ICS11.020 61 WS 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T631—2018 日本血吸虫毛蚴检测尼龙绢袋集卵孵化法 Detection of Schistosoma japonicum miracidium Egg hatching method after nylon mesh bag concentration 2018-09-26发布 2019-04-01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会发布 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家卫生标准委员会寄生虫病标准专业委员会提出。 本标准起草单位：浙江省医学科学院寄生虫病研究所、中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、安徽省血吸虫病防治研究所、江西省血吸虫病防治研究所、浙江省开化县疾病预防控制中心。 本标准主要起草人：严晓岚、闻礼永、郑彬、汪天平、熊彦红、张剑锋、林丹丹、卢美、周晓农。 1 范围 本标准规定了检测人体粪便中日本血吸虫毛蚴的尼龙绢袋集卵孵化法。 本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对日本血吸虫毛蚴的检测。 2 规范性引用文件 WS233 病原微生物实验室生物安全通用准则。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本文件。 3 术语和定义 3.1 日本血吸虫虫卵 Schistosoma japonicum egg 呈椭圆形，淡黄色，大小为（74～106）μm ×（55～80）μm，卵壳薄而均匀，无卵盖，侧面有一小棘，成熟虫卵内可见毛蚴。 3.2 日本血吸虫毛蚴 Schistosoma japonicum miracidium 日本血吸虫幼虫发育最早阶段，呈梨形或长椭圆形，左右对称，银灰色，大小为（78～120）μm ×（30～40）μm，前端有锥形突起，体表具有纤毛。 3.3 毛蚴孵化 miracidium hatching 毛蚴在虫卵内完成胚胎发育后破壳而出的现象。 4 仪器设备 4.1 光照培养箱：光照强度1Lx～5000Lx 4.2 显微镜：40×～400× 4.3 放大镜：10× 5 试剂材料 5.1 孵化用水：无原生动物、余氯低于0.3mg/L、pH6.8～7.2的清洁水。 5.2 尼龙绢袋：57μm/25.4mm（260目）。 5.3 筛子：孔径250μm/25.4mm（60目）。 5.4 烧瓶：250mL或500mL三角或长颈烧瓶。 5.5 其他：压舌板或竹签、夹子、毛细吸管、载玻片、2%碘酒等。 6 检测步骤 6.1 样本准备 采集新鲜粪便不少于30g，置于洁净密闭容器中，标注姓名、编号及送检日期。样本应及时送检，如不能及时检测，应4℃冷藏保存，不超过24h。 6.2 样本检测 6.2.1 验收登记：核对样本信息并编号登记。 6.2.2 淋水冲洗：将筛子置于尼龙绢袋上，用水冲洗粪便并调浆，使滤液进入尼龙袋。 6.2.3 继续冲洗至滤液澄清后，将滤渣收集入烧瓶，加孵化用水至瓶口1cm处。 6.2.3 毛蚴孵化 将烧瓶置于光照培养箱（20℃～30℃）或室温条件下，在3600Lx～3800Lx光照下孵化4h～12h，观察2～3次，并设置阳性对照。 6.2.4 毛蚴观察 瓶口朝向光源观察水面下0～4cm范围内浮游情况，每瓶观察不少于3min，必要时用放大镜辅助。发现毛蚴后吸出制片观察形态。 6.3 结果判定 检出日本血吸虫毛蚴即判定为阳性。 附录A（资料性附录）孵化用水处理 A.1 自来水处理：静置24h脱氯或其他方法处理。