ICS 07.100.10
C04
DB22 吉林省地方标准
DB22/T243—2019（代替 DB22/T243-2000）
霍乱弧菌检测气相色谱-质谱法
Method of Vibrio cholerae With Gas chromatography-mass spectrometry
2019-10-14发布
2019-11-01实施
吉林省市场监督管理厅 发布

前言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则修订。本标准代替DB22/T243-2000《气相色谱-质谱检测霍乱弧菌的方法》。与2000版相比，主要技术变化如下：修改标准名称为《霍乱弧菌检测气相色谱-质谱法》；在“规范性引用文件”中增加GB/T6682和GB19489，删除GB15984-1995；增加“原理”；修改“试剂和材料”（2000年版3）；增加“标准菌株”“材料”“恒温培养箱”“Ⅱ级生物安全柜”；增加“样品分离培养方法”；修改“色谱条件”和“进样方式”；增加“质量保证”“废弃物的处理”“试验报告”。本标准由吉林省卫生健康委员会提出并归口，由吉林省疾病预防控制中心负责修订。本标准历次版本为DB22/T243-2000。

警示：使用本标准的人员应具有正规实验室工作经验。本标准未指出所有安全问题，使用者需采取适当安全和健康措施，并符合国家相关法规要求。

1 范围
本标准规定了霍乱弧菌气相色谱-质谱检验方法，适用于病例样本和环境样本中霍乱弧菌的检测。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期版本适用；凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用。
GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB19489 实验室生物安全通用要求

3 原理
气相色谱是一种以气体为流动相的柱色谱分离技术，并与适当鉴定手段结合的分析方法。不同菌属或同属不同血清型细菌全细胞脂肪酸组成不同，具有各自的色谱-质谱指纹图谱，根据峰值进行判断。霍乱弧菌特异性峰值包括羟基十四烷酸甲酯（C15H30O3）、油酸甲酯（C18H34O2）、亚油酸甲酯（C18H32O2）和异硬脂酸甲酯（C19H38O2）。霍乱弧菌埃尔托生物型稻叶血清型与小川血清型可通过十六烯酸甲酯（C17H32O2）进行区分。

4 试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T6682一级水要求。
4.1 甲醇（色谱纯）
4.2 氢氧化钾（色谱纯）
4.3 正庚烷（色谱纯）
4.4 氯化钠（色谱纯）
4.5 无水硫酸钠（色谱纯）
4.6 石油醚（60℃~90℃，色谱纯）
4.7 甲醇-甲苯-硫酸溶液（30+15+1）
4.8 三氟化硼-甲醇溶液（15+85）
4.9 氢气
4.10 生理盐水