WS/T798-2022 中华人民共和国卫生行业标准 消毒剂消毒效果定性试验标准 应用稀释法 前言 本标准由国家卫生健康标准委员会消毒标准专业委员会负责技术审查和技术咨询，由中国疾病预防控制中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委综合监督局负责业务管理，法规司负责统筹管理。本标准起草单位包括北京市疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所、中国人民解放军疾病预防控制中心。本标准主要起草人有佟颖、于礼、沈瑾、魏秋华、王劲、韩杰、安伟、肖潇、高迪。 1 范围 本标准规定了消毒剂消毒效果定性试验应用稀释法的试验材料、染菌载体的制备、中和剂鉴定试验、杀菌试验、结果判定和注意事项。本标准适用于消毒剂对光滑硬质物体表面的实验室定性消毒效果评价。 2 规范性引用文件 下列文件通过文中的规范性引用构成本标准必不可少的条款。注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本标准；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本标准： - WS/T683 消毒试验用微生物要求 3 术语和定义 3.1 应用稀释法（used dilution method）：采用定性方法评价消毒剂对不锈钢圆筒载体上试验微生物杀灭效果的检测方法。 4 试验材料 4.1 试验微生物 4.1.1 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），试验菌种为 ATCC6538。 4.1.2 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），试验菌种为 ATCC15442。 4.1.3 肠炎沙门菌（Salmonella enterica），试验菌种为 ATCC10708。 4.2 培养基 4.2.1 传代培养基：营养肉汤或合成肉汤培养基，用于细菌传代培养（附录A）。 4.2.2 中和试验培养基 4.2.2.1 基础培养液：营养肉汤或液体硫乙醇培养基，用作中和试验基础培养基（附录A）。 4.2.2.2 中和剂培养液：根据消毒剂有效成分选择相应中和剂加入基础培养基制备，需经中和剂鉴定试验验证合格后方可使用。 4.2.3 其他培养基：胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA），用于染菌载体菌落计数（附录A.5）。 4.3 其他试剂和材料 4.3.1 磷酸盐缓冲液（附录A.6）。 4.3.2 标准硬水（附录A.7）。 4.3.3 有机干扰物：3%牛血清白蛋白，如为清洁物品采用0.3%牛血清白蛋白。 4.3.4 载体：304不锈钢圆筒，表面抛光，外径8mm±1mm，内径6mm±1mm，壁厚1mm±0.5mm，长度10mm±1mm。 4.3.5 吊钩：长度50~75mm，直径0.5mm的镍铬合金丝，末端3mm直角弯曲。 4.3.6 滤纸：直径90mm的定性滤纸。 4.3.7 器皿：25mm×100mm玻璃试管，直径90mm平皿，10mL吸管及移液器等。 4.4 仪器设备 Ⅱ级及以上生物安全柜、恒温培养箱、振荡培养箱、恒温水浴箱、计时器等。 5 染菌载体的制备 5.1 载体准备 5.1.1 外观检查：载体经肉眼观察合格方可使用，如有破损、缺口或凹陷应剔除。 5.1.2 清洗：载体置于1 mol/L NaOH溶液中浸泡约12小时，用去离子水反复冲洗3~4次，加入1%酚酞溶液检测残留，酚酞不变色后晾干密闭保存。 5.1.3 筛选测试 5.1.3.1 测试要求：未使用过或使用过但试验中无菌生长的载体，可经压力蒸汽灭菌后使用。使用过且有菌生长的载体需进行筛选测试，合格方可使用。 5.1.3.2 测试方法：按照7.1规定，在无有机干扰物条件下进行。