DB34/T3476—2019 饲料中恩拉霉素的测定 高效液相色谱法
Determination of enramycin in feeds: High performance liquid chromatography method

发布日期：2019-12-25
实施日期：2020-01-25
发布单位：安徽省市场监督管理局

前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省兽药饲料监察所提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：合肥中龙神力动物药业有限公司、安徽省兽药饲料监察所、安徽省动物疫病预防与控制中心、肥西县动物疫病预防控制中心、宣州区畜牧兽医局、安徽省畜牧技术推广总站、宿州市动物卫生监督所、中国科学技术大学附属第一医院、合肥市动物疫病预防控制中心。
本标准起草人：蔡一杰、陈静、董先敏、刘文文、李瑞、杨清、黄莺、王群、许晓靖、孟庆娟、吴蕾、王雨霜、沈岚。

1 范围
本标准规定了饲料中恩拉霉素含量测定的高效液相色谱法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中恩拉霉素含量测定。本标准定量限为1.0 mg/kg。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 14699.1 饲料采样

3 原理
试样中的恩拉霉素经丙酮盐酸溶液超声提取，过滤后经色谱柱分离，用高效液相紫外检测器检测，外标法定量。

4 试剂和材料
4.1 除特殊说明外，本方法所用试剂均为分析纯，用水符合 GB/T 6682 中一级用水的规定。
4.2 乙腈：色谱纯
4.3 磷酸二氢钠。
4.4 丙酮。
4.5 盐酸。
4.6 流动相：0.05 mol/L 磷酸二氢钠 + 乙腈，按体积比 70:30 (v/v)。
4.7 稀释液：丙酮-2 mol/L 盐酸-水 (20:1:21)。
4.8 恩拉霉素标准品：CAS 号 1115-82-5，纯度 ≥ 98.0%。
4.9 恩拉霉素标准溶液的制备
4.9.1 恩拉霉素标准溶液贮备液：精确称取 20 mg 恩拉霉素标准品（精至 0.01 mg）于 100 mL 容量瓶中，用稀释液 (4.7) 溶解，冷却，此溶液浓度为 200 μg/mL。此溶液现配现用。
4.9.2 恩拉霉素标准工作溶液：分别吸取贮备液 (4.9.1) 0.2 mL、1 mL、2 mL、5 mL、10 mL、20 mL 于 200 mL 容量瓶中，用稀释液 (4.7) 定容，标准工作溶液系列浓度分别为 0.4 μg/mL、1 μg/mL、2 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL。

5 仪器和设备