ICS65.020.20 B20 DB41 河南省地 方标准 DB41/T17332018 玉米中伏马毒素B，测定荧光偏振免疫分析法 2018-11-26发布 河南省质量技术监督局 2019-02-26实施 发布 前 言 1范围 2规范性引用文件 3原理. 4试剂. 5仪器. 6试样制备 7分析步骤． 7.1提取 7.2测定 8计算 9精密度 9.1重复性 9.2再现性 目 次 DB41/T1733—2018 H 3 DB41/T1733—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由河南省农业厅提出并归口。本标准起草单位：河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，河南省农产品质量安全检测中心，延津县农产品质量安全检测站。本标准主要起草人：刘冬梅、刘继红、王红旗、余新华、李淑芳、尹海燕、马莹、张军锋、张迪、曹成、徐晋豫、 II 1范围 DB41/T1733—2018 玉米中伏马毒素B，的测定荧光偏振免疫分析法本标准规定了玉米伏马毒素B的测定荧光偏振免疫分析法。本标准适用于玉米中伏马毒素B的测定。本标准的检测限为474.3Hg/kg。规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理 试样中用磷酸盐缓冲溶液提取的伏马毒素B与伏马毒素抗体形成复合物。在溶液中加入伏马毒素B荧光标记物，与伏马毒素B竞争伏马毒素抗体，形成伏马毒素B荧光标记物与伏马毒素抗体的复合物产生荧光偏振。通过测定荧光偏振强度计算伏马毒素B含量。4试剂 试剂中的用水应符合GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法4.1伏马毒素B荧光标记物（6，-（4,6-二氯三嗪基）氨基荧光素标记的伏马毒素Bi，6-DTAF）（伏马毒素B荧光标记物的配置详见附录A）。4.2伏马毒素抗体（P2A5-3-F3）。4.3Y-牛血清球蛋白（Y-BGG），>99%，CAS号9007-83-4。4.4 甲醇（色谱纯)。 4.5乙睛（色谱纯）。 4.6伏马毒素B1标准品：晶体，纯度95%；或经过国家认证授予标准物质证书的标准物质。4.710mM磷酸盐缓冲溶液（PBS缓冲溶液）：其中含有10mM磷酸钠，0.15M氯化钠，pH-7.2。4.80.1%-BGG溶液：称取0.05gY-BGG（4.3）溶解于50mL10mMPBS缓冲溶液中（4.7）伏马毒素B荧光标记物储备液（100μg／mL）：取1mg伏马毒素B荧光标记物（4.1），用4.9 甲醇（4.4）溶解，定容到10mL，储存与棕色瓶中，4℃保存。4.10伏马毒素荧光标记物使用液（0.4Hg／mL）：取8瓜伏马毒素B荧光标记物储备液（4，9），加入到1992μLPBS缓冲溶液（4.7），储存于棕色瓶中。现配现用。4.11抗体溶液（4.0Hg／mL）：抗体用0.1%Y-BGG溶液（4.8）稀释到浓度为4.0g／mL。4.121000mg/L伏马毒素B标准贮备液：称取10mg伏马毒素B，用甲醇溶解，定容到10mL容量瓶中。-20℃冰箱中保存。 1