的测定方法，制定本标准。本标准规定了测定地表水中浮游植物的0.1ml计数框-显微镜计数法。本标准的附录A为规范性附录，附录本标准为首次发布。
和附求
零料性附录。
规与你准司组织制
本标准由生态环境部生态环境监测司、本标准主要起草单位：云可省生态环境监测中心。本标准验证单位：上海市环境监河中心、中国科学院水生生物研究所、云南省生态环境厅驻昆明市易环境光测中心、云南省生态环境厅驻玉溪市生态环境监测站和云南省生态生态环境监测站、江苏省无
环境厅驻大理州生态环境
蓝测站
21年1
本标准生态环境部2
本标准自2022年6
本标准由生态环境
实施。
息服务平台
HJ1216—2021
水质浮游植物的测定0.1ml计数框-显微镜计数法1适用范围
本标准规定了测定水中浮游植物的0.1m本标准适用于地表水中浮游植物的密度测定。厅显微镜计数法。
样品浓缩50倍时，对角线方天计数方法检出限为9.2×10cells/L：行格方式计数方法检出限为3.0×103cells/L；全片方式计数方法格出限为9.2×102cews/L；随机视野方式计数的方法检出限与观察的视野数、显微镜视野面积有
2规范性引用文件
按险录A计算。
工件或其
本标准引用了下列式
凡是未注日期的引用文
GB/T14581
HJ/T91
3术语和定义
中的条
新版本（包括所有的修）
湖泊和水库采样技术
用文件，仅注日期的版本适用于本标准。适用干本标准
地表水
和污水监测技术规范
采样技
下列术语和定义适月
于本标
浮游植物
phytoplakton
在水中营浮游生活的微小买柏的，通常浮游植物就是浮游藻类，严括原核的蓝藻和其它各类真核藻类。
显微镜计数视野
microscopecourltingfield
显微镜视野中限定一定面积的区域3.3
检出限detectionlimit
4方法原理
用于定量数浮法重物。
在显微镜下，利用0.1ml计数框对样品中的浮游植物进行人工分类和计数，计算单位体积样品中各种类浮游植物的细胞数量。
HJ1216—2021
5试剂和材料
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的去离子水或蒸馏水5.1碘（I2)。
5.2碘化钾（KI)。
5.3甲醛溶液：w(HCHO)=37%～40%。5.4丙三醇（HOCH2CHOHCH2OH)。5.5鲁哥氏碘液：
称取60g碘化钾（5.2），溶于
10ml水中，再加入40.g碘（5.1），充分搅拌使其完全溶解，加水定容至1000ml，转移至棕色磨口技璃瓶6仪器和设备
25号浮游生物网：
定性采样瓶：30m
采水器：不锈钢草
定量采样瓶：1L
正置或倒置生物
浓缩装置：1L
样品瓶：50ml具
超声波发生装置：
国孔直径
有机玻
退微镜：
2L筒开
塞棕色
工作频
微量移液器：100
0.1ml浮游植物讯
盖玻片：面积22
1广口聚乙烯瓶。
离材质，圆柱形。
口聚乙烯瓶。
物镜4×、10×、20天
分液漏
璃广口
万积20mm×
镜台测微计
载物台测微计：文
网套在环上，网底端有出水开关活见格要满足采样要求。
、40×，目镜
框内划分横
0×或15×。
经各10行格，共100个小方格。
值为0.01/m。
注：DIV指等分格，1mm00hV1mm等分成100格。目镜分划板：又称目镇测微
计数器。
一般实验室常用仪器和设备
7样品
7.1样品的采集
定性样品
为0.1ml。
5mm/50DIV，分划值
息服务平
点位布设及采样频次按照GB/T14581、HJ/T91和HJ494的相关规定执行。也可根据调查研究目的确定。
使用25号浮游生物网（6.1）采集定性样品。关闭浮游生物网底端出水活塞开关，在水面表层至0.5m深处以20cm/s30cm/s的速度做“co”形往复，缓慢拖动约1min～3min，待网中明显有浮游植物进入，将浮游生物网（6.1）提出水面，网内水自然通过网孔滤出，待底部还剩少许水样（5ml～10ml）2
HJ1216—2021
时，将底端出口移入定性采样瓶（6.2）中，打开底端活塞开关收集定性样品。采集分层样品时，用25号浮游生物网（6.1）过滤特定水层样品，其他步骤同采集表层样品。定性样品采集完成后及时将浮游生物网清洗干净。样品采集后冷藏避光运输。如有定性样品采集的技术规范，按技术规范有关要求执行。7.1.2定量样品
按照GB/T14581、HJ/T91和HJ494的相关规定进行定量样品的采集。用采水器（6.3）采集样品至定量采样瓶（6.4）中，一般采集不少于500ml样品。若水体透明度较高，浮游植物数量较少时，应情增加采择体积。定量样品采集后，样品瓶不应装满，以便摇匀。注1：有些浮游植物（如蓝藻）常浮水面或成片、条带分布，可此水华密集区域采样作为峰值参考。注2：定量样品采集应在定性样
品采集之
样品的保存
定性样品
定性样品采集后立即
于氏碘
鲁哥氏碘液固定。定性样品在望活体样品在4℃~10
避光条
定量样品
即加放
定量样品采集后立
碘液（5.5）提前加入定
量采样
5℃冷藏避光条件下可
可保存Q2
样品在保存过程中
加适量的鲁哥氏碘液（5
注：若样品需长期保存
8分析步骤
8.1混匀样品
主保持固定间段采样，以便结果之间可相互比较。体移的1.0%~1.5%。镜检活体样品不加避光条件
下可保存36h。
十哥氏硕
个月。
应海周
检查鲁哥氏碘
样品的颜色
应加入
~5℃冷藏选光条件下可保存12个月。的水样你积的1.
0%1.5%。也可将鲁哥氏
品在室温避光条
条件下可保存3周：1℃~
5）的氧化程度，
若样颜色变浅，应向样品中补
黄褐色
每次取样前，采用上下颠倒至少30次的方式充分混匀所采样品，混匀动作要轻。8.2定性样品的分析
在显微镜（6.5）下观察定性样品（7.1.1)，鉴定浮游植物的种美。种类鉴定到种，其他种类至少鉴定到属。部分物种鉴定参考资料见参考文献。注：种类鉴定除用定性样品观察外，还可吸取已完成计数的定量样品进行观察。3
HJ1216—2021
8.3定量样品的分析
试样制备
8.3.1.1预检
将样品放至室温，用微量移液器（6.9）取0.1ml混匀样品，注入0.1ml浮游植物计数框（6.10）中，用盖玻片（6.11）将计数框（6.10）完全盖住，静置片刻，无气泡可观察样品，如有气泡应重新取样。随机选取若干计数小格或视野，初步估计浮游植物的数量。对于含有细胞聚集成团的浮游植物样！散处理：
，自个满定
群体中的浮游植物细胞个体较易被亲a)
与群体优
当群体中所含细胞数
将群体作为计数对复
调整浮游植物密度
下两个条件中的任何一个时，应进行超声波分识，能够对群体中的细胞进行计数：积或长度有固定水例时，
，如空星藻、盘星藻、丝状藻等，可以依据儿例得到浮游植物细胞数量。0
密度为
适宜测定的浮游植物
于107cells/L，应浓缩样品；岩定最终使加入计数框中的
0.1起楼
定量样
样品浓缩：将全部
细小虹吸管吸取上清
置王烧
将浮游植物沉淀物放入
量筒中，再用上清液定
100ghl
量样品（7.1.2）中的浮
品约含有500个~
摇匀倒入浓缩装置
量样品（7.1.）中的浮游植物细胞密度低细胞密度高
108cells/L，应稀释样品。
游植特
细胞。
中，直至浮游植物沉证物体积约20量筒中
存至所需
浓缩倍
应适时轻敲浓缩装置器壁。虹
过程中
植物密度极低，采样量
IL岁以
上时，：可多次
浓缩后的样品可根
调整至所需浓缩倍数体权。
样品稀释：根据稀科倍数，送取相分散处理后的样品，用水
容至刻线：
后的样品中的鲁哥氏碘液浓度与需料前一致。宿装置
植物可
淀物门
即每次浓缩后
日光直射
的环境下，静置48h。用
1。旋开
附在浓
门距离应
再静置2
经超声处理
后计数。
农缩装置（6.6）底部活塞，
3次，将冲洗水一并放入
宿装置壁上，在静置初期，
大于3cm。如水样中浮游
h～48h，重复浓缩操作，
于25m混匀后的定量样品或经超声应注意补充鲁哥氏碘液（5.5），使稀释注：超声波分散处理具体步驶取品定量样品于样品瓶（6.7）仍存
在显微镜（6.5）下观察，
中，用超声波发生装置（6.8）处理约10min后，则应延长封声波处理时间，直至能够准确计数。超+夫散的细胞团
伤止过换是减手蒸发和浮游模物细胞结构被破坏。声波分散处理过程中应注意水温，8.3.2显微镜计数
8.3.2.1装片
同8.3.1.1步骤进行装片。可根据需要，用滴管吸取少许丙三醇（5.1）均匀决抹盖玻片四周，以防止计数框水分蒸发形成气泡。涂抹时应避免渗入计数框。8.3.2.2选取计数方式
根据调整后样品（8.3.1.2）中浮游植物的密度，选用一种适当的计数方式，使测定过程中浮游植物细胞的总计数量为500个～1500个。表1为推荐选用的计数方式。4
表1推荐选用的计数方式
计数框中0.1ml样品含有的浮游植物细胞数（cells）500~1500
15005000
5000~10000
8.3.2.3计数
8.3.2.3.1
全片计数方式
厚游植物
在40×物镜下，逐一观察
植物细胞，并记录每行的分美计数结8.3.2.3.2
行格计数方式
在40×物镜下，逐
推荐的计数方式
全片计数
行格计数
HJ1216—2021
对角线计数、随机视野
千数框中全部100%
个小方格
分类计数每个小方格内所有浮游若浮游植物细胞体机较大时，
可降低物镜倍数。
游植特
小格的分类计数结果。在
内所有浮游植物细胞，并记录母30个小方格，分类计数每个小方格植物细胞体科较大时，可降低物镜倍数。对角线计方据
8.3.2.3.3
在40×物镜下，
立于浮游植物计数框对角线位置上的内所有浮游植物细胞，
8.3.2.3.4bzxz.net
年记象梅
个小格
随机视野
机抽取
在40×物镜下，
定数量的视里
浮游植
视野的分类计数结果。者
面积，测量和计算方法参见附录8.3.2.3.5
计数要求
质次酒
每一样品装片计数两次。
数一次，直至某两次计数结果符全这平均值。
9结果计算与表示
9.1结果计算
0个小元
格，分类计数每个小方格
植物维
胞体积
交大时，可降低物镜倍数。
类计数每个视里
内所有浮游植物细胞，并记录每个告数。计数前应测量或计算显微镜视野镜倍
物细胞总计数量结果相对偏
堂应在土15%以内，否则应增加计。测定售果为相对偏差在土15%以内的两次计数结果的息服务平台
样品中浮游植物的细胞密度，按照公式（1）进行计算。An
1×1000
-××-
式中：N-
样品中浮游植物的密度，cells/L：计数框面积，mm2：
HJ1216—2021
计数面积，当计数方式为对角线、行格和全片时计数面积分别为A/10、3A/10和A，当计数方式为随机视野时计数面积为总视野面积，mm2；显微镜观察计数的浮游植物细胞数，cells；-计数框容积，ml；
稀释或浓缩后的试样体积，ml；Vi
稀释或浓缩前的样品体积，ml；Vo
9.2结果表示
体积换算系数，ml/L。
测定结果以科学计数法表示，
10精密度
6家实验室分别用全片
保留2位有效数字。
格计数、对角线计数和随机视野计数对浮游植物密度水平分别为数
1X107 cell/L、3X107 ce s/L
内的相对标准偏差分别
差分别为22%、5.6%
间95%置信区间见表2
计数方式
全片方式（cell
行格方式（cell
对角线方式（cell
随机视野（cells/L）
质量保证和质量控制
浮游植物均匀性
计算测定结果对数
表2实验室间
的满泊样品性行了7次重复测定，实验室4.8%
3.2%：实验室间相对标准偏
信区间
工信区间
再取反对数得到的实验室
95%置信区间
6X106~1.3X107
.1×107~3.5×107
5.2×107~6.0×107
9.6X107~1.4×108
在开始显微镜计数前，应确认浮游植物车计数框中分前均匀性。使用低倍数物镜观察浮游植物在整个计数框中的分布情况，若分布不均匀，应重新取样。11.2最少计数量
在单次测定中，浮游植物细胞总计数量不少于500个。如果测定精度难以达到要求，可适当增加每次测定中浮游植物细胞的计数总量。12注意事项
12.1如果一个浮游植物细胞的一部分在行格或视野内，而另一部分在行格或视野外，则按照在行格上6
HJ1216—2021
边界及左边界或视野上半圈的细胞不计数，在行格下边界及右边界或视野下半圈的细胞计数。破损细胞或细胞残体不计数。
12.2计数过程中，如果发生样品水分蒸发，在计数框中形成气泡，则弃去本片重新取样计数。13废物处置
实验中产生的废液应分类收集，集中保管，依法委托有资质的单位进行处理。Sa
息服务平台
HJ1216—2021
附录A
（规范性附录）
随机视野方式检出限的计算
附录A给出了随机视野方式检出限的计算公式。随机视野方式的检出限与观察的视野数、视野面积和计数框面积有关。当浓缩f倍时，按服照公式（A.1）计算方法检出限。MDL
式中：MDL
方法检出限
-计数框面积，
观察的随机视
×ln0.01×108
计数框容积，
见野的面积，
显微镜1个
浓缩倍数；
显著性
面积换算
m2/cm2。
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浮游植牛
Waterquality
显微镜
文本，由生
本电子版为正式标准
2021-11-29发布
0.1ml计数框
lankton
.1 ml chamber
不境部环境示准研究所审校排版。息服务平
2022-06-01实施
部发布
行业标准信息服务平台
适用范围
规范性引用文件
术语和定义
方法原理
试剂和材料
仪器和设备
分析步骤.
结果计算与表示.
精密度
质量保证和质量控制
注意事项
废物处置
附录A（规范性附录）
附录B（资料性附录）
附录C（资料性附录）
参考文献，
随祝社
.......
野方式方法检出限白
视野面积的测量和计
...........
......+....
物计数原始记录表..
.........
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息服务平台
HJ1216—2021
为贯彻《中华人民共和国环境保护法》《中华人民共和国水污染防治法》，防治生态环境污染，改善生态环境质量，规范水中浮游植物的测定方法，制定本标准。本标准规定了测定地表水中浮游植物的0.1ml计数框-显微镜计数法。本标准的附录A为规范性附录，附录本标准为首次发布。
和附求
零料性附录。
规与你准司组织制
本标准由生态环境部生态环境监测司、本标准主要起草单位：云可省生态环境监测中心。本标准验证单位：上海市环境监河中心、中国科学院水生生物研究所、云南省生态环境厅驻昆明市易环境光测中心、云南省生态环境厅驻玉溪市生态环境监测站和云南省生态生态环境监测站、江苏省无
环境厅驻大理州生态环境
蓝测站
21年1
本标准生态环境部2
本标准自2022年6
本标准由生态环境
实施。
息服务平台
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水质浮游植物的测定0.1ml计数框-显微镜计数法1适用范围
本标准规定了测定水中浮游植物的0.1m本标准适用于地表水中浮游植物的密度测定。厅显微镜计数法。
样品浓缩50倍时，对角线方天计数方法检出限为9.2×10cells/L：行格方式计数方法检出限为3.0×103cells/L；全片方式计数方法格出限为9.2×102cews/L；随机视野方式计数的方法检出限与观察的视野数、显微镜视野面积有
2规范性引用文件
按险录A计算。
工件或其
本标准引用了下列式
凡是未注日期的引用文
GB/T14581
HJ/T91
3术语和定义
中的条
新版本（包括所有的修）
湖泊和水库采样技术
用文件，仅注日期的版本适用于本标准。适用干本标准
地表水
和污水监测技术规范
采样技
下列术语和定义适月
于本标
浮游植物
phytoplakton
在水中营浮游生活的微小买柏的，通常浮游植物就是浮游藻类，严括原核的蓝藻和其它各类真核藻类。
显微镜计数视野
microscopecourltingfield
显微镜视野中限定一定面积的区域3.3
检出限detectionlimit
4方法原理
用于定量数浮法重物。
在显微镜下，利用0.1ml计数框对样品中的浮游植物进行人工分类和计数，计算单位体积样品中各种类浮游植物的细胞数量。
HJ1216—2021
5试剂和材料
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的去离子水或蒸馏水5.1碘（I2)。
5.2碘化钾（KI)。
5.3甲醛溶液：w(HCHO)=37%～40%。5.4丙三醇（HOCH2CHOHCH2OH)。5.5鲁哥氏碘液：
称取60g碘化钾（5.2），溶于
10ml水中，再加入40.g碘（5.1），充分搅拌使其完全溶解，加水定容至1000ml，转移至棕色磨口技璃瓶6仪器和设备
25号浮游生物网：
定性采样瓶：30m
采水器：不锈钢草
定量采样瓶：1L
正置或倒置生物
浓缩装置：1L
样品瓶：50ml具
超声波发生装置：
国孔直径
有机玻
退微镜：
2L筒开
塞棕色
工作频
微量移液器：100
0.1ml浮游植物讯
盖玻片：面积22
1广口聚乙烯瓶。
离材质，圆柱形。
口聚乙烯瓶。
物镜4×、10×、20天
分液漏
璃广口
万积20mm×
镜台测微计
载物台测微计：文
网套在环上，网底端有出水开关活见格要满足采样要求。
、40×，目镜
框内划分横
0×或15×。
经各10行格，共100个小方格。
值为0.01/m。
注：DIV指等分格，1mm00hV1mm等分成100格。目镜分划板：又称目镇测微
计数器。
一般实验室常用仪器和设备
7样品
7.1样品的采集
定性样品
为0.1ml。
5mm/50DIV，分划值
息服务平
点位布设及采样频次按照GB/T14581、HJ/T91和HJ494的相关规定执行。也可根据调查研究目的确定。
使用25号浮游生物网（6.1）采集定性样品。关闭浮游生物网底端出水活塞开关，在水面表层至0.5m深处以20cm/s30cm/s的速度做“co”形往复，缓慢拖动约1min～3min，待网中明显有浮游植物进入，将浮游生物网（6.1）提出水面，网内水自然通过网孔滤出，待底部还剩少许水样（5ml～10ml）2
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时，将底端出口移入定性采样瓶（6.2）中，打开底端活塞开关收集定性样品。采集分层样品时，用25号浮游生物网（6.1）过滤特定水层样品，其他步骤同采集表层样品。定性样品采集完成后及时将浮游生物网清洗干净。样品采集后冷藏避光运输。如有定性样品采集的技术规范，按技术规范有关要求执行。7.1.2定量样品
按照GB/T14581、HJ/T91和HJ494的相关规定进行定量样品的采集。用采水器（6.3）采集样品至定量采样瓶（6.4）中，一般采集不少于500ml样品。若水体透明度较高，浮游植物数量较少时，应情增加采择体积。定量样品采集后，样品瓶不应装满，以便摇匀。注1：有些浮游植物（如蓝藻）常浮水面或成片、条带分布，可此水华密集区域采样作为峰值参考。注2：定量样品采集应在定性样
品采集之
样品的保存
定性样品
定性样品采集后立即
于氏碘
鲁哥氏碘液固定。定性样品在望活体样品在4℃~10
避光条
定量样品
即加放
定量样品采集后立
碘液（5.5）提前加入定
量采样
5℃冷藏避光条件下可
可保存Q2
样品在保存过程中
加适量的鲁哥氏碘液（5
注：若样品需长期保存
8分析步骤
8.1混匀样品
主保持固定间段采样，以便结果之间可相互比较。体移的1.0%~1.5%。镜检活体样品不加避光条件
下可保存36h。
十哥氏硕
个月。
应海周
检查鲁哥氏碘
样品的颜色
应加入
~5℃冷藏选光条件下可保存12个月。的水样你积的1.
0%1.5%。也可将鲁哥氏
品在室温避光条
条件下可保存3周：1℃~
5）的氧化程度，
若样颜色变浅，应向样品中补
黄褐色
每次取样前，采用上下颠倒至少30次的方式充分混匀所采样品，混匀动作要轻。8.2定性样品的分析
在显微镜（6.5）下观察定性样品（7.1.1)，鉴定浮游植物的种美。种类鉴定到种，其他种类至少鉴定到属。部分物种鉴定参考资料见参考文献。注：种类鉴定除用定性样品观察外，还可吸取已完成计数的定量样品进行观察。3
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8.3定量样品的分析
试样制备
8.3.1.1预检
将样品放至室温，用微量移液器（6.9）取0.1ml混匀样品，注入0.1ml浮游植物计数框（6.10）中，用盖玻片（6.11）将计数框（6.10）完全盖住，静置片刻，无气泡可观察样品，如有气泡应重新取样。随机选取若干计数小格或视野，初步估计浮游植物的数量。对于含有细胞聚集成团的浮游植物样！散处理：
，自个满定
群体中的浮游植物细胞个体较易被亲a)
与群体优
当群体中所含细胞数
将群体作为计数对复
调整浮游植物密度
下两个条件中的任何一个时，应进行超声波分识，能够对群体中的细胞进行计数：积或长度有固定水例时，
，如空星藻、盘星藻、丝状藻等，可以依据儿例得到浮游植物细胞数量。0
密度为
适宜测定的浮游植物
于107cells/L，应浓缩样品；岩定最终使加入计数框中的
0.1起楼
定量样
样品浓缩：将全部
细小虹吸管吸取上清
置王烧
将浮游植物沉淀物放入
量筒中，再用上清液定
100ghl
量样品（7.1.2）中的浮
品约含有500个~
摇匀倒入浓缩装置
量样品（7.1.）中的浮游植物细胞密度低细胞密度高
108cells/L，应稀释样品。
游植特
细胞。
中，直至浮游植物沉证物体积约20量筒中
存至所需
浓缩倍
应适时轻敲浓缩装置器壁。虹
过程中
植物密度极低，采样量
IL岁以
上时，：可多次
浓缩后的样品可根
调整至所需浓缩倍数体权。
样品稀释：根据稀科倍数，送取相分散处理后的样品，用水
容至刻线：
后的样品中的鲁哥氏碘液浓度与需料前一致。宿装置
植物可
淀物门
即每次浓缩后
日光直射
的环境下，静置48h。用
1。旋开
附在浓
门距离应
再静置2
经超声处理
后计数。
农缩装置（6.6）底部活塞，
3次，将冲洗水一并放入
宿装置壁上，在静置初期，
大于3cm。如水样中浮游
h～48h，重复浓缩操作，
于25m混匀后的定量样品或经超声应注意补充鲁哥氏碘液（5.5），使稀释注：超声波分散处理具体步驶取品定量样品于样品瓶（6.7）仍存
在显微镜（6.5）下观察，
中，用超声波发生装置（6.8）处理约10min后，则应延长封声波处理时间，直至能够准确计数。超+夫散的细胞团
伤止过换是减手蒸发和浮游模物细胞结构被破坏。声波分散处理过程中应注意水温，8.3.2显微镜计数
8.3.2.1装片
同8.3.1.1步骤进行装片。可根据需要，用滴管吸取少许丙三醇（5.1）均匀决抹盖玻片四周，以防止计数框水分蒸发形成气泡。涂抹时应避免渗入计数框。8.3.2.2选取计数方式
根据调整后样品（8.3.1.2）中浮游植物的密度，选用一种适当的计数方式，使测定过程中浮游植物细胞的总计数量为500个～1500个。表1为推荐选用的计数方式。4
表1推荐选用的计数方式
计数框中0.1ml样品含有的浮游植物细胞数（cells）500~1500
15005000
5000~10000
8.3.2.3计数
8.3.2.3.1
全片计数方式
厚游植物
在40×物镜下，逐一观察
植物细胞，并记录每行的分美计数结8.3.2.3.2
行格计数方式
在40×物镜下，逐
推荐的计数方式
全片计数
行格计数
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对角线计数、随机视野
千数框中全部100%
个小方格
分类计数每个小方格内所有浮游若浮游植物细胞体机较大时，
可降低物镜倍数。
游植特
小格的分类计数结果。在
内所有浮游植物细胞，并记录母30个小方格，分类计数每个小方格植物细胞体科较大时，可降低物镜倍数。对角线计方据
8.3.2.3.3
在40×物镜下，
立于浮游植物计数框对角线位置上的内所有浮游植物细胞，
8.3.2.3.4bzxz.net
年记象梅
个小格
随机视野
机抽取
在40×物镜下，
定数量的视里
浮游植
视野的分类计数结果。者
面积，测量和计算方法参见附录8.3.2.3.5
计数要求
质次酒
每一样品装片计数两次。
数一次，直至某两次计数结果符全这平均值。
9结果计算与表示
9.1结果计算
0个小元
格，分类计数每个小方格
植物维
胞体积
交大时，可降低物镜倍数。
类计数每个视里
内所有浮游植物细胞，并记录每个告数。计数前应测量或计算显微镜视野镜倍
物细胞总计数量结果相对偏
堂应在土15%以内，否则应增加计。测定售果为相对偏差在土15%以内的两次计数结果的息服务平台
样品中浮游植物的细胞密度，按照公式（1）进行计算。An
1×1000
-××-
式中：N-
样品中浮游植物的密度，cells/L：计数框面积，mm2：
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计数面积，当计数方式为对角线、行格和全片时计数面积分别为A/10、3A/10和A，当计数方式为随机视野时计数面积为总视野面积，mm2；显微镜观察计数的浮游植物细胞数，cells；-计数框容积，ml；
稀释或浓缩后的试样体积，ml；Vi
稀释或浓缩前的样品体积，ml；Vo
9.2结果表示
体积换算系数，ml/L。
测定结果以科学计数法表示，
10精密度
6家实验室分别用全片
保留2位有效数字。
格计数、对角线计数和随机视野计数对浮游植物密度水平分别为数
1X107 cell/L、3X107 ce s/L
内的相对标准偏差分别
差分别为22%、5.6%
间95%置信区间见表2
计数方式
全片方式（cell
行格方式（cell
对角线方式（cell
随机视野（cells/L）
质量保证和质量控制
浮游植物均匀性
计算测定结果对数
表2实验室间
的满泊样品性行了7次重复测定，实验室4.8%
3.2%：实验室间相对标准偏
信区间
工信区间
再取反对数得到的实验室
95%置信区间
6X106~1.3X107
.1×107~3.5×107
5.2×107~6.0×107
9.6X107~1.4×108
在开始显微镜计数前，应确认浮游植物车计数框中分前均匀性。使用低倍数物镜观察浮游植物在整个计数框中的分布情况，若分布不均匀，应重新取样。11.2最少计数量
在单次测定中，浮游植物细胞总计数量不少于500个。如果测定精度难以达到要求，可适当增加每次测定中浮游植物细胞的计数总量。12注意事项
12.1如果一个浮游植物细胞的一部分在行格或视野内，而另一部分在行格或视野外，则按照在行格上6
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边界及左边界或视野上半圈的细胞不计数，在行格下边界及右边界或视野下半圈的细胞计数。破损细胞或细胞残体不计数。
12.2计数过程中，如果发生样品水分蒸发，在计数框中形成气泡，则弃去本片重新取样计数。13废物处置
实验中产生的废液应分类收集，集中保管，依法委托有资质的单位进行处理。Sa
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附录A
（规范性附录）
随机视野方式检出限的计算
附录A给出了随机视野方式检出限的计算公式。随机视野方式的检出限与观察的视野数、视野面积和计数框面积有关。当浓缩f倍时，按服照公式（A.1）计算方法检出限。MDL
式中：MDL
方法检出限
-计数框面积，
观察的随机视
×ln0.01×108
计数框容积，
见野的面积，
显微镜1个
浓缩倍数；
显著性
面积换算
m2/cm2。
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