DB34/T2997-2017 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌检验操作规程 前言 本标准按照 GB/T1.1-2009 的规定起草，由安徽农业大学、安徽浩翔农牧有限公司提出，安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位包括安徽农业大学、安徽浩翔农牧有限公司、安徽杜洛克种猪育种有限责任公司、颖上庆丰农牧发展有限公司。主要起草人：孙裴、李郁、高亚飞、黄晓慧、崔文竹、魏建忠、殷宗俊、赵顾、张晓东、王希春。 1 范围 本标准规定了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的检验所需设备和材料、检验程序、操作步骤、与副猪嗜血杆菌的鉴别方法及结果报告。本标准适用于猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的检验。 2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用必不可少。注日期的引用文件，仅该日期版本适用；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用本标准： - GB4789.28 食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求 - GB14922.2 实验动物微生物学等级及监测 - NY/T537 猪放线杆菌胸膜肺炎诊断技术 - SN/T1447 猪传染性胸膜肺炎检疫技术规范 3 主要设备和材料 3.1 显微镜：物镜 10倍～100倍。 3.2 电子天平：感量 0.1 g。 3.3 恒温培养箱。 3.4 冰箱：2℃~5℃，-20℃。 3.5 无菌培养皿：直径 90 mm。 3.6 无菌试管：15 mm × 150 mm。 3.7 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL。 3.8 pH计或 pH 比色管或精密 pH 试纸。 3.9 灭菌棉拭子。 3.10 革兰氏染色液：按照 GB4789.28 执行。 3.11 鲜血平板培养基：制备方法见附录 A 中 A.1。 3.12 营养琼脂培养基：按照 GB4789.28 执行。 3.13 尿素琼脂培养基：按照 GB4789.28 执行。 3.14 改良 TSB 肉汤培养基：制备方法见附录 A 中 A.2。 3.15 改良 TSA 培养基：制备方法见附录 A 中 A.3。 3.16 巧克力琼脂培养基（CA）：制备方法见附录 A 中 A.4。 3.17 改良 PPLO 琼脂培养基（mPPLO）：制备方法见附录 A 中 A.5。 3.18 糖发酵培养基：按照 GB4789.28 执行。 3.19 ONPG 培养基：按照 GB4789.28 执行。