DB21/T 3094—2018 辽宁省地方标准 种猪场欧洲型猪蓝耳病净化技术规范（The technical specifications for removing European genotype porcine reproductive and respiratory syndrome in breeding pig farm） 2018-12-25发布 2019-01-25实施 辽宁省市场监督管理局 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由辽宁省畜牧兽医局提出并归口。 本标准起草单位：锦州医科大学、辽宁省动物卫生监测预警中心、锦州市动物疫病预防控制中心等。 本标准主要起草人：李冰、刘全、高慎阳、刘英姿、陈勇、李宁、张建平、马强、赵岩、田苗、张娜、夏伟、邵奎龙、路畅、李红伟、郭雪峰、孙洪广、刘宏艳、李强、刘晓宇、王军、徐畅、何礼。 1 范围 本标准规定了种猪场欧洲型猪蓝耳病净化的术语和定义、检测方法与判定标准、净化群的建立、净化群的维持、净化场的认定及净化场的维持等内容。 本标准适用于种猪场欧洲型猪蓝耳病净化工作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 27517 鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合RT-PCR方法 GB/T 6682 实验室用水规格和试验方法 GB 16548 病害动物和病害动物产品生物安全处理规程 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范 3 术语和定义 3.1 欧洲型猪蓝耳病 欧洲型猪蓝耳病（European Genotype Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome，EU-PRRS）是由欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种高度接触性传染病。该病可引起猪只免疫抑制、母猪流产，并导致仔猪死亡，同时影响高致病性猪蓝耳病的防控，是全球养猪业危害最严重的传染病之一。 3.2 可疑感染猪群 可疑感染猪群（Suspiciously infected swine herd）是指未发现明显临床症状，但与患病猪群或受污染环境有过明显接触的猪群。 3.3 假定健康猪群 假定健康猪群（Hypothesis of healthy swine herd）是指除患病猪群和可疑感染猪群外，疫区内其他易感猪群。 4 净化群的建立 4.1 采样数量和采样时间 4.1.1 假定健康猪群 种公猪按100%比例采血，或同时按100%比例采集精液，连续采集2次，间隔14天；种母猪按25%比例采血，或同时采集活体扁桃体，连续采集2次，间隔14天。 4.1.2 可疑感染猪群 种公猪、种母猪分别按100%比例采血，或同时按100%比例采集精液，连续采集2次，间隔14天。 4.1.3 感染猪群 种公猪、种母猪、后备猪均按100%比例采血，或同时按100%比例采集精液，连续采集2次，间隔14天。 4.2 检测方法 4.2.1 检测试剂和仪器 本技术规范中使用的试剂，除另有说明外，均为分析纯。所有试剂均使用无RNA酶的容器分装，水应符合GB/T 6682标准要求，为灭菌双蒸水或超纯水。 主要试剂包括： Trizol（RNA提取试剂，粉红色，分装于棕色瓶中，4℃～8℃保存）；氯仿（4℃预冷）；异丙醇（4℃预冷）；75%乙醇（由无水乙醇和DEPC水配制，-20℃预冷）；DEPC水（在1000 mL双蒸水中加入1 mL DEPC，室温搅拌过夜后，经121℃高压灭菌25 min制备）。