ICS 65.120 B46 山东省地方标准 DB37/T 2140—2012 预混合饲料中维生素B1、B2、B6和烟酰胺的同步测定 高效液相色谱法 Determination of vitamin B1, B2, B6 and niacinamide in feed by high performance liquid chromatography 2012-05-14发布 2012-07-01实施 山东省质量技术监督局 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位：山东省饲料质量检验所。本标准主要起草人：强莉、李桂华、刘雪芹、李俊玲、战余铭、张玮、王现杰。 1 范围 本标准规定了用高效液相色谱仪同步测定预混合饲料中维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺的方法。 本标准适用于维生素预混合饲料和复合预混合饲料中维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺的测定。 本方法最低定量限为：维生素B1、维生素B6、烟酰胺40 mg/kg，维生素B2为10 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料试样的制备 3 原理 试料中的维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺用盐酸溶液提取，经过滤后，在高效液相色谱反相柱上分离，采用紫外检测器在280 nm处测定，外标法定量。 4 试剂 除非另有说明，分析中仅使用确认为分析纯的试剂，水符合GB/T 6682一级水规定。主要试剂包括：乙腈（色谱纯）、三氟乙酸（色谱纯）、冰乙酸（优级纯）、盐酸、氢氧化钠等。 盐酸溶液：c(HCl)=0.5 mol/L和0.1 mol/L；氢氧化钠溶液：c(NaOH)=2 mol/L；0.1%三氟乙酸溶液用于流动相配制。 标准品包括维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺，纯度均大于98%。标准贮备溶液浓度为200 μg/mL，置2℃～8℃冰箱避光保存，有效期3个月。 混合标准工作溶液由各维生素标准贮备液混合配制，稀释后标准系列浓度为0.50～10.00 μg/mL，现用现配。 5 仪器和设备 主要仪器设备包括：高效液相色谱仪（配紫外检测器）、分析天平（感量0.1 mg）、超声波清洗器（可加热至80℃）、离心机（转速≥4000 r/min）、针头过滤器等。