DB63/T1166—2012 散养牛人工授精技术操作规程
青海省地方标准
发布日期：2012-12-04
实施日期：2013-01-01

前言
本规程的编写符合GB/T1.1-2009的规则。本规程由青海大学提出并归口。本规程起草单位：青海省畜牧兽医科学院。本规程起草人：徐尚荣，彭巍，孙建，张君，赛琴，赵婷静，陈光宏，许存有，靳智勇。

1 范围
本规程规定了散养牛人工授精技术的基本操作方法和操作要求。舍饲奶牛和肉用牛可借鉴本标准执行。本规程适用于细管冻精和性控冻精的牛人工授精操作。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB4143 牛冷冻精液
GB/T5458 液氮生物容器

3 冷冻精液的保存和解冻
3.1 冷冻精液的保存
3.1.1 液氮液态生物容器在运输过程中要注意防热、防震、防碰撞，容器外部加上保护套或其它保护装置。
3.1.2 液氮罐的条件必须符合GB5458液氮生物容器，液氮罐必须每年清洗一次。
3.2 冷冻精液的解冻
3.2.1 冷冻精液必须在液态生物容器中，运输和贮藏过程中均不能脱离液态生物容器液氮。每批精液人工授精前必须进行精液品质检查、精子活率检查，参照GB4143牛冷冻精液规定执行。每年繁殖季节开始前和新引进精液后，必须进行精子活力的检查，精子活力低于0.35，精液不能使用；定期检查并及时添加液态生物容器中的液氮，液氮量不能少于液态生物容器1/3。
3.2.2 取冻精时，液氮罐中盛放冻精的提斗不能超过液氮罐的部分，精液在空气中的停留时间不超过10秒。
3.2.3 细管冻精解冻时直接把细管投入38℃-40℃温水中，10秒-12秒后取出，即冻精颜色由乳白色变为黄色即可。
3.2.4 解冻精液在输精前应保存于17℃-20℃温度下，以保持精液的活力。在解冻后1小时内输精，最迟不能超过2小时。

4 发情鉴定
4.1 外部观察法
4.1.1 试情法：母牛主动接受试情公牛爬跨、不避让认定为发情。
4.1.2 观察法：母牛主动接受同圈舍母牛爬跨、从阴门流出大量粘稠的黏液，且黏液透明，牵缕不断，为发情。
4.1.3 计步器法：母牛通过佩戴计步器，利用接收器统计牛的运动量达到发情标准判定为发情。
4.2 直肠检查法
直肠检查卵巢上有成熟卵泡，无持久黄体，卵泡弹性较好，且两侧卵巢体积差别明显，可以进行人工授精。对于不同年龄、不同营养状况的发情牛，配种时间的安排因区别对待，青年牛发情排卵时间较其他牛晚，经产且营养状况良好牛次之，营养状况差的牛发情排卵最快。
4.3 B超检查法
B超检查是通过B超探头对卵巢及卵泡发育进行视频观察，若发现卵巢上有成熟卵泡即可输精。

5 输精器械
5.1 消毒药品
酒精75%，2%-5%新洁尔灭液或0.1%高锰酸钾溶液。
5.2 器械
与现有输精枪外套匹配的输精枪两把，长镊子（20厘米）以上两把，精液剪一把，水浴锅或500毫升的平底容器一个，100度温度计一支，一次性输精枪外套，长臂塑料手套，消毒纱布一块或毛巾条。

6 人工授精
6.1 输精时间
老年牛输精时间可以稍提2小时。
6.2 消毒方法
6.2.1 输精器械消毒
6.2.1.1 输精前消毒：精液剪、输精枪和装好精液的输精枪外套用75%的酒精擦拭消毒。
6.2.1.2 输精后消毒：精液剪，输精枪清洗干净后擦拭并用75%的酒精消毒，放置于干燥处。
6.2.2 发情牛外阴消毒
助手将牛尾牵引至配种员方便操作的一侧固定，或配种员将牛尾牵引至不影响自已操作的一侧并固定，充分暴露外阴，用2%-5%新洁尔灭液或0.1%高锰酸钾溶液清洗外阴（洗净外阴的粪便和其他如分泌物干及皮屑等），然后用消毒过的毛巾或纱布擦拭干净。
6.3 直肠把握深部精法
配种员一只手戴上一次性塑料长臂手套，用干净温水沾湿手臂或手臂沾上石蜡油呈锥形旋转伸入直肠，寻找子宫颈，用中指、食指、无名指和拇指握住子宫颈外口端，使子宫颈外口端与小拇指形成的环口持平。并用伸入直肠的手臂压开阴门裂，另一只手持输精管由阴门缓慢插入，先斜向上再转成水平。然后借助握子宫颈外口处的手与持输精管的手进行密切的配合，使输精管缓缓进入子宫颈深部，即有优势卵泡发育侧子宫角大弯处，再缓缓的注入精液。输入精液后再缓慢旋转抽出输精枪。

7 配种登记