ICS65.020.30 DB13 河北省地方标准 DB13/T1213—2010 奶牛性控冻精输精和性控胚胎移植操作规程 发布：2010-04-19 实施：2010-05-04 前言 本标准按照 GB/T1.1—2009 的规则起草，由河北省畜牧兽医局提出，河北省畜牧兽医研究所起草。主要起草人包括安永福、桑润滋、平凡、李林、徐华、邓明伟、邱静伟、刘春红、郑国强、侯井锋、王庆勇、张克菊。 1 范围 本标准规定了奶牛性控冻精和性控胚胎的术语和定义、性控冻精的质量、保存和运输、授精母牛选择、性控冻精输精操作以及性控胚胎移植操作。本标准适用于奶牛养殖场和授精站对奶牛应用性控冻精输精及性控胚胎移植的操作。 2 规范性引用文件 GB4143-2008 牛冷冻精液 GB/T5458-1997 液氮生物容器 NY/T1335—2007 牛人工授精技术规程 NY/T1445—2007 奶牛胚胎移植技术规程 3 术语和定义 3.1 性控冻精 通过精子分离技术将奶牛种公牛的 X、Y 精子有效分离后，将分离得到的 X 精子进行分装冷冻制成的冻精制剂。 3.2 性控胚胎 应用性别鉴别技术筛选出的可用于移植的奶牛胚胎。 4 性控冻精的质量、保存和运输 4.1 质量 每剂冻精有效精子数不低于 200 万个，X 精子含量不低于 90%，其他指标符合 GB4143—2008 要求。性控冻精授精的母牛出生率不低于 90%。 4.2 保存 性控冻精应浸泡在液氮生物容器的液氮中贮存，容器符合 GB/T5458—1997 规定。应定期检查液氮量，确保液氮液面高于冷藏物品 3~5cm。转移冻精至其他液氮容器时，在容器外停留时间不得超过 5 秒。 4.3 运输 性控冻精运输必须浸泡在液氮生物容器中，运输过程中应避免剧烈震动、倾斜和碰撞。 5 性控冻精授精母牛选择 5.1 选择中高产奶牛及其后代。 5.2 健康、体况适中、繁殖机能正常、无繁殖疾病史的未妊娠母牛。 5.3 优先选择初配母牛和三胎内经产母牛，体重达 370kg 以上，15~20 月龄为宜。 6 性控冻精输精操作 6.1 母牛发情鉴定 按 NY/T1335—2007 规定执行。 6.2 输精准备 按 NY/T1335—2007 规定执行。 6.3 解冻 按 GB4143—2008 规定执行。 6.4 输精时间确定 6.4.1 触摸卵泡法：通过直肠触摸卵泡，当卵泡壁薄、满而软、有弹性和波动感明显时进行一次输精，6~10 小时后复查，若卵泡仍未破裂，再次输精。 6.4.2 外部观察法：观察发情表现，母牛接受爬跨后 8~12 小时为适宜输精时间，若采用两次输精，第一次为 14~22 小时，青年母牛时间应适当提前。 6.5 输精方法及操作要领 6.5.1 直肠把握输精法：手五指并握呈圆锥形伸入直肠，轻柔触摸并把握子宫颈，输精器斜上方插入阴门前庭段，再略向前下进入宫颈段，通过螺旋状操作到达输精部位。 6.5.2 每头母牛使用一支输精器，注入精液前后退约 0.5cm，缓缓注入精液。 6.6 输精部位 6.6.1 排卵侧子宫角深部为主要部位，也可使用子宫体输精器后拉法保证精子进入两侧子宫角。 6.7 输精后的妊娠检查及未妊牛处理 按 NY/T1335—2007 规定执行。