DB37/T1191—2009 山东省地方标准
太平洋牡蛎苗种生产技术规程
2009-02-17 发布
2009-03-01 实施
山东省质量技术监督局 发布

前言
本标准由山东省海洋与渔业厅提出。本标准由山东省渔业标准化专业技术委员会归口。本标准起草单位：山东省海水养殖研究所。本标准主要起草人：郭文，高风祥，潘雷，营玉霞，张少春。

1 范围
本标准规定了太平洋牡蛎 [Crassostrea gigas (Thunberg)] 苗种生产中亲贝的选择和培育、苗种培育、中间培育等技术要求。本标准适用于太平洋牡蛎苗种生产。

2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB11607 渔业水质标准
NY5052 无公害食品海水养殖用水水质
NY5071 无公害食品渔用药物使用准则
SC/T2027-2006 太平洋牡蛎苗种
SC/T2026-2007 太平洋牡蛎亲贝

3 亲贝的选择和培育
3.1 亲贝的选择
亲贝规格、质量及运输方法按照 SC/T2026 的要求执行。
3.2 亲贝培育
3.2.1 培育池规格
底面积 10m²~40m²，水深 1.2m~1.5m 的室内水池。
3.2.2 培育条件
水源水质符合 GB11607 的规定，培育用水水质符合 NY5052 的规定。从亲贝生境水温逐步升至 20℃～22℃；盐度 20～30；光照 500~800 lx。
3.2.3 培育密度
采用多层网笼或单层浮式网箱为亲贝培育容器，密度为 50～100个/mL。
3.2.4 日常管理
3.2.4.1 投饵
投喂硅藻、扁藻等单胞藻或酵母粉、淀粉、藻粉等代用饵料：日投饵量 15×10⁴个/mL～25×10⁴个/mL（以硅藻为例）。
3.2.4.2 换水
早期和中期每天换水 100%；临近采卵前每天换水 150%。
3.2.4.3 倒池
隔关倒池清洗一次，临近采卵前不倒池，但应每关吸污一次。
3.2.4.4 升温
每天升温不超过 1℃，至 20℃～22℃恒温待产。
3.2.4.5 充气
前期中量充气，后期微量充气。
3.2.4.6 药物使用
符合 NY5071 的规定。

4 苗种繁育
4.1 获卵
一般采用人工刺激法或解剖受精法获得受精卵。
4.1.1 人工刺激法
通过阴干、流水、升温等方法，刺激亲贝后，将亲贝混合挂于池水中让其自行排放精卵。自然受精达到所需卵细胞密度后，移走亲贝。亲贝移走后，加大充气量，捞出上层泡沫；也可静止 1h～2h，虹吸出上层带精液的海水，再加入过滤海水，如此反复 2次～3次。清除多余的精子，提高受精卵的孵化率。
4.1.2 解剖授精法
4.1.2.1 鉴别雌雄
取少量生殖腺物质，涂于载玻片上的水滴中，卵呈颗粒状，散开快；精子呈烟雾状，散开慢。然后再用显微镜镜检严格复查一遍，分别隔离放置。
4.1.2.2 采卵
去掉鳃外套膜等部分，将性腺取出，撕破生殖腺，挤出卵子。卵先用 100目、200目筛绢过滤，以便除去较大颗粒，再用 500目筛绢过滤，除去较小杂质和组织液以备受精。
4.1.2.3 泡卵
用清洁海水稀释卵细胞的密度至 4×10⁴粒/L~8×10⁴粒/L，泡卵 30min~60min。
4.1.2.4 授精
按雌贝数量的 10% 挑取雄贝，按本标准 4.1.2.2 方法取精液；加入卵细胞液中，搅拌 5min～10min。
4.2 孵化
将受精卵移入培育池中孵化。人工刺激法采取原池孵化。
4.2.1 培育池规格
同本标准 3.2.1。
4.2.2 培育条件
水源水质符合 GB11607 的规定，培育用水水质符合 NY5052 的规定；水温 22℃～28℃；盐度 20～30；光照 500~800 lx。
4.2.3 培育密度
30个/mL~100个/mL。
4.2.4 孵化管理
受精卵入池后，每小时搅池一次，捞取水面泡沫，定时观察胚胎发育情况。
4.3 幼虫培育
4.3.1 选幼
受精卵孵化 24h 后发育至 D 形幼虫，D 形幼虫比例达到 70%～80% 时，用 300目的筛网将 D 形幼虫移入培育池中。
4.3.2 幼虫培育密度
选育后幼虫密度 10个/mL～20个/mL；壳顶后期幼虫密度应小于 4个/mL。
4.3.3 日常管理
4.3.3.1 投饵
选育后，以金藻为开口饵料，日投喂饵料密度达到 1×10⁵个/mL～2×10⁵个/mL，分 4次～6次投喂。随着幼虫生长，饵料投喂量应逐渐增加。幼虫壳长 120um 以上，可投喂角毛藻、扁藻等。幼虫发育至壳顶后期，日投喂饵料密度达到 5×10⁵个/mL～8×10⁵个/mL（以金藻为例），分 6次～8次投喂。
4.3.3.2 换水
每天换水 4次，初期每次换水 1/4，后期逐渐增加到 1/3。
4.3.3.3 倒池
每隔 3d～5d 倒池一次。
4.3.3.4 充气
100号或 120号散气石，每平方米 1个，连续微量充气。
4.4 采苗
4.4.1 采苗器制作
将壳高 6cm~8cm 的扇贝壳片用 12 股聚乙烯线串成串，每串 100 片，串长 100cm 左右。
4.4.2 采苗器处理
反复冲洗后，用 0.5%～1% 的氢氧化钠溶液或 2% 的漂白粉（含氯量 35%）溶液或稀盐酸浸泡 24h，再用砂滤海水冲洗 2~3 遍。
4.4.3 投放密度
60串/m~80串/m。
4.4.4 采苗时间
幼虫壳高达 300um 以上，出现眼点幼虫比例达 30% 以上时，对眼点幼虫进行筛选，并移入已投放采苗器的水池中，密度控制在 2个/mL～3个/mL。
4.5 采苗后管理
附苗初期水位不应低于采苗器，采用流水方式换水，减少充气量。固着后 24h，可加大换水量及充气量。经常检查幼体附着及附着后的变态情况：及时调整投饵量，日投喂单胞藻饵料密度为 20×10⁵个/mL～40×10⁵个/mL（以金藻为例）。
4.6 药物使用
符合 NY5071 的规定。

5 中间培育
5.1 环境要求
风平浪静、潮流较小、饵料丰富的海区或水深 1.5m 以下的围塘：水质应符合 NY5052 的规定；水温 15℃~26℃；盐度 18~33。
5.2 培育方式
浮筏下用网包吊养，每包放置扇贝串 10～20 串，网包间距大于 100cm。
5.3 日常管理
捕捉清除肉食性腹足类、甲壳类；洗刷清除附着生物；附着物大量繁殖季节，适当加深吊养水层；暂养一段时间后，可进行分苗疏养，每包放置扇贝串 5～10 串。

6 苗种检验
苗种规格分类、质量要求、检验方法、计数方法以及运输方法按照 SC/T2027 的规定执行。