DB15/T3279—2023
首根腐病锐顶镰刀菌鉴定方法
Identification of Fusarium acuminatum of alfalfa root rot

发布日期：2023-12-29
实施日期：2024-01-29
发布单位：内蒙古自治区市场监督管理局

前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。
本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古自治区农牧业技术推广中心、内蒙古自治区乡村振兴研究中心。
本文件主要起草人：史志丹、孙红霞、丁海君、房永雨、杨永青、郭呈宇、伊风艳、燕梦娇、郭晨、孙林、刘思博、张英、刘亚东、李强。

1 范围
本文件规定了首锐顶镰刀菌根腐病鉴定的主要仪器与用具、主要试剂与材料、实验室检测、结果判定。
本文件适用于首锐顶镰刀菌根腐病的室内鉴定。

2 规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 锐顶镰刀菌根腐病 (Fusarium acuminatum root rot)
由锐顶镰刀菌（Fusarium acuminatum）引起的首根腐病，在感染初期，受感染的根皮附近会出现褐色或暗褐色的坏死斑，根系毛根减少，部分叶子出现黄叶，发病严重时叶片枯黄，植株根部的中柱腐烂霉变，并发生坏死，根茎出现中空，侧根出现大量腐烂坏死，分枝减少。

4 主要仪器与用具
光学显微镜、培养箱、超净工作台、高速冷冻离心机、PCR仪、培养皿、酒精灯、血球计数板、解剖刀、接种针、移液器、枪头、离心管。

5 主要试剂与材料
5.1 试剂
5.1.1 次氯酸钠
5.1.2 无水乙醇
5.1.3 硫酸链霉素（500mg/mL）
5.1.4 真菌基因组提取试剂盒
5.1.5 PCR SuperMix
5.1.6 凝胶电泳试剂：琼脂糖、TAE、Loading Buffer、DNA Marker
5.2 培养基
5.2.1 水琼脂培养基（WA：Water Agar）：琼脂粉15g，加蒸馏水定容至1000mL，121℃高压湿热灭菌。