ICS 65.020.20
B 20
DB41
河南省地方标准
DB41/T 1733-2018
玉米中伏马毒素B1的测定 荧光偏振免疫分析法

2018-11-26发布
河南省质量技术监督局
2019-02-26实施

前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由河南省农业厅提出并归口。
本标准起草单位：河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，河南省农产品质量安全检测中心，延津县农产品质量安全检测站。
本标准主要起草人：刘冬梅、刘继红、王红旗、余新华、李淑芳、尹海燕、马莹、张军锋、张迪、曹成、徐晋豫。

1 范围
本标准规定了玉米中伏马毒素B1的测定 荧光偏振免疫分析法。
本标准适用于玉米中伏马毒素B1的测定。
本标准的检测限为4.743 ug/kg。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理
试样中用磷酸盐缓冲溶液提取的伏马毒素B1与伏马毒素抗体形成复合物。在溶液中加入伏马毒素B1荧光标记物，与伏马毒素B1竞争伏马毒素抗体，形成伏马毒素B1荧光标记物与伏马毒素抗体的复合物，产生荧光偏振。通过测定荧光偏振强度计算伏马毒素B1含量。

4 试剂
试剂中的用水应符合GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法。
4.1 伏马毒素B1荧光标记物（6,11-二(4,6-二氯三嗪基)氨基荧光素标记的伏马毒素B1，6,11-DTAF）（伏马毒素B1荧光标记物的配置详见附录A）。
4.2 伏马毒素抗体（P2A5-3-F3）。
4.3 γ-牛血清球蛋白（γ-BGG），>99%，CAS号9007-83-4。
4.4 甲醇（色谱纯）。
4.5 乙腈（色谱纯）。
4.6 伏马毒素B1标准品：晶体，纯度95%；或经过国家认证授予标准物质证书的标准物质。
4.7 10mM磷酸盐缓冲溶液（PBS缓冲溶液）：其中含有10mM磷酸钠，0.15M氯化钠，pH 7.2。
4.8 0.1% γ-BGG溶液：称取0.05g γ-BGG（4.3）溶解于50mL 10mM PBS缓冲溶液中（4.7）。
4.9 伏马毒素B1荧光标记物储备液（100 ug/mL）：取1mg伏马毒素B1荧光标记物（4.1），用甲醇（4.4）溶解，定容到10mL，储存于棕色瓶中，4℃保存。
4.10 伏马毒素B1荧光标记物使用液（0.4 ug/mL）：取8 uL伏马毒素B1荧光标记物储备液（4.9），加入到1992 uL PBS缓冲溶液（4.7），储存于棕色瓶中。现配现用。
4.11 抗体溶液（4.0 ug/mL）：抗体用0.1% γ-BGG溶液（4.8）稀释到浓度为4.0 ug/mL。
4.12 1000 ug/mL伏马毒素B1标准贮备液：称取1mg伏马毒素B1，用甲醇溶解，定容到10mL容量瓶中。-20℃冰箱中保存。

5 仪器
（注：原文此处缺失具体仪器列表，仅保留标题结构）

6 试样制备
（注：原文此处缺失具体制备步骤，仅保留标题结构）

7 分析步骤
7.1 提取
（注：原文此处缺失具体提取步骤，仅保留标题结构）
7.2 测定
（注：原文此处缺失具体测定步骤，仅保留标题结构）

8 计算
（注：原文此处缺失具体计算公式，仅保留标题结构）

9 精密度
9.1 重复性
（注：原文此处缺失具体数据，仅保留标题结构）
9.2 再现性
（注：原文此处缺失具体数据，仅保留标题结构）