DB45/T2732—2023
猪链球菌2型抗体的检测法
酶联免疫吸附法

前言
本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西壮族自治区农业农村厅提出并宣贯。本文件由广西畜牧业标准化技术委员会归口。
本文件起草单位：广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西学刊联信息科技有限公司。
本文件主要起草人：韦显凯、郑敏、闭璟珊、周庆安、刘捷、邹联斌、苏姣秀、施开创、尹彦文、谢守玉、冯萍、屈素洁、龙凤、陆文俊、陈芳芳、张灿星、李军。

1 范围
猪链球菌2型抗体的检测酶联免疫吸附法本文件规定了猪链球菌2型抗体的酶联免疫吸附法检测的原理、试剂、器材、试验样品准备、操作方法、注意事项等要求。
本文件适用于广西壮族自治区行政区域内猪链球菌2型抗体的检测和猪只接种猪链球菌2型疫苗后的免疫效果评价。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 19489 实验室生物安全通用要求。

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，简称 ELISA），是一种酶联免疫技术。将已知的抗原或抗体吸着在固相载体，加入待测的标本，通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比，从而测定抗体或抗原含量。
3.2 光密度（Optical Density，简称 OD），测量被检测物吸收掉光以及有多少光穿过了这个物体。

4 原理
在固相载体微孔板上预包被纯化的猪链球菌2型特异性抗原，被检血清中含有猪链球菌2型抗体时，抗体与微孔壁上的抗原形成抗原-抗体复合物，再与羊（兔）抗免疫球蛋白 G（IgG）酶标记物反应，最后通过测定酶作用底物催化后的产物颜色反应判断结果，检测猪链球菌2型抗体水平。

5 试剂
使用的试剂如下：
预包被猪链球菌2型抗原的微孔板；
血清稀释液；
猪链球菌2型阳性对照血清。