本标准规定了风疹的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。本标准为临床医务人员和相关工作人员提供的严格的参考和工作依据。 WS 297-2008 风疹诊断标准 WS297-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS11.020
备案号：25520—200g
中华人民共和国卫生行业标准
WS 2972008
风疹诊断标准
Diagnostic criteria for rubella2008-12-11发布
2009-06-15实施
中华人民共和国卫生部发布
缩略语
诊断依据
诊断原则：
6鉴别诊断
附录 A(资料性附录)流行病学、病原学、临床表现与鉴别诊断附录B(规范性附录)病原学诊断方法附录C(规范性附录)血清学诊断方法wS 297—2008
根据《中华人民共和国传染病防治法》制定本标准。WS297—2008
按照国家质检总局、国家标准委公告（2005年第116号），GB17009—1997《风疹诊断标准及处理原则》本标准实施之日起废止。
本标准的附录A为资料性附录.附录B、附录（为规范性附录本标准由卫生部传染病标准专业委员会提出：本标准中中华人民共和国卫生部批准。禾标滩起草单位：北京市疾病预防控制中心、北京儿医院本标准主要起草人：孙美平陈丽娟、王亚娟、杨永弘，刘东磊。1范围
风疹诊断标准
本标准规定了风疹和先天性风疹综合征的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。WS 297--2008
本标准适用于全国各级各类医疗卫生机构及其工作人员对风疹和先天性风疹综合征的诊断、报告：2缩略语
3诊断依据
3.1风疹
3. 1. 1 流行病学史
核糖核酸
先天性风疹综合征
免疫球蛋白M
免疫球蛋HG
细胞病变效应
逆转录
聚介酶链式反应
酶联免疫吸附试验
既往未患过风疹,在发病前11d~～21d内与确诊的风疹患者有明确接触史。3.1.2临床表现【参见附录A.3.1]3.1.2. 1发热，一般为低热或中度发热,1d~~2d。3. 1.2. 2全:身皮肤在起病 1d~~2d 内出现淡红色充血性斑丘疹,3.1.2.3耳后、枕后、颈部淋巴结肿大或结膜炎或伴有关节痛（关节炎）。3.1.3实验室检查
3.1.3.1咽拭了或尿液标木分离到风疹病毒，或检测到风疹病毒核酸。3.1.3.2血清风疹IgM抗体阳性(1个月内未接种过风疹减毒活疫苗）。3.1.3.3恢复期血清风疹1gG抗体或风血凝抑制抗体滴度较急性期升高≥4信。3.1.3.4急性期抗体阴性而恢复期抗休阳转。3.2先天性风疹综合征
3.2.1流行病学史
患儿母亲在妊娠早期有风疹病毒感染史。3.2.2临床表现（参见A.3.2)
3.2.2.1低出生体重，先犬性心脏病，白内障/青光眼，视网膜病，神经件耳聋。3.2.2.2血小板减少性紫.溶血性贫血，再牛障碍性贫血，脾肿大，黄疽，精神发育退缓，小头畸形，脑膜脑炎，X线骨质异常。
3.2.3实验室检查
3.2.3.1婴儿咽拭子、鼻咽吸出物，血/淋巴细胞、尿液，脑脊液或脏器活检标本分离到风疹病毒或检测到风疹病毒 RNA,
风疹病毒的分离按附录 B中 B.1 进行,风疹病毒 RNA 检测按 B. 2 规定进行。WS297-2008
3.2.3.2婴儿血清风疹IgM抗体阳性，检测方法按附录C进行。3.2.3.3婴儿风疹IgG抗体水平持续与母体抗体水平持平或更高4诊断原则
根据临床表现结合流行病学做出临床诊断。根据血清风疹抗体的检测或风疹病原学检测结果予以确诊。
5诊断
CHINGHOUSE
5.1风疹
5. 1. 1 疑似病例
符合以下任何一项者：
5.1.1.1同时符合3.1.2.1
5.1.1.2同时符合3.1.2
5.1.2临床诊断病例
疑似病例并同时符
5.1.3确诊病例
疑似病例并同时符1.3中的任何一项5.2先天性风疹综合征
5.2.1疑似病例
具备3.2.2.1mQ或）3.2.2.2。
5.2.2临床诊断病例
疑似病例并间时特合3.2. 1。
5.2.3确诊病例
疑似病例并同时特合3.2.3中的任何项IC
6鉴别诊断
风疹皮疹易与麻
握红热、登革热和幼儿急疹混，应进行鉴别，参见附录A中A.4。M
附录A
（资料性附录）
流行病学、病原学、临床表现与鉴别诊断WS297-2008
风疹为风疹病毒感染引起的急性传染病，临床以发热、全身性皮疹、淋巴结肿大为特点。孕妇在妊娠早期感染风疹病毒，可引起胎儿受感染，造成发育迟滞和胎儿畸形等严重后果。A.1流行病学
A.1.1传染源
NGHOUSE
风疹患者是传染源。
A.1.2传播途径
风疹通过呼吸道飞沫
A.1.3流行季节
亲在孕期患风，可以通过胎盘侵人胎儿。春季是风疹发病高峰
一年四季均可发生
A.1.4:传染力
风疹传染力中
生患者出现皮疹时传染力最强，皮疹前7d到疹后5d均具有传染性。先天性风疹综合征的婴儿可以存出生后数周、数月甚至1年的时间内排毒。A.1.5易感人群B
人群普遍易感感染后可以获得持久的免疫力。免疫力低下者可以发生再感染。P
A.2病原学
A.2.1形态结构
virus）属于披膜病毒科风疹病毒属。其直径50nm~70nm，呈不规则球型，中心风疹病毒（Rhbel
病毒核酸为单股正链RNA有感染性，外有核壳体呈对称的二十面体，表面有脂质包膜，包膜表面有短刺突，能凝集多种动物细胞。
A.2.2 血清与基因分型
风疹病毒只有一
因型。
个血情型，可分为Cladel和Clade2两组，各组分别有6个(A至F)和3个(A至C)基A.2.3主要结构蛋白
风疹病毒有三个重要的结构蛋户，糖蛋白E和E位于包膜能刺激机体产生血凝抑制抗体和中和抗体，E，也可刺激机体产生巾和抗体C是一种非糖基化蛋白，位于壳体。A.2.4抵抗力与培养特性
风疹病毒对紫外线和脂溶剂敏感。可在许多不同的原代和传代细胞内培养繁殖，但许多细胞系被病毒感染后，并不出现明显的细胞病变A.3临床表现
A.3.1风疹
A.3.1.1潜伏期
-般为14d~21d，平均18d
A.3.1.2前驱期
-般为1d～2d。前驱期症状轻或无明显症状。有低热或中度发热，也见高热者，持续1d～2d，3d以上者少见。此外，尚见有咳嗽、喷嚏、流涕、咽痛、嘶哑、头痛、眶后疼痛、结膜炎、食欲不振等。部分患3
WS 297—2008
者可在软聘及咽部附近见到充血性斑疹，大小如针尖或稍大，但无黏膜斑。A.3.1.3发疹期
发热1d～2d后山疹，迅速由面部、颈部、躯于波及四肢，仅1d内布及全身，但手掌、足跖大多无疹皮疹呈浅红色，稍稍隆起，大小约2mm，分布均勾，疹间有正常皮肤，躯十尤其是背部皮疹较密集。皮疹于1d～4d消退，不留色素沉着，无脱屑或有细小脱屑，可伴有轻至中度发热及上呼吸道感染症状，随疹退而消退。
A.3.1.4淋巴结肿大
耳后、枕后及颈部淋巴结肿大，可有轻度压痛，不融合，不化脓。皮疹出现后.淋巴结消退较慢，常持续2周~3周。
A.3.2先天性风疹综合征
妊娠早期感染风可造成死胎、流产，自然流产率可达20%。出生后忠先天性风疹的婴儿死亡也较多。多数先天性风疹患儿出生即有临床症状，也可于出生后数月至数年才出现进行性症状。新生儿出生后可裘现为低体重，肝、脾肿大·黄疽，紫，贫血，前肉饱满，脑炎、脑膜炎，彧问质性肺炎等。出生即发现先天性心脏病、勺内障、耳聋、小头畸形等预后差，先天性心脏病、白内障及耳聋是先天性风疹综合征存活儿常见的表现。
A.4鉴别诊断
A. 4. 1 麻疹
风疹与麻疹流行季节相同，临床症状相似。麻疹前驱期3d～4d，好发年龄为1岁～5岁。全：身症状严重，高热、卡他症状明显。口腔黏膜斑，常见于颊黏膜近回齿处约0.5mm～lrmrn大小散在白色小点，周围有红晕，也可见于下唇内侧面与牙龈之间，软聘及咽弓等处黏膜。发热3d～4d出疹，先于耳后、面部出现，白上而下蔓延；皮疹形态为充血性斑丘疹，疹问皮肤正常，密集时可融合成片；山疹持续约3d～5d,热退疹退，退疹处脱皮屑留有色素沉着。曾经接种过麻疹疫苗的患者症状可不典型，容易和风疹混淆。
A.4.2猩红热
前驱期1d.好发年龄为5岁～15岁。临床表现为高热，头痛,咽部和扁挑体炎症明显局部可见蕉白色脓性渗出物，咽喉痛。皮肤普遍充血，工有鲜红斑点疹，先见于颈、胸，发展较快，1d内迅速发展至全身，皮疹48h达高峰，一般2d～3d消退，重者可持续1周，面部无疹，但可见周卷白，有杨梅舌。咽培养可有 A组 β型溶血性链球菌生长。A.4.3登革热
流行于南方地区蚊虫叮咬季节,潜伏期为3d～14d,平 6d左右,为急性发热性疾病,其特征为头痛、高热、全身乏力、严重的关节和肌肉痛，淋巴结肿人和皮疹，皮疹多在双峰热的第二次体温升高时出现。
A.4.4幼儿急疹
无前驱期，好发年龄为6～18个月。临床表现为高热，持续3d～5d，一般状况好，热退同时出疹，皮疹为不规则充血性斑点或斑丘疹，压之褪色，1d～3d内全部褪尽，无脱屑和色素沉着4
B.1病毒分离
B.1.1标本收集与处理
B. 1. 1. 1 用于病毒分离的标本类型附录B
【规范性附录】
病原学诊断方法
WS297--2008
风疹患宜在山疹前4d～5d至疹后1d~～2d取咽拭子和尿液标本。先天性风疹综合征患儿除取啊拭子、尿液标本外，亦可根据情况于出生后尽快取鼻咽吸山物、血/淋巴细胞、脑脊液或脏器活检标本。B、1. 1.2咽拭子标本
将灭菌棉拭子稍蘸生理盐水，反复涂抹患者咽部数次，然后将棉拭了浸于1ml.2mL标本运输液（HEPES缓冲液配制的Hanks基础盐溶液pH7.4）中，并反复挤压斥，充棉拭子。B.1. 1. 3 尿液标本
无菌收集30ml.～50mL中段尿液于50mL带螺旋盖的无菌塑料离心管中，当天尽快冷链送至实验室,2000r/min，离心30min，弃上清，沉淀用1mil.标本维持液重悬，不能及时上样时，标本液于：70℃条件冻存。
B.1.2标本接种
取0.3mL~0.5mL标本液接种于规格为25cm2培养瓶中生长良好的单层传代细胞系如Vero、BHK21、RK13上，置37℃吸附1h～2h后弃液，再加入7ml.维持液，置35℃培养，次口观察有无细胞毒性存在，必要时换液。
B.1.3观察细胞病变
以后每隔ld～~2d观察细胞病变效应(CPE),连续观察7d～8d,若无CPE,应取细胞培养清液，育传3代。
风疹病毒（PE进展缓慢且较雄分辨。经常需自传1～2代后出现细胞圆化,稍胀大，细胞内颗粒增加，常在圆化细胞下仍是一层形态较正常的细胞。若不出现或山现可疑CPE，可在接种标本7d～8d后用100'1CIT)50的ECH011病毒或脊髓灰质炎J型疫苗病毒攻击，并设正常细胞对照。若对照出现病变，接种标本管无病变，表示有病毒感染的存在，B.1.4毒株鉴定
用已知风疹病毒免疫血清，观察能否与新分离的毒株反应。传统用中和试验、血凝抑制试验或采用免疫荧光法作病毒鉴定。较为简使的方法是采用血凝抑制试验，即用两支试管盛装二份阳性分离物，分别加入等量风疹阳性血清和正常动物对照血清,37℃作用1h后,分别测定血凝效价,若试管中加风疹阳性血清的而凝效价低于加正常对照血清者4倍或4倍以上,可判定阴性分离物为风疹病毒。片前普遍采用检测风疹病毒核酸的方法来鉴定风疹分离病毒株。检测方法参见A.2。B.2病毒核酸检测
B.2.1标本收集与处理
参考乃.1.1,进行标本的收集与处理。在标本的运送过程中，注意低温条件运输，在标本进入实验案后，不要反复冻融标本，以免核酸发生降解。B.2.2病毒核酸提取（按照供应商提供的最新说明进行操作)B.2.2.1利用核酸提取试剂盒，进行病毒RNA提取；B.2.2.2吸取样品140mL.,加人560μl.裂解液，混勾，室温孵育10min；5
WS297-2008
冰箱。
加人560L的冰冷无水乙醇，混勺：取630uL混合液于吸附柱中，8000r/min离心1nin；重复B.1.2.2.4;
取出吸附柱于另外一个1.5mL的离心管；吸取500μLBuflerAW1，8000r/min离心1min；取出吸附柱十另外二个1.5mL的离心管；吸取500μuLBufferAW2，13000r/min离心4min；取出吸附柱于另外一个1.5mL的收集管；在吸附柱上加30μLBufferAvE，静置1mm，8000r/min离心1min，滤出液保存于一80℃HOUSE
病毒核酸的RT-PCR
病毒RNA逆转录
a）吸取16jmLRNA和l随机引物于离心管中，70C孵育5minb）取出离心管，立即冰合
x边转录缓冲液、uL10mM的dNTPsluLMMIV和luLRNasin；c）分别加入5ul
d）瞬时离心后，放PCR仪，先升至42℃孵育45mine）然后95℃孵Qmin，置冰上3min，冻存于20℃冰箱备用；
B.2.3.2PCR扩增
a）按照下面的程：配液：
4.dNTP（25nM)（每种）
R2/25μmol/L)
6.Primer-R7e5umol/L)
b）离心混勾后
每管分装40ul，再分别加人10L逆转录产物；c）按照如下条件，PCR扩增目的片段95℃
45℃~50℃
B.2.3.3电泳检测
30~35个循环
分别取PCR产物上样，电泳检测PCR结果。B.2.4病毒核酸序列分析
B.2.4.1回收风疹PCR产物（按照最新试剂盒操作说明书进行PCR产物回收）a）加入5倍休积的PB缓冲液，混匀，加人柱子中；b）13000r/min离心1min；
c）取柱子于另外一个离心管中，加入0.75mL的PE缓冲液；d）13000r/min离心lmin,
e）在柱子中加入50uLEB缓冲液，室温静置3min；f)13000r/min离心1min，收集DNA流出液备用。6
B.2.4.2标记回收的PCR产物
WS297—2008
a）取1LICR回收产物，再分别加人3.33pmol的物.8μrL磁igdye,加人daHO至终体积20Lb）按照下列条件，进行标记反应：94%
15sX25个循环
B.2.4.3标记产物的回收
a）取2.7gG50至50mL的ddHz0巾，混句后冷藏，用前室温平衡；b）取上述配液 0. 9mL于小柱中,室温放置2min后,将柱子在架L:控下;t）2500r/rnin离心2min.弃废液；d）将标记的PCR产物上柱，注意不要接触胶而以及离心管的四壁，以免影响回收效率；e）将柱子放人新的离心管,2500r/min离心2min;f）产物在 PCR仪上 70C烘士；
g）加人20μL甲酰胺溶解，95℃变性5min；h）取出离心管，立即冰浴；
B.2.4.4上样、测序分析
wS 297—2008
C.1标本的采集、运送及储存
C.1.1血液样本采集、处理和运送附录C
(规范性附录)
血清学诊断方法
a）采集和处理血液标本要严格遵循无菌原则.在静脉或毛细血管取血。h）使用注射器或点空采血针头静脉采血，将血液标本注入无菌平口离心管、无菌试管或真空管中。立刻标明患者姓名、采血日期和标本号，确保标记的信息与病例调查表和实验室结果登记表中的信息相符
c）而液标本于室温静置30min~60min后，置普通或冷冻离心机1500r/min～~2000r/min、离心15min～20min。若没有配备离心机，血液标本筛在4℃冰箱放置过夜d）无菌移液器将血清转移至两支无菌试管或离心管(最好是带螺盖的塑料制品)中，一份备用，一份用于检测。bzxZ.net
c）用非水溶性的标记笔在两支试管或离心管工标记有关信息，在可粘贴的标签上也写明有关信息，确认所标记的信息与病例调查表中的信息相符。f）检查试管或离心管盖是否拧紧，建议用封口膜或胶带封好管口，以备安全运送，g）根据国际认可的标准程序，将血清标本连同它的实验室登记表起送至风疹参考实验室。运送时间间隔大于48h，最好将血清冷冻并用装有冰块（有十冰更好）的冷藏包运送至参考实验室。C.1.2血清标本的储存
a）而清储存条件有两种：—-种是2℃～8℃冷藏温度,另-种是≤一20℃冷冻温度。b）最好避免反复冻化，若接收的血清标本能在7d内检测，宜在2℃～8℃条件下储存;否则宣在≤一20℃条件冷冻保存。
C.2实验室检测
根据采集血液标本检测的目的不同，实验室选择的检测项目和方法也各异。每次检测最好使用同一种试剂盒，确保数据报告的一致性。检测结果可疑的必须用同种试剂进行重复实验：当认为重复结果不可靠，应收用另一种试剂盒或方法进行重复。每·份血液标本必须同时要有一份实验室登记表内容包括患者的基本信息，疫苗接种信息，临床相关信息，标本采集（时间），运送（条件）、接收（日期）、储存（地点、条件）、检测（时问、方法、结果）等信息。.2.1IgM检测诊断风疹和先天性风疹综合征用于诊断风疹的而液标本要在出疹后28d内采集。用于诊断婴幼儿的先天性风疹感染或证实先天性风疹综合征的血液标本应尽早收集，若第1份标本的风疹IgM检测阴性，而对十确实存在临床或流行病学意义的先天性风疹综合征可疑病例，需采集第2份血液标本，C.2.1.1ELISA捕捉法检测风疹IgM抗体C. 2、1. 1. 1 原理
利用包被在固相载体上的抗人 IgM μ链抗体,捕捉待检血清中的IgM,再用风疹病毒抗原和已知的酶标风疹病毒抗体去检测血清中IgM是否为抗风疹抗体。利用底物使酶显色而测知。C. 2. 1. 1. 2材料
a）聚笨乙烯40孔或96孔板。
h）抗人IgMμ链抗体。
c）风疹病毒抗原和正常对照抗原。）抗风疹病毒抗体（单克隆或多克隆）。e）酶标抗抗体：抗风疹病毒抗体和酶标抗抗体也可用酶标抗风疹病毒抗体代替，f）酶底物邻苯二胺及双氧水。
g）已知的风疹IgM抗体阳性和阴性血清：h）包被液：0.05mol/L.碳酸盐缓冲液（pH9.6）无水碳酸锅
饿酸氨钠
蒸馏水
293mg，使用不超过2周
加至100ml
i）洗涤液(NS-T):0.85%盐水的吐温液氯化钠
吡温湿
蒸馏水
加至 2 000ml
i) 稀释液为 5%牛血清的 N-T 液,k）邻苯二胺过氧化氢底物液
先配柠檬酸磷酸缓冲液（pH5.0）；磷酸氢二钠
柠檬酸
蒸馏水
临用时配底物液：
邻苯胺(OPD)
柠檬酸磷酸缓冲液
30%双氧水
C. 2. 1. 1. 3检验步骤
加至1000mL，分小瓶冰冻保存
a）包被抗人IgMμ链抗体，每孔100ul。b）4℃过夜,倒掉液体,用 10%牛血清 NS-T液120uL封闭。c）37℃1h后倒去封闭液，洗一次。wS 297—2008
d）加待测血清（1：100稀释，即1L待测血清加100uL稀释液）每孔100,L，每份血清加2孔(或4孔）,37℃2h后洗二次。
e）加风疹抗原于1孔（或2孔）中，每孔100μL；另1孔（或2孔）中加正常对照抗原，1℃过夜后，洗三次。
f）加风疹单克隆抗体每孔100L，37℃1.5h后倒去抗体，洗三次。g）加酶标记的抗鼠抗体，每孔100uL，37℃1.5h后倒去抗鼠抗体，洗4次，拍十。h）前两步.亦可用加酶标抗风疹单克隆（或多克隆）抗体一步所取代，每孔加100uL，37℃水浴2h，洗3次拍干。
i）加TMB(四甲基对二氢基联苯）-双氧水底物液，每孔100μL，37℃10min～20min。i）加终止酶的反应液即2mol/L硫酸,50uL/孔，判定结果。C.2. 1. 1.4结果的判定
a）肉眼判定法：待检血清与风疹抗原孔呈明显的棕色反应，正常对照抗原孔不（或微）显色：两者能用肉眼明显察觉者即为阳性。
b）用酶标仪的492mm光源测(D值,血清的P/N2.1时为阳性(P为待测l血消与风疹抗原作用的(D值,N为待测血清与正常对照抗原作用的(D 值)。在用待测血清与已知风疹阴性血清对比时,则P为待测血清与风疹抗原作用后的OD值,V为标本阴性血清与风疹抗原作用后(OD 值。9
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。