ICS 65.020.01 CCSB05 内蒙古自治区地方标准 DB15 标准 DB15/T2397-2021 黑土区甜叶菊组织培养育苗移栽技术规程 地方标准信息服务平台 发布单位：内蒙古自治区市场监督管理局 发布日期：2021-09-26 实施日期：2021-10-26 前言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区农牧厅提出，由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC20）归口。 起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业技术推广中心、扎费特旗农牧和科技事业发展中心。 主要起草人：杨彦明、刘复伟、乌恩、陈新宇、张悦忠、李志新、于长生、潘云鹤、董津蒙、王凌云、白桂香、艾俊国、陶凤英 1 范围 本标准规定了黑土区甜叶菊组织培养育苗移栽的无菌环境准备、无菌苗培养、组织培养及试管苗移栽关键技术。本标准适用于内蒙古自治区呼伦贝尔市、兴安盟和通辽市。 2 规范性引用文件 下列文件通过文中的规范性引用构成本文件必不可少的条款。注日期的引用文件，仅该日期对应版本适用；不注日期的引用文件，其最新版本适用。 - GB 13735 3 术语和定义 3.1 甜叶菊 (Stevia rebaudiana Hemsl) 菊科甜叶菊属多年生草本植物，原产于南美巴拉圭和巴西交界的高山草地。 4 无菌环境准备 4.1 湿热灭菌 培养基（不耐高温成分除外）、无菌水、玻璃器皿（三角瓶、空三角瓶、培养皿）、金属器械（剪刀、镊子）等采用高压蒸汽灭菌锅进行湿热灭菌处理。灭菌锅内加水至底部有水析出，放入物品并关严盖子，调整温度至121℃，保持20分钟。待温度上升至95℃以上时，将出气阀和安全阀关闭；当气压降至0.05 MPa以下时，打开排气阀，冷却后取出。 4.2 干热灭菌 耐热器械（部分玻璃器皿）采用干热灭菌，利用烘箱加热至170℃，持续90分钟。 4.3 过滤灭菌 植物激素（6-BA、NAA、IBA）采用过滤灭菌，使用滤膜孔径0.45 μm以下的微孔过滤器。 4.4 灼烧灭菌 无菌操作器械采用灼烧灭菌，可使用接种用电热灭菌器或酒精灯进行灼烧。