ICS65.020.30
DB37/T3677-2019
种猪场猪瘟净化技术规范
Technical Regulation of Eradication of Classical Swine Fever in Swine Breeding Farms
2019-08-30 发布
2019-09-30 实施
发布单位：山东省市场监督管理局

目录
1 范围
2 规范性引用文件
3 术语和定义
4 检测方法
4.1 仪器
4.2 耗材
4.3 试剂
4.4 猪瘟病原检测
4.5 猪瘟抗体检测
5 净化群建立
5.1 净化策略
5.2 净化前的准备工作
5.3 带毒情况摸底调查
5.4 免疫
5.5 监测与淘汰阶段
5.6 净化场的评估与认定
6 净化猪群的维持
6.1 免疫
6.2 监测
7 综合生物安全措施
7.1 合理的猪场选址
7.2 生产模式
7.3 饲养管理
7.4 消毒措施
7.5 无害化处理措施
7.6 有害生物防治
7.7 档案管理
附录A（资料性附录）：猪瘟免疫无疫评估实验室检测方法及抽样要求
附录B（资料性附录）：猪瘟净化评估实验室检测方法及抽样要求

前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施，本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：山东省动物疫病预防与控制中心、山东省畜牧总站、山东汇众兽医科技服务公司。
本标准主要起草人：李云岗、张栋、张月、周开锋、汪洋、楚遵峰、王士荣、王敏、曹振山、刘波。

1 范围
本标准规定了种猪场猪瘟净化的检测方法与判定标准、净化群的建立、净化群的维持和综合生物安全措施。本标准适用于种猪场猪瘟净化。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 17823 集约化猪场防疫基本要求
GB/T 17824.2 规模猪场生产技术规程
GB/T 16551 猪瘟诊断技术
GB/T 27540 猪瘟病毒实时荧光RT-PCR检测方法
GB/T 34729 猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测方法
NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
NY/T 1568 标准化规模养猪场建设规范
NY/T 1958 猪瘟流行病学调查技术规范
DB37/T 2384 种猪场消毒技术规范
NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范
《病死及病害动物无害化处理技术规范》

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 猪瘟 Classical Swine Fever, CSF：由黄病毒科瘟病毒属猪瘟病毒 (CSFV) 引起的一种猪的高度接触性、出血性和致死性传染病。
3.2 净化 eradication：在某一限定地区或养殖场内，根据特定疫病的流行病学调查结果和疫病监测结果，采取一系列措施，及时发现并淘汰各种形式的感染动物，达到消灭和清除传染源的过程。
3.3 净化评估 eradication evaluation：各级动物疫病预防控制机构或其他具有公信力的第三方机构对依法开办的规模化养殖场是否符合动物疫病净化条件所进行的审查、认证等活动。

4 检测方法
4.1 仪器
4.1.1 荧光PCR检测仪。
4.1.2 PCR仪和凝胶成像系统（根据实验室条件选择，替换4.1.1）。
4.1.3 高速台式冷冻离心机：可控温至4℃、离心速度可达12000r/min以上。
4.1.4 组织研磨器或者研钵。
4.1.5 普通冰箱。
4.1.6 微量移液器：0.2~21μL, 10μL~100μL, 20μL~200μL, 100μL~1000μL。
4.1.7 酶标仪。
4.1.8 恒温箱。
4.1.9 高压灭菌锅。
4.2 耗材
4.2.1 1.5mL离心管、0.2mL PCR薄壁管。
4.2.2 酶标板、移液器吸头。
4.3 试剂
4.3.1 除非另有说明，在检测中使用的试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T 6682的要求。
4.3.2 商品化RNA抽提试剂，于4℃保存。
4.3.3 无水乙醇，-20℃预冷。
4.3.4 75%乙醇，由无水乙醇和双蒸水配制，-20℃预冷。
4.3.5 dNTPs：含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10mmol/L，-20℃保存，避免反复冻融。
4.3.6 普通PCR引物参照GB/T 16551。
4.3.7 荧光PCR引物和探针参照GB/T 27540。
4.3.8 酶标检测试剂等效采用GB/T 34729商品化试剂盒。
4.4 猪瘟病原检测
4.4.1 采样准备：扁桃体采样器、灭菌0.5mL离心管、灭菌棉签或牙签、3%NaOH溶液、手电筒、记号笔、采样记录表等。
4.4.2 样品类型：
- 公猪精液：生产母猪、后备种猪
- 扁桃体：非正常生产母猪
- 流产胎儿：淋巴结、脾脏、脐带血
- 病死猪：扁桃体、脾脏、肾脏、淋巴结等。
4.4.3 采样要求