DB35/T1911—2020 水稻品种稻瘟病（苗瘟）抗性室内鉴定技术规范 前言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草，由福建省农业科学院提出，福建省农业农村厅归口。起草单位为福建省农业科学院植物保护研究所，主要起草人包括石妞妞、杜宜新、阮宏椿、陈福如、杨秀娟、甘林、代玉立。 1. 范围 本标准规定了水稻品种抗稻瘟病（苗瘟）室内人工接种鉴定的术语和定义、鉴定方法、材料和土壤处理方法。适用于水稻品种抗稻瘟病（苗瘟）的鉴定，用于评价水稻品种对稻瘟病的抗病性。 2. 术语和定义 2.1 稻瘟病：由稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）引起的水稻流行性真菌病害。 2.2 苗瘟：水稻3叶期至移栽前秧苗叶片上的稻瘟病。 2.3 人工接种鉴定：在适宜条件下，通过人工操作将接种体接种于水稻植株上，判别水稻品种的抗病性的接种鉴定方法。 2.4 接种体：用于人工接种鉴定的水稻稻瘟病菌分生孢子悬浮液。 2.5 喷雾接种：将水稻稻瘟病菌分生孢子悬浮液喷雾至水稻叶片上，使其感染稻瘟病菌的接种方法。 2.6 对照品种：在鉴定水稻品种抗病性时设置的感病品种。 3. 鉴定方法 3.1 鉴定圃设置 在可控温、控湿、控光的鉴定圃内设置20个以上的鉴定池。 3.2 育苗方法 播种前60天将鉴定池内土壤翻晒，播种前20天施肥浸泡。每平方米施复合肥（N-P-K: 15-15-15）0.16kg。播种前1天平整鉴定池泥浆，排除积水，将各鉴定池划分为长20cm、宽10cm的若干单元格。参鉴品种经过浸种、催芽后按编号顺序播种，每个单元格内播种3丛，每丛10～15粒种子，并随机插入对照品种。 3.3 接种体制备 3.3.1 培养基制备 淀粉培养基：将可溶性淀粉10g、酵母浸膏2g、碳酸钙3g和琼脂18g加入800mL水中，加热至琼脂融化，加水定容至1000mL，调节pH至6.5，在121℃下湿热灭菌25分钟。 米糠培养基：将米糠20g、琼脂20g加入800mL水中，加热至琼脂融化，加水定容至1000mL，调节pH至6.5，在121℃下湿热灭菌25分钟。 3.3.2 菌株选择 选择全省水稻主要种植区域内强致病力的稻瘟病菌菌株20株以上。 3.3.3 稻瘟病菌培养 将选定的稻瘟病菌菌株置于可溶性淀粉培养基平板上，28℃恒温黑暗培养7天，打取5mm的菌丝块备用。将灭菌米糠培养基倒入9cm直径灭菌培养皿，每皿倒入30mL～40mL米糠培养基，将菌丝块接种至米糠培养基平板上，在28℃恒温黑暗培养10天，使用无菌毛笔刷除表面菌丝体。 3.3.4 接种体 在光学显微镜下观察稻瘟病菌的分生孢子产孢情况，使用血球计数板调整孢子浓度至1×10^6个/mL，作为接种体。 3.4 苗瘟接种方法 水稻苗3～4叶期时，接种体中加入吐温80，使其浓度达到0.1%。