WS/T 148—1999 作业场所空气中对硝基苯胺的高效液相色谱测定方法 前言 本标准是与劳动卫生标准配套的监测方法，用于监测作业场所空气中对硝基苯胺的浓度。本标准参考了国外的监测方法，结合我国情况，经过实验室研究和现场验证后提出。本标准自2000年5月1日起实施。本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准起草单位：广东省职业病防治院。本标准主要起草人：黄淑莲、叶能权。本标准由卫生部委托中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。 1 范围 本标准规定了作业场所空气中对硝基苯胺浓度的高效液相色谱测定方法。本标准适用于作业场所空气中对硝基苯胺浓度的测定。 2 原理 空气中的对硝基苯胺用玻璃纤维滤膜收集，经异丙醇洗脱，硅胶不锈钢柱分离，高效液相色谱仪的紫外检测器测定，以保留时间定性，峰面积定量。 3 仪器 3.1 采样器：0~3 L/min。 3.2 玻璃纤维滤膜。 3.3 磨口刻度离心管：5 mL。 3.4 微量注射器：50 μL，10 μL。 3.5 高效液相色谱仪：内装20 μL定量进样阀。紫外检测器波长375 nm。色谱柱：200 mm×4.6 mm (i.d.) 硅胶不锈钢柱。流动相：正己烷+异丙醇 (60+40, V/V)，流量：1.0 mL/min。 4 试剂 4.1 异丙醇：重蒸馏。 4.2 正己烷：重蒸馏。 4.3 对硝基苯胺标准溶液的配制：准确称取0.1000 g对硝基苯胺，用少量异丙醇溶解后，移入10 mL容量瓶中，用异丙醇稀释至刻度。此液浓度为10 mg/mL。 5 采样 把玻璃纤维滤膜装在采样夹上夹紧，以1.5 L/min的流量采集15 L空气。 6 分析步骤 6.1 对照试验：将玻璃纤维带到采样点，除不采集空气外，其余操作同样品，作为样品的空白对照。 6.2 样品处理：打开采样夹，把玻璃纤维滤膜置于离心管中，加入5.0 mL异丙醇，用玻璃棒把玻璃纤维滤膜捣烂，浸泡40 min后过滤，收集滤液待测。 6.3 标准曲线的绘制：取6个10 mL的容量瓶，用异丙醇稀释标准溶液配制成0, 1.0, 3.0, 7.0, 10.0和20.0 μg/mL的标准系列。将仪器按操作条件调节到最佳状态，进样20 μL，分别测定标准系列，每个浓度测定3次，求峰面积的均值。以峰面积的均值为纵坐标，以对硝基苯胺的浓度为横坐标，绘制标准曲线。 6.4 测定：在标准系列测定的同样条件下，分别测定样品和空白对照；以测得的样品的峰面积减去空白对照的峰面积后，由标准曲线查得对硝基苯胺的浓度。 7 计算 7.1 按式(1)将采集空气的体积换算成标准状况下的体积。 $V_0 = V \times \frac{273}{273 + t} \times \frac{p}{101.3}$ 式中： $V_0$ —— 换算成标准状况下的采样体积，L； $V$ —— 采样体积，L； $p$ —— 采样场所的大气压，kPa； $t$ —— 采样场所的气温，℃。 7.2 按式(2)计算空气中对硝基苯胺的浓度。 $C = \frac{c \times V_s}{V_0}$ 式中： $C$ —— 空气中对硝基苯胺的浓度，mg/m³； $c$ —— 由标准曲线查得的对硝基苯胺浓度，μg/mL； $V_s$ —— 样品处理后所得样品溶液的体积，mL； $V_0$ —— 换算成标准状况下的采样体积，L。 8 说明 8.1 本法的检出限为0.02 μg/mL，最低检出浓度为0.007 mg/m³（采样体积为15 L），线性范围为0~20.0 μg/mL。当对硝基苯胺的浓度为3.0, 5.0和10.0 μg/mL时，本法的相对标准偏差分别为1.7%、0.6%和0.9%。 8.2 本法的平均采样效率为99.1%（空气中对硝基苯胺的浓度为0.24~25.94 mg/m³），平均洗脱效率97.5%。 8.3 样品在玻璃纤维滤膜中可稳定15天。空气中可能与对硝基苯胺共存的苯胺和二甲基苯胺，在本色谱条件下，对测定无干扰。 8.4 本采样方法适用于对硝基苯胺气溶胶采样。