苹果组培苗繁育技术规程（DB13/T2596—2017） 前言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草，由河北农业大学提出并组织起草。本标准主要起草人包括师校欣、杜国强、高仪、杨丽丽、许建锋、王燕霞、张莹、刘婉君、成晓华。 1 范围 本标准规定了苹果品种和砧木（Malus spp.）组织培养繁育过程中的术语和定义、苹果组培苗生产设施、培养基制备、组培室消毒灭菌、苹果组培苗生产、组培苗质量标准、包装、标签和运输等方面的操作规程。 本标准适用于苹果品种和砧木组织培养繁育苗木。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 - GB9847 苹果苗木 - LY/T1882-2010 林木组织培养育苗技术规程 - NY/T1085-2006 苹果苗木繁育技术规程 - NY/T2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程 - NY/T2719-2015 苹果苗木脱毒技术规范 3 术语和定义 以下术语和定义适用于本文件，便于使用，部分术语来自LY/T1882-2010、NY/T2306-2013等标准。 3.1 植物组织培养（plant tissue culture）：在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞或原生质体，在人工培养基和控制的环境中使其再生新植株的过程。 3.2 茎尖培养（meristem culture）：以植物茎尖为外植体，通过组织培养获得完整植株的一种生物技术，通常用于生产脱毒利苗，获得不含检疫或影响植物生长的病毒的植株。 3.3 培养基（medium）：根据植物营养原理和植物组织培养的要求，人工配制的营养基质。 3.4 培养基母液（medium stock solution）：按试剂种类和性质配制的高于培养基配方浓度的溶液。 3.5 灭菌（sterilization）：通过物理、化学及理化方法，杀灭一切微生物（包括孢子）的过程。 3.6 消毒（disinfection）：通过物理、化学方法去除物体表面大部分有害病原微生物（孢子除外）的过程。 3.7 外植体（explant）：从自然生长的活体植物上获取的用于建立植物组培快繁体系的起始材料。 3.8 接种（inoculation）：在无菌条件下将消毒后的外植体或继代、生根组培材料接入培养基的过程。 3.9 初代培养（explant culture）：采集外植体并对其进行消毒接种，将其置于适宜的培养条件下，启动生长、获得最初的无菌培养材料的过程。 3.10 继代培养（subculture）：外植体经过初代培养后，再次接种于新培养基继续培养的过程。 3.11 丛梢（shoot clump）：在适宜条件下，外植体的顶芽或腋芽萌发形成的嫩梢，进一步形成新的芽，重复生长形成多芽多梢的集合体。 3.12 试管苗（plantlet in vitro）：通过组织培养获得的培养容器中的培养材料，包括外植体初代培养、继代培养、生根培养各阶段的组培材料。 3.13 组培苗（plant propagated via tissue culture）：利用植物组织、器官或细胞作为起始材料，通过植物组织培养方式生产获得的植株。 4 苹果组培苗生产设施 苹果组培苗繁育实验室或生产工厂应包括培养基制备室、洗涤室、灭菌室、接种室、培养室、制水室、储存室（仓库）、温室或大棚等部分，面积可根据工作（生产）规模确定。 5 培养基制备 5.1 培养基配方 5.1.1 基本培养基采用MS培养基配方。